红细胞计数-手工法

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1、二 红细胞计数一、原理 用等渗稀释液将血液按一定倍数稀释,充人计数池后显微镜下计数一定体积内红细胞数,换算求出每升血液中红细胞的数量。二、试剂与耗材 1.红细胞稀释液 枸橼酸钠 1.0 g; 36%甲醛液 1.0 ml 氯化钠 0.6 g 加蒸馏水至100 ml ,混匀、过滤两次后备用。 2. 其他 显微镜、改良Neubauer血细胞计数板等。三、操作 1.取中号试管1支,加红细胞稀释液2.0ml。 2. 用清洁干燥微量吸管取末梢血10l ,擦去管外余血后加至红细胞稀释液底部,再轻吸上层清洗吸管2-3次立即混匀。 3. 混匀后,用干净微量吸管将红细胞悬液充人计数池,不得有空泡或外溢,充池后静置

2、2-3 min后计数。 4. 高倍镜下依次计数中央大方格内四角和正中共5 个中方格内的红细胞。对压线细胞按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。四、计算红细胞数/L=5个中方格内红细胞数510200106 =5个中方格内红细胞数1010 =5个中方格内红细胞数1001012式中:5 5个中方格换算成1个大方格;10 1个大方格容积为0.1l,换算成1.0l;200 血液的实际稀释倍数应为201倍,按200是便于计算;106 由1l换算成1L。五、参考区间 男: (4.095.74)1012/L 女: (3.685.13)1012/L 新生儿: (5.26.4)1012/L 婴儿: (4.04.3)1012/L 儿童: (4.04.5)1012/L六、附注 1采血时不能挤压过甚,因此针刺深度必须适当。 2稀释液要过滤,试管、计数板均须清洁,以免杂质、微粒等被 误认为红细胞。 3. 参考范围数值内,两次红细胞计数相差不得超过5% 。 4. 不允许以血红蛋白浓度来折算红细胞数。七、临床意义红细胞增加或减少的临床意义与血红蛋白测定相似。一般情况下,红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系。但在病理情况下,此比例关系会打破,因此,同时测定二者,对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。

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