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1、医院环境卫生监测方法和报告医院环境卫生监测方法和报告 方式新进展方式新进展江西省肿瘤医院院感科 袁水斌如何正确对医院环境进行监测和报告结果？一、物体表面消毒效果的监测 二、手卫生效果的监测 三、空气消毒效果的监测 四、使用中消毒液染菌量测定 五、清洁用品消毒效果监测 六、内镜的消毒效果监测环境 类 别范 围 细菌数量标准 空气物体表 面 cfu/cm2医护人 员手 cfu/cm2类类层层流洁净洁净 手术术室，层层流 洁净洁净 病房。4 cfu/9cm平皿30min55类类非洁净洁净 （普通）手术术室； 产产房；导导管室；血液 病病区、烧伤烧伤 病区等 保护护性隔离病区；重症 监护监护 病区；新
2、生儿室 等。4 cfu/9cm平皿15min55类类母婴婴同室；消毒供应应中心 的检查检查 包装灭灭菌区和 无菌物品存放区；血液 透析中心（室）；其他普通住院病区等。4 cfu/9cm平皿5min1010类类普通门门（急）诊诊及其检查检查 、治疗疗（注射、换药换药 等）室；感染性疾病科 门诊门诊 和病区。4 cfu/9cm平皿5min1010一、物体表面消毒效果的监测 采样时间: 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有 关时进行采样 。 采样方法: 用5cm5cm灭菌规格板放在被检物体 表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS ）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横 竖往返各涂
3、抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样 4个规格板面积，被采表面100cm2，取全部表 面；被采表面100cm2，取100cm2。 剪去或用酒精灯烧去手接触部分，将棉拭子 放入装有10ml无菌检验用生理盐水洗脱液的试管 中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂 抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时 ，采样液应含相应中和剂。 病 房 电 脑 键 盘 的 细 菌江西省肿瘤医院微生物室上海中山医院ICU病房 检测方法: 充分振荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1. ml 接种营养琼平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂培养基每 皿倾注15mL20mL，351恒温箱培养48h，计数菌落数 。怀疑与医院
4、感染暴发有关时，进行目标微生物的检测，加种 羊血哥仑比亚琼脂平皿和麦康凯平皿等。 结果计算: 物体表面菌落总数（cfu/cm2）= （平皿菌落数10）100 =平皿菌落数10或 = （平皿菌落数10）实际采样面积 0计算的数值1 时， 报告为：物表细菌菌落数 1 cfu/cm2 1 计算的数值10时， 报告为：物表细菌菌落数： 实际计算值 cfu/cm2计算的数值 10时，报告为: 物表细菌菌落数10 cfu/cm2 如是灭菌物品物表无细菌生长时，则报告：无菌生长小型物体表面的结果计算，用 cfu/件表示：= （平皿菌落数稀释倍数）/件、类环境要求物体表面细菌菌落总数 5cfu/cm2, 有：
5、洁净手术室、其他洁净场所，非洁净（普通）手 术室、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、 新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房（ICU)、血液病病区等：、环境要求物体表面细菌菌落总数10cfu/cm2 ，有：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、 治疗室、换药室、注射室、输血科、消毒供应中 心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各 类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等：1、物体表面细菌监测采样液配制:（1） 0.03mol/L的pH7.27.4磷酸盐缓冲液 (PBS)配制：磷酸氢二钠(不含结晶水) 2.84g磷酸二氢钾(不含结晶水) 1.36g加入1000mL蒸馏水中, 溶解后分装
6、试管10mL/支，126高压 灭菌20min（2）生理盐水：氯化钠8.5g溶于1000ml蒸馏水中，溶解后 分装试管10mL/支，126高压蒸汽灭菌20min备用。2、手表面细菌监测采样液配制：无菌检验用洗脱液：吐温80：1g蛋白胨 10g氯化钠 8.5g加蒸馏水1000mL配制而成。溶解后分装试管10mL/支， 126高压蒸汽灭菌20min备用。二、手卫生效果的监测方法 采样时间 ：在接触患者、进行诊疗活动前采样。 方法： 1、被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌检验 洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返 均匀涂擦5次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程 中同时转动棉拭子；
7、2、将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10mL含相应 中和剂的无菌洗脱液试管内，充分混匀, 及时送检。 检测方法：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打 80次，用无菌吸管吸取1.0mL待检样品接种于灭菌平 皿，再加入已溶化的4548的营养琼脂15ml 18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36l混 箱培养48h，计数菌落数 。江西省肿瘤医院微生物室江西省肿瘤医院微生物室 手污染细菌菌落数计算方法手细菌菌落数(cfu/cm2)= （平皿菌落数10）（30 2）=平皿菌落数60计算的数值1 时， 报告为：手细菌菌落数 1 cfu/cm2 1 计算的数值10时， 报告为：手细菌菌落数： 实际计算
8、值 cfu/cm2计算的数值 10时，报告为: 手细菌菌落数10cfu/cm2 注：填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“，或附上相应项目的标准要求参考值 卫生手消毒后医务人员手 表面的菌落总数应10cfu/cm2。 外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应 5cfu/cm2手表面的微生物1、人手上细菌的数量和种类，与人接触物品的次数、污染的程度和清 洁习惯相关联。人手上除有大量的大肠杆菌、葡萄球菌类外，还有绿脓 杆菌、链球菌、棒状杆菌类、结核杆菌等。除了这些细菌，还有各种病 毒，如肝炎病毒、流感病毒、麻疹病毒等。通过正确的洗手方式，可以 洗去90%的细菌。人体细菌分布图是美国科罗拉多大学博
9、尔德分 校一个研究小组成功绘制出的有关人类自身微 生物方面的视图。分布图为临床医学研究提供 重要帮助，为进一步研究人体在疾病状态下菌 群分布提供基准。2009年11月初，美国研究 人员对9名健康志愿者身上27个部位的细菌群 落进行了长达3个月的深入观察分析。在3个月 内，研究人员分别对每名志愿者做了4次细菌 采样。采样工作一般在志愿者洗澡1至2小时后 进行。运用最新电脑技术及基因序列，研究人 员绘制出了人体不同部位细菌分布的概况人体正常菌群分布人体正常菌群的分布皮肤：因个人卫生及环境情况而异。最常见的是表皮葡萄球菌 ，有时亦有金黄色葡萄球菌。当皮肤受损伤时，可引起化脓性感 染，如疖、痈。在外阴
10、部与肛门部位，可找到非致病性抗酸性耻 垢杆菌。口腔：有各种球菌、乳酸杆菌（厌氧菌）、梭形菌（厌氧菌） 、螺旋体和真菌等。胃肠道：（1）空肠：常无菌，若胃功能障碍，如胃酸分泌降低，尤其 是胃癌时，往往出现八叠球菌、乳酸杆菌、芽胞杆菌等。（2）成年人的空肠和回肠上部：细菌很少，甚至无菌，肠道 下段细菌逐渐增多。主要有大肠杆菌、脆弱类杆菌、双歧杆菌、 厌氧性球菌等，其他还有乳酸杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、变形 杆菌、真菌等。人体正常菌群的分布呼吸道:（1）鼻腔和咽部：经常存在葡萄球菌、类白喉杆菌、奈瑟氏 菌等。（2）咽喉及扁桃体粘膜：主要是甲型链球菌和卡他球菌等奈 瑟氏菌占优势，此外还经常存在着潜在致
11、病性微生物如肺炎球菌 、流感杆菌、乙型链球菌等。（3）正常人支气管和肺泡：无菌。泌尿生殖道：正常情况下，仅在泌尿道外部有细菌存在，如（1）男性生殖器：有耻垢杆菌，尿道口有葡萄球菌和革兰氏阴 性球菌及杆菌；（2）女性尿道外部与外阴部：菌群相仿，除耻垢杆菌外，还有 葡萄球菌、类白喉杆菌和大肠杆菌等。阴道内的细菌随着内分泌 的变化而异。从月经初潮至绝经前一般多见的为阴道杆菌（乳酸 杆菌类）；而月经初潮前女孩及绝经期后妇女，阴道内主要细菌 有葡萄球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等。医院获得性水源性致病微生物有哪些？细细菌Bacteria寄生虫Parasites 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeru
12、ginosa 小球隐孢 子虫 Cryptosporidium parvum 嗜肺军团 菌 Legiomella Pneumophila蓝氏贾第鞭毛虫 Giardia lambia 分枝杆菌属 Mycobacterium spp棘阿米巴原虫 Acanthamoeba spp 窄食单胞菌属 Stenotrophomonas spp不动杆菌属 Acinetobacter spp真菌 Fungi 气单胞菌属 Aeromonas spp烟曲霉菌 Aspergillus fumigatus 伯克霍尔德菌属 Burkholderia spp茄病镰刀霉 Fusarium solani 克雷伯菌属 Klebsi
13、ella spp甄氏外瓶霉 Exophiala jeanseimei 奴卡氏菌属 Nocardia spp肠杆菌属 Enterobacter spp病毒 Viruses 沙雷菌属 Serratia spp诺如病毒 Noroviruses 黄单胞菌属 Flavobacterium spp腺病毒 Adenovirus三、空气消毒效果的监测采样时间： 1、类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前样； 2、 、类环境在消毒或规定的通风换气后与从 事医疗活动前采样；监测方法： （一） 类环境可选用平皿暴露法和空气采样器法： 参 照GB50333 医院洁净手术部建筑技术规范要求进 行检测。1、空气采样器法：
14、可选择六级撞击式空气采样器或其 他经验证的空气采样器。监测时将采样器置于室内中 央0.8m1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次 采样时间不应超过30min。房间面积10m2者，每增 加10m2增设一个采样点。空气采样器法计算：报告方式：0计算的数值1 cfu/m3时，报告为：空气细菌菌落数 1 cfu/m31 计算的数值150 cfu/m3时，报告为：空气细菌菌落数： 实际计算值 cfu/m3计算的数值 150 cfu/m3时，报告为: 空气细菌菌落数150 cfu/m3类环境空气细菌 150cfu/m3为消毒合格 空气采样样器法 空气菌落数 （cfu/m3）=采样器各平皿菌落数之和 1
15、000采样速率（L/min）采样时间 （min）2、平皿暴露法-洁净手术室空气细菌采样方法 采样时间：级洁净手术室和洁净辅助用房检测前，系统应 已运行15min，其他洁净房间应已运行40min，在确认风速、 换气次数和静压差在正常范围后，再检测空气中的细菌菌落 数。 采样方法：当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别 检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点检测。测点可 均匀布置，但应避开送风口下方，同时设培养基对照和操作 过程对照。整个操作应符合无菌操作的要求。 （1）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露 30min, 361恒温箱培养48h, 培养皿中的菌落数(CFU)代 表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。 （2）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上； （3）在手术区检测时无手术台；当手术台已固定时，检测高度 应在台面之上0.25cm。平皿暴露法-洁净手术室或层流病房空气细菌的报告方式 结果计算：空气中菌落数=房间所有平皿上细菌总数平皿数= 平均每个平皿的菌落数 cfu/直径9cm平皿30min0计算的数值1 时，报告为：空气细菌菌落数 1 cfu/直径9cm平皿30min 1 计算的数值4时，报告为：空气细菌菌落数： 实际计算值 cfu/直径9cm平皿30m
