药理学实验的基本知识

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1、药理学实验概述药理学实验概述 一、药理学实验课的目的一、药理学实验课的目的n n在实验过程中使学生初步掌握药理学实验在实验过程中使学生初步掌握药理学实验 的基本操作技术的基本操作技术n n验证和巩固药理学的基本理论。验证和巩固药理学的基本理论。n n通过实验培养学生具有科学的思维方法和通过实验培养学生具有科学的思维方法和 科学的工作态度。科学的工作态度。药理学实验的特点药理学实验的特点 n n药理学实验一般以药理学实验一般以活体活体为对象,包括其正为对象,包括其正 常功能、整体的动物和离体的器官或组织常功能、整体的动物和离体的器官或组织 均在均在具有活性具有活性的前提下用于实验。的前提下用于实

2、验。n n小心、规范地操作注意保护动物或标本于小心、规范地操作注意保护动物或标本于 最佳活性最佳活性状态。状态。 三、药理学实验课的要求三、药理学实验课的要求n n实验前实验前n n仔细阅读本课仔细阅读本课程和有关课程的讲义,了解程和有关课程的讲义,了解 实验的实验的目的、要求、步骤和操作程序目的、要求、步骤和操作程序。n n结合实验内容复习有关理论。结合实验内容复习有关理论。 n n(二)实验时(二)实验时n n保持实验室的整齐、清洁,保持实验室安静,不保持实验室的整齐、清洁,保持实验室安静,不 要高声谈笑,不得进行与实验无关的活动。要高声谈笑,不得进行与实验无关的活动。 n n爱护公共财物

3、爱护公共财物, ,各组仪器和器材由各组使用各组仪器和器材由各组使用 n n按照实验步骤,认真操作,注意保护实验动物和按照实验步骤,认真操作,注意保护实验动物和 标本,节省实验器材和药品。标本,节省实验器材和药品。 n n仔细、耐心地观察实验过程中出现的现象,真实仔细、耐心地观察实验过程中出现的现象,真实 客观地记录实验结果客观地记录实验结果,并加上必要的文字注释,并加上必要的文字注释, 有时还需要绘制图形或曲线进行分析。有时还需要绘制图形或曲线进行分析。 n n(三)实验后(三)实验后 n n将实验用具整理就绪,所用器械冲洗干净将实验用具整理就绪,所用器械冲洗干净 后,交还借用的器械。如果器械

4、有损坏或后,交还借用的器械。如果器械有损坏或 短少,应立即报告负责教师。短少,应立即报告负责教师。n n动物尸体、标本、纸片和废品应放到指定动物尸体、标本、纸片和废品应放到指定 地点。地点。n n搞好实验室的清洁卫生工作,离开实验室搞好实验室的清洁卫生工作,离开实验室 前应关灯,关窗,关水龙头。前应关灯,关窗,关水龙头。n n认真整理实验结果并撰写实验报告。认真整理实验结果并撰写实验报告。 实验报告的书写实验报告的书写n n每次实验,均要求写出实验报告。实验报每次实验,均要求写出实验报告。实验报 告应注意文字简练,通顺,书写清楚,整告应注意文字简练,通顺,书写清楚,整 洁,正确使用标点符号。洁

5、,正确使用标点符号。 n n常用手术器械常用手术器械n n常用试验仪器常用试验仪器动物实验的基本操作技术动物实验的基本操作技术 n n实验动物实验动物是指人工饲养,对其携带的微生是指人工饲养,对其携带的微生 物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚 的动物。的动物。n n这些个体具有较好的这些个体具有较好的遗传均一性遗传均一性、对外来、对外来 刺激的刺激的敏感性敏感性和较好的和较好的重复性重复性。 n n1 1青蛙与蟾蜍青蛙与蟾蜍n n2 2小白鼠小白鼠n n3 3大白鼠大白鼠n n4 4豚鼠:豚鼠:性情温顺,胆小怕惊吓,对组胺敏感。性情温顺,胆小怕惊吓,对组胺

6、敏感。 常用于免疫学研究和过敏性疾病模型常用于免疫学研究和过敏性疾病模型n n5 5家兔:家兔:耳大,血管清晰,便于静脉注射和取血耳大,血管清晰,便于静脉注射和取血 。眼大易观察,。眼大易观察,常用于眼科研究常用于眼科研究。因其体温变化。因其体温变化 较敏感,也较敏感,也常用于体温实验及热原检查。常用于体温实验及热原检查。n n6 6猫:猫:猫的血压比较稳定,较大鼠、家兔等小动猫的血压比较稳定,较大鼠、家兔等小动 物更接近于人体,物更接近于人体,且与人相似,故可用于循环药且与人相似,故可用于循环药 理研究。理研究。 n n7 7狗:狗:是医学实验中最常用的大动物是医学实验中最常用的大动物。血液

7、、循。血液、循 环、消化和神经系统均很发达、与人类较接近。环、消化和神经系统均很发达、与人类较接近。 适用于药理学、毒理学和药物代谢、营养学和药适用于药理学、毒理学和药物代谢、营养学和药 理学研究。理学研究。 n n8 8、小型猪:毛发、皮肤厚薄,形态学和增殖动力、小型猪:毛发、皮肤厚薄,形态学和增殖动力 学与人非常相似。学与人非常相似。理想的烧伤模型理想的烧伤模型n n9 9、猴:最相似的生物学和行为学特征、猴:最相似的生物学和行为学特征实验动物的编号、捉拿与固定实验动物的编号、捉拿与固定n n1 1染料标记法染料标记法n n常用染料:常用染料:n n红色染料:红色染料:5 5中性红或品红液

8、;中性红或品红液;n n黄色染料:黄色染料:3%3%5 5苦味酸溶液;苦味酸溶液;n n咖啡色染料:咖啡色染料:2 2硝酸银溶液;硝酸银溶液;n n黑色染料:煤焦油的酒精溶液。黑色染料:煤焦油的酒精溶液。n n(2 2)标记规则:根据实验动物被毛颜色的不同选择不同)标记规则:根据实验动物被毛颜色的不同选择不同 化学药品涂染动物。化学药品涂染动物。n nA A、兔、猫、狗等动物的标记方法:用毛笔蘸取不同颜色、兔、猫、狗等动物的标记方法:用毛笔蘸取不同颜色 的染料溶液直接在动物背部涂写号码。若用硝酸银溶液涂的染料溶液直接在动物背部涂写号码。若用硝酸银溶液涂 写,则需在日光下暴露写,则需在日光下暴露

9、1 1分钟。分钟。n nB B、大鼠、小鼠的标记:、大鼠、小鼠的标记:通常在动物不同部位涂上有色斑通常在动物不同部位涂上有色斑 点来表示不同的号码。点来表示不同的号码。常规的涂染顺序是从左到右、从上常规的涂染顺序是从左到右、从上 到下。左前肢为到下。左前肢为1 1号、左侧腹部号、左侧腹部2 2号、左后肢号、左后肢3 3号、头部号、头部4 4号号 、背部、背部5 5号、尾根部号、尾根部6 6号、右前肢为号、右前肢为7 7、右侧腹部、右侧腹部8 8号、右后号、右后 肢肢9 9号、不作染色标记为号、不作染色标记为1010号。号。n n在每组实验动物不超过在每组实验动物不超过1010只的情况下适用。只

10、的情况下适用。n n双色涂染法是采用两种颜色同时进行染色标记的双色涂染法是采用两种颜色同时进行染色标记的 方法。方法。双色法色法可标记双色法色法可标记100100位以内的号码。位以内的号码。 n n例如用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,用例如用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,用 品红(红色)染色标记作为十位数。个位数的染品红(红色)染色标记作为十位数。个位数的染 色标记方法同单色涂染法;十位数的染色标记方色标记方法同单色涂染法;十位数的染色标记方 法参照单色涂染法,法参照单色涂染法,n n即即左前肢为左前肢为1010号、左侧腹部号、左侧腹部2020号、左后肢号、左后肢3030号、号、 头部

11、头部4 04 0号、背部号、背部5050号、尾根部号、尾根部6060号、右前肢号、右前肢7070号号 、右侧腹部、右侧腹部8080号、右后肢号、右后肢9090号,第号,第100100号不作染色号不作染色 标记。标记。n n比如标记第比如标记第1212号实验动物,在其左前肢涂染品红号实验动物,在其左前肢涂染品红 (红色),在其左侧腹部涂上苦味酸(黄色)即(红色),在其左侧腹部涂上苦味酸(黄色)即 可。可。n n2 2穿耳打孔法:穿耳打孔法:用专门的打孔器在动物耳用专门的打孔器在动物耳 朵的不同部位打孔或缺口来表示一定号码朵的不同部位打孔或缺口来表示一定号码 。此法是小鼠常用的标记方法之一。此法是

12、小鼠常用的标记方法之一。 n n3 3挂牌编号法:挂牌编号法:常用于狗、猴、猫等大动常用于狗、猴、猫等大动 物的编号。实验前将之固定于动物的颈圈物的编号。实验前将之固定于动物的颈圈 或耳上或耳上 n n4 4人工针刺号码法:人工针刺号码法:先将动物被毛去除,先将动物被毛去除, 用针在动物皮肤上刺出号码,再用酒精墨用针在动物皮肤上刺出号码,再用酒精墨 汁涂染即可汁涂染即可动物的抓动物的抓取取n n小鼠抓取固定方法小鼠抓取固定方法 小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠右手抓取鼠 尾提起尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行,置于鼠笼或实验台向后拉,在

13、其向前爬行 时,用时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤 ,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按 住鼠尾,小指按住后腿即可住鼠尾,小指按住后腿即可。有经验者直接用左手。有经验者直接用左手 小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳 后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行 实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他 实验操作。实验操作。大鼠的抓取固定方法 大鼠的抓

14、取斯基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖 性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指, 抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。动物的抓动物的抓取取实验动物的给药方法实验动物的给药方法 n n经消化道给药经消化道给药 1 1小鼠灌胃法灌胃法小鼠灌胃法灌胃法 12161216号注射针头,尖端部磨钝,针头长号注射针头,尖端部磨钝,针头长 45cm45cm进针进针23cm23cm后。后。 灌药量一般为灌药量一般为0.10.3ml/10g0.10.3ml/10g体重体重 n n大鼠灌胃法大鼠灌胃法 n n长约长约6 68cm8cm,直径约为,直径约为1.2mm 1.2mm ,n n一次灌胃量一般在一次灌胃量一般

15、在1ml/100g1ml/100g体重。体重。 n n豚鼠灌胃法豚鼠灌胃法 豚鼠体重豚鼠体重200g200g以上时,应以上时,应 用木制开口器和导尿管灌胃。用木制开口器和导尿管灌胃。 n n插管完毕后,先回抽注射器针栓,无空气插管完毕后,先回抽注射器针栓,无空气 抽出时,再慢慢推注药液。如回抽出空气抽出时,再慢慢推注药液。如回抽出空气 ,说明可能插入气管,应拔出重插。,说明可能插入气管,应拔出重插。n n药物注完后应再注入生理盐水药物注完后应再注入生理盐水2ml2ml,将管内,将管内 残存药物冲入残存药物冲入 n n兔灌胃法:兔灌胃法: 用兔固定箱,可一人操作。右手将开用兔固定箱,可一人操作。

16、右手将开 口器固定于兔口中,舌压在开口器下面,口器固定于兔口中,舌压在开口器下面, n n慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道约慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道约151518cm18cm。插管插管 完毕将胃管的外口端放入水杯中,切忌伸入水过完毕将胃管的外口端放入水杯中,切忌伸入水过 深。如有气泡从胃管逸出,说明不在食道内而是深。如有气泡从胃管逸出,说明不在食道内而是 在气管内,应拔出来重插。在气管内,应拔出来重插。如无气泡逸出,则可如无气泡逸出,则可 将药推入将药推入n n并以少量清水冲洗导尿管保证管内药液全部进入并以少量清水冲洗导尿管保证管内药液全部进入 胃内。胃内。 二、二、注射给药法注射给药法n n小鼠皮下注射小鼠皮下注射 n n通常在通常在背部背部皮下注射。注射时以左手拇指皮下注射。注射时以左手拇指 和中指将小鼠颈背部皮肤轻轻提起,食指和中指将小鼠颈背部皮肤轻轻提起,食指 轻按其皮肤,使其形成一个三角形

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