《导数分光光度法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《导数分光光度法（19页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、导数分光光度法导数分光光度法卢泽辉卢泽辉(04081051)涂海涛涂海涛(04081056)把吸收光谱写成波长的函数，那么它的导函数图像就是导数光谱导数吸光光度法测定应用步骤导数吸光光度法测定应用步骤吸收曲线的绘制吸收曲线的绘制测定波长的确定测定波长的确定回收率实验回收率实验样品测定样品测定标准曲准曲线的的测定定实验数据来自于吴京平吴京平导数分光光导数分光光度测定中的计算机图度测定中的计算机图形分析形分析如何从光谱中读取定量数据？导数吸光光度法如何消除背景干扰？如何绘制导数吸光光谱在300190nm波长范围内，以2nm波长间隔，水为溶剂，测定盐酸黄碱和干扰组分尼泊金乙酯的吸收值(A)，并绘出吸
2、收光谱一阶导数光谱和二阶导数光谱选取待测组分导数曲线上振幅较选取待测组分导数曲线上振幅较大的峰和谷的中间波长，且干扰大的峰和谷的中间波长，且干扰组分在此两中间波长处的导数值组分在此两中间波长处的导数值相等或接近相等，做出准确的选相等或接近相等，做出准确的选择。择。在吸收曲线和一阶导数曲线中均无上述原则的波峰和波谷，只有在二阶导数曲线图中盐酸麻黄碱有一较大波谷（208nm）和波峰（220nm），而尼泊金乙酯在200300nm波长范围内的二阶导数值基本与基线重合，说明干扰可被消除，故可采用2峰谷法通过测定A值，作为盐酸麻黄碱的定量信息。准确配制盐酸麻黄碱准确配制盐酸麻黄碱2.4810-2，4.96
3、10-2，9.9210-2,12.4010-2，14.8810-2，17.3610-2mmolL-1系列标准溶液系列标准溶液7份，以蒸馏水为参比，测份，以蒸馏水为参比，测定定207，208，209，219，220，221nm处的吸收值，并计算处的吸收值，并计算A值，作，作线形形拟合，合，给出回出回归方程并方程并绘制制标准曲准曲线图结果果说明在明在2.4810-217.3610-2mmolL-1范范围内内浓度度C与与A值呈良好的呈良好的线形关系形关系不同浓度干扰组分影响的实验不同浓度干扰组分影响的实验准确配制盐酸麻黄碱浓度均为准确配制盐酸麻黄碱浓度均为0.124mmolL-1,二尼泊金乙酯分别为
4、二尼泊金乙酯分别为不同浓度的系列混和溶液共不同浓度的系列混和溶液共8份，按上法测定盐酸麻黄碱的份，按上法测定盐酸麻黄碱的值，结果果如下如下实验结果表明，在测定盐酸麻黄碱时，不同浓度的尼泊金乙酯对其几乎无干扰实验结果表明，在测定盐酸麻黄碱时，不同浓度的尼泊金乙酯对其几乎无干扰回收率测定按比例配制盐酸麻黄碱与尼泊金乙酯混和溶液6份，做回收率实验，测定结果如下样品含量测定精密吸取盐酸麻黄碱滴鼻净精密吸取盐酸麻黄碱滴鼻净5ml于于100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后再精取摇匀后再精取5ml置于另一个置于另一个100ml容量瓶中，用蒸馏水定容作为待容量瓶中，用蒸馏水定容作
5、为待测样品溶液。以蒸馏水作为参比，测定测样品溶液。以蒸馏水作为参比，测定A值，用，用标准曲准曲线求得求得盐酸麻黄酸麻黄碱得含量，并和碱得含量，并和规范法比范法比较，结果如果如图导数分光光度法是如何消除背景干扰的？从上式可以看出各阶导数始终和试液浓度从上式可以看出各阶导数始终和试液浓度C呈直线关系，这是导数分光光度定量分呈直线关系，这是导数分光光度定量分析的析的基础基础无论干扰组分吸收曲线形状如何，都可以用一个近似的无论干扰组分吸收曲线形状如何，都可以用一个近似的幂级数幂级数来表示来表示根据吸光度加合性原理，两组分共存时，有下式根据吸光度加合性原理，两组分共存时，有下式其一阶导数为其一阶导数为其
6、二阶导数为其二阶导数为当干扰组分为一次吸收曲线时，当干扰组分为一次吸收曲线时， 说明一阶导说明一阶导数可以消除数可以消除线形干扰吸线形干扰吸收收 当干扰组分为一次吸收曲线时，当干扰组分为一次吸收曲线时， 说明二阶导数可说明二阶导数可消除二次干扰吸消除二次干扰吸收收 如何绘制导数吸光度光谱？（1）人工作图法：从吸收光谱的数据中每隔一个波长小间隔（12nm），逐点计算出A/的值：利用这些数值对波长描绘成图像，就得一阶导数光谱。用类似方法又可从导数光谱中获得高一阶的导数光谱。（2）仪器扫描法：用双波长分光光度计以固定（12nm）的两束单色光同时扫描记录样品对两束光吸光度的差值A，便得到样品的一阶导数
7、光谱。装有微处理机的分光光度计，利用它的记忆和处理数据的功能，可直接存储吸收光谱的数据并加以处理，可描述一阶、二阶等各阶的导数光谱。如何从导数光谱上读取定量数据？峰峰法与基线法X阶导数分光光度法阶导数分光光度法多波长线性回归导数分光光度法多波长线性回归导数分光光度法比值比值导数法（比光谱导数分光光度法导数法（比光谱导数分光光度法）导数光谱峰面积积分法导数光谱峰面积积分法一阶导数分光光度法测定水中微量铝一阶导数分光光度法测定水中微量铝Al3+和和Fe3+在在pH3.62的条件下均与的条件下均与铝试剂生成红色配合物，但两者的吸收光铝试剂生成红色配合物，但两者的吸收光谱严重重叠谱严重重叠在在562n
8、m处，处，Fe3+配合物的导数值配合物的导数值为零，而为零，而Al3+配合物的导数值近似为配合物的导数值近似为最大值。测定此处吸光值，可以有效最大值。测定此处吸光值，可以有效的消除的消除Fe3+的干扰，并且测的干扰，并且测Al3+的灵的灵敏度又较高。同时，水样中悬浮物的敏度又较高。同时，水样中悬浮物的影响也可以通过导数法消除影响也可以通过导数法消除二阶导数光谱峰面积积分法测二阶导数光谱峰面积积分法测定芦荟中痕量定芦荟中痕量Fe()和和Co()使用二阶导数峰零法的处理，使用二阶导数峰零法的处理，虽然解决了重叠问题，但由于虽然解决了重叠问题，但由于max常常发生漂移、准确性差，生漂移、准确性差，并
9、且并且Co(）的灵敏度也无法提）的灵敏度也无法提高高选定以试剂空白做参比，在选定以试剂空白做参比，在400540nm波长范围内扫描，并做二阶波长范围内扫描，并做二阶导数光谱。从图上可以看出导数光谱。从图上可以看出Co()在在410426nm，Fe()在在498521nm波长范围内络合物的二阶波长范围内络合物的二阶导数吸收光谱区分度好，选此范围进导数吸收光谱区分度好，选此范围进行峰面积的测定，并以此作为定量分行峰面积的测定，并以此作为定量分析的依据析的依据多波长线性回归导数分光光度法测定对苯二酚、多波长线性回归导数分光光度法测定对苯二酚、领苯二酚和苯酚领苯二酚和苯酚在某波长下，三者的吸光度互相叠加：在某波长下，三者的吸光度互相叠加：求一阶导求一阶导变形为变形为再变形再变形在多个波长下进行测在多个波长下进行测定，求得一系列的定，求得一系列的y、x,用线性回归法进行用线性回归法进行处理，求得直线斜率处理，求得直线斜率为为ca 截距为截距为cb稍显复杂，请多原谅稍显复杂，请多原谅PS：公式编辑真的很痛苦公式编辑真的很痛苦
