神经生长因子对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合调控作用的实验研究

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1、戚.才学颐士学企老丈神经生长因子对大鼠 深1 1 0烫伤创面愈合调控作用的实验研究中 文 摘 要背景和目 的国内外研究表明神经生长因子 N G F ) 对创面炎症反应及组织重建有着明确的作用,主要可能通过以下几个环节起作用:起类似炎症趋化因子的作用,聚集炎 症细胞( 中性粒细胞, 巨 噬细胞, 肥大细胞, 淋巴 细胞) ,加速创面愈合过程。 促进肥大细胞脱颗粒。肥大细胞分泌多种化学因子、多肤生长因子,这些因子对创面血管新生、胶原产生及再上皮化起着非常重要的调节作用。加速皮肤微血管内皮细胞生长,促进创面血管再生。口 促进成纤维细胞的迁移、 增生、 胶原代谢以及向肌成纤维细胞转化、 胶原收缩等的影

2、响。本实验旨在探讨N G F 对大鼠深I I “烧伤创面愈合的影响及其调控机制, 为临床应用提供实验依据,同时寻求最佳给药方式。方 法 2 5 0 - 3 0 0 g S D大鼠3 2 只, 在 氯胺酮腹腔注 射1 0 0 m g / k g 麻醉后, 用1 0 %硫化钠脱毛,用 1 0 0 电烙铁接触烫其背部,时间为 1 1 S ,制成直径为1 .5 c m的圆形深I I 。烧伤创面( 病理切片证实) , 每只大鼠 共制6 个创面, 将烫伤后大鼠 随机分4 组,即等渗盐水外敷A组为对照组, N G F 创面局部外敷B组、 创底注射C组和肌注全身用药D组为实验组, 每组8 只, 共用药7 天。

3、 烧伤后第3 . 5 . 7 .9 天在氯胺酮麻醉下切取创面组织,制成H E染色常规切片及V E G F , V E G F r ,S M A免疫组化切片, 进行光镜组织学观察、 照相, 计算机图像分析、 定量测定:观察创面愈合所需时间:进行数据统计分析。结果 实验组创面平均愈合时间较对照组愈合时间缩短0 .5 - 2 天,实验组中B组创而愈合时间天数明显低 几 对 照组A y l t . 统计 学念义 显著, p ; : .才笋颐毖学世动 戈.材 料 与 方 法一、主要实验仪器和试剂:人神经生长因子注射剂 ( H u m a n n e r v e g r o w t h f a c t o

4、 r H n N G F ) ,由 南京军区军事医学研究所提供;V E G F 试剂盒 ( 美国S a n t a C r u s公司, 北京中山生物技术有限公司代理) ;V E G F r 试剂盒 ( 美国N e o m a r k e r s 公司) ;S M A试剂盒 ( 福州迈新生物技术有限公司) ;电烙铁,铜头1 .5 c m( 自 制) ;电子秒表 ( 深圳市惠波工贸有限公司) ;恒温水槽。二、动物模型2 5 0 - 3 0 0 g 大鼠3 2 只, 在氯胺酮腹腔注射l o o m 叭g 麻醉后, 用1 0 % 硫化钠脱毛,用 1 0 0 电烙铁接触烫其背部,时间为l l s ,制

5、成直径为1 . 5 c m的圆形深1 1 0 烧伤创面( 病理切片证实) , 每只大鼠 在其背部共制 直径为1 .5 c m六个等大创面,左右各三个,排成两排。然后将烫伤大鼠随机分4 组,每组8 只。三、给药方法烫伤创面清创后,四组各予以下处理A组:对照组 ( 等渗盐水) :予以3 层浸润有5 m l 等渗盐水纱布覆盖,外敷一层凡士林纱布保湿,2 / 日。B组:1 2 . 5 u / m l N G F外敷 :予以3 层浸润有 5 m l 1 2 . S u / m l N G F溶液纱布覆盖,外敷一层凡士林纱布保湿,2 / 日。C组:2 0 u / ml N G F创底注射,每个创底0 .

6、5 m,同时予以3 层浸润有 5 m l等渗t lh 水纱布覆盖,外敷一层凡士林纱布保湿。2 / 日。D组:5 0 u / mI N G F肌注,I m l ,同时予以3 层浸润有5 m l 等渗欲水纱布覆盖,外敷一层凡士林纱布保湿。2 l 日。每组用药时间共七天。熏京才笋硬士笋世老戈四、检测指标1 ) 创面愈合天数: 创面愈合标准为肉眼观察创面上皮化9 5 - 1 0 0 % 或残余创面小于 5 %。2 ) 分别于 烧伤后3 , 5 , 7 , 9 天在氯胺酮麻醉下切取创面皮肤,以1 0 % 甲 醛固定,逐级酒精脱水,石蜡包埋,切片,H E染色,进行光镜组织学观察照相;观察创面组织上皮化程度

7、及炎症细胞浸润、成纤维细胞聚集及胶原沉积等情况。3 ) 免疫组化 检测: 观察V E G F , V E G F r 的阳 性细胞, 并 对V E G F , V E G F r ,S MA定量测定,测定微血管密度,评价创面血管新生情况。五、统计学方法数据以X士s 表示,实验组与对照组进行t 检验。结果、创面愈合时间:实验组创面平均愈合时间较对照组愈合时间缩短0 . 5 - 2 天,实验组中B 组创面愈合时间天数明显少于对照组A 组, 有统计学意义, P 0 . 0 0 5 4表 1创面愈合时间T a b 1 W o u n d h e a l i n g t i m e组别A 组B组C组D组

8、愈合时间 ( 天)1 4 . 6 7 土1 . 5 71 2 . 8 土1 . 2 01 4 . 3 士1 . 5 11 3 . 6 3 士1 . 6 3_蘑京大学硕士* , 2 9 ( 5 ) : 4 3 9 - 4 4 7 .3 A r t u c M, H e r me s B , S t e c k e l i n g U M, e t a l . Ma s t c e l l s a n d t h e i r me d i a t o r s w o u n dh e a l i n g -a c t i v e p a rt i c i p a n t s o r i n n o

9、 c e n t b y s t a n d e r s ? E x p D e r m a t o l 1 9 9 9F e b ; 8 ( 1 ) : 1 - 1 6 .4 L a w m a n MJ , B o y l e MD , G e e A P , e t a l . N e r v e g r o w t h f a c t o r a c c e l e r a t e t h e e a r l ye v e n t s a s s o c i a t e d w i t h w o u n d h e a l i n g . E x p Mo l P a t h o l

10、 1 9 8 5 O c t ; 4 3 ( 2 ) : 2 7 4 - 2 8 15 F o s t e r P A , Wi c k s S , F o s t e r M, B o s t e r M, e t a l . C e l l u l a r p a t h o l o g y c h a n g e s r a t s k i nf o l l o w i n g i n t r a d e r m a l i n j e c t i o n o f n e r v e g r o w t h f a c t o r : n e u tr o p h i l - d e p

11、 e n d e n t a n d- i n d e p e n d e n t e v e n t s . J P a t h o l 2 0 0 2 J u n ; 1 9 7 ( 2 ) : 2 4 5 - 2 5 5 06 杨东运,李世荣, 等. 神经生长因子对大鼠瘫痕组织中炎性细胞及胶原沉积的影响 J .第三军医大学学报, 2 0 0 0 , 2 2 ( 1 1 ) : 1 0 9 0 - 1 0 9 37 Ma t s u d a H, K o y a m a H, S a t o H, e t a l . R o l e o f n e r v e g r o w t h f

12、a t o r i n c u t a n e o u sw o u n d h e a l i n g : a c c e l e r a t i n g e f f e c t s i n n o r m a l a n d h e a l i n g i m p a i r e d d i a b e t i c m i c e . JE x p Me d 1 9 9 8 F e b 2 ; 1 8 7 ( 3 ) 2 9 7 - 3 0 68 Mi c e r a A , V i g n e t i E , P i c k h o t t z D , e t , a l . N e r

13、 v e g r o w t h f a c t o r d i s p l a y s s t i m u l a t o ry磨京大华硕士笋世触戈e f f e c t o ns k i n a n d l u n g fi b r o b l a s t , d e m o n s t r a t i n g a d i r e c t r o l e f o r t h i s f a c t o r i nt i s s u e r e p a i r . P r o N a t l A c a d S c i U S A 2 0 0 1 M a y 2 2 ; 9 8 ( 1 1

14、) :6 1 6 2 - 6 1 6 7 .9 付小兵,王德文. 创面修复基础. 北京:人民军医出版社,1 9 9 71 0 Ma ry H M. P e p t i d e g ro w t h f a c t o r a n d w o u n d h e a l i n g . C l i P l as S u r g , 1 9 9 0 ,1 7 : 4 2 1 - 4 2 51 1陈璧2 0 0 0 F e b ,贾赤宇等 半个世纪以 来我国烧伤创面修复的进展 J . 中华烧伤杂志,1 6( 1 ) :8 - 1 0煎京大笋硕士笋夕级丈网状铜丝留置治疗海绵状血管瘤3 5 例的临床报道

15、李 玲巧姜会 庆 胡心宝t汪军汪涌 魏娴2目 的:探讨网 状铜丝留置治疗海绵状血管瘤的方法、原理、并发症及注意事项,评价其是否为安全、有效的治疗手段。方法:本院 1 9 9 8 年3月一2 0 0 2 年 7 月采用网状铜丝留 置及手术结扎和局部海绵状血管瘤窦内注射地塞米松综合治疗海绵状血管瘤共3 5 例。结果:治疗后瘤体均明显变小、变硬,部分患者经术前术后C T检查或血管造影对比, 示血管瘤范围显著缩小, 瘤腔纤维化。 一般多于术后1 -6 个月完全消失,随访亦无再生长趋势。患者反应小、 痛苦少,无局部软组织破坏。结论:我们认为网状铜丝留置术结合局部激素注射治疗海绵状血管瘤较为有效,值得推广

16、。关键词 海绵状血管瘤 综合治疗 网状铜丝R e t a i n i n g C o p p e r N e t w o r k f o r T r e a t me n t o f C a v e r n o u s H e m a n g i o m a i n 3 5 C a s e sL i L i n g g i a o ; J i a n g H u i q i n g ; H u X i n b a o ; Wa n g i u n : Wa n g y o n g : We i Ma nD e p a rt m e n t o f B u r n s a n d P l a s t i c S u r g e ry , G e n e r a l H o s p i t a l o f N a n j i n g Mi l i t a ryC o m ma n d N a n j i n g , J i a n g s u 2 1 0 0 0 2 P . R . C h i n aA b s t

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