北京颐康堂医药研究院技术标准----质量管理编 码TS-ZL-002-00文件名称灵芝孢子 粉质量标准 页 数3-1实施日期制 订 人审 核 人批准人制订日期审核日期批准日期制订部门生产技术 部分发部门质管部 、生产 技术 部目目 的：的：制订灵芝孢子粉质量标准适用范围：适用范围：灵芝孢子粉质量标准责责 任：任：检验人员执行该标准，质管部监督该标准的执行内内 容：容：【【性状性状】】 本品本品为多孔菌科真菌赤芝 Ganoderma lucidum（Leyss.ex Fr）Karst.或紫芝 Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang 的孢子破壁粉碎后的细粉为棕褐色的粉末，气微香，味微苦鉴别鉴别】】 （1）取本品，置显微镜下观察：未破壁的孢子呈褐色，卵形，顶端平截，外壁无色，内壁有疣状突起破壁后的孢子可见残破的孢子壁2）取本品 1g，加乙酸乙酯 30ml，超声处理 30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯 2ml 使溶解，作为供试品溶液；另取灵芝孢子粉对照药材 1g，同法制成对照药材溶液照薄层色谱法(中国药典 2010 版一部附录Ⅵ B)试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各 4μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以环己烷-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；喷以 10%硫酸乙醇溶液，于 105℃加热至斑点显色清晰，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点检查检查】 水份水份 不得过 12.0%（中国药典 2010 版一部附录Ⅸ H 第二法） 总灰分总灰分 不得过 3.0%（中国药典 2010 版一部附录Ⅸ K） 破壁率破壁率 取本品，置显微镜下观察：未破壁的孢子呈褐色，卵形，顶端平截，外壁无色，内壁有疣状突起；破壁后的孢子可见残破的孢子壁； 在视野内计数北京颐康堂医药研究院技术标准----质量管理编 码TS-ZL-002-00文件名称灵芝孢子粉质量标准 页 数3-2 破壁与完整孢子的总数不少于 100 个，统计破壁孢子的比例破壁率应不低于 80%含油率含油率 取本品 1g，精密称定，置索氏提取器中，加入乙醚 25ml，提取2h，提取液置已于 60℃恒重的蒸发皿中，挥干乙醚，于 60℃干燥 3h，取出，置干燥器中冷却 30min，称重，计算含油率，应不低于 20.0%浸出物浸出物】 照水溶性浸出物测定法（中国药典 2010 版一部附录 X A）项下的热浸法测定，不得少于 3.0%。
含量测定含量测定】 灵芝多糖灵芝多糖对照品溶液的制备对照品溶液的制备 精密称取 105℃干燥至恒重的 D-无水葡萄糖约10mg，置 100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含D-无水葡萄糖 0.1mg） 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 精密量取对照品溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml， 分别置 10ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀精密量取上述各溶液 2ml，置具塞试管中，分别加新鲜配制的 4%苯酚溶液 1ml，混匀，迅速加入硫酸 7.0ml，摇匀于 40℃水浴中保温 30min，取出，置冰水浴中放置 5min，取出，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典 2010 年版一部附录 V B） ，在487 nm 的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品 0.6g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加水50ml，称定重量，加热回流 3h，放冷，再称定重量，加水补足减失的重量，摇匀，离心，精密量取上清液 2ml，加无水乙醇 8ml，摇匀，4℃放置 12h，取出，离心，倾出上清液，沉淀加水溶解，转移至 10ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
测定法测定法 精密量取供试品溶液 2ml，置 10ml 置具塞试管中，照标准曲线的绘制项下的方法，自“加新鲜配制的 4%苯酚溶液 1ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量（mg） ，计算，即得本品按干燥品计算，含灵芝多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计，不得少于 1.0%北京颐康堂医药研究院技术标准----质量管理编 码TS-ZL-002-00文件名称灵芝孢子粉质量标准 页 数3-3 灵芝总三萜灵芝总三萜 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取熊果酸对照品 5mg，精密称定，置 50ml 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得标准曲线的绘制标准曲线的绘制 分别量取熊果酸对照品溶液 0.2、0.5、1.0、1.5 和 2.0 ml，置试管中，在 100℃水浴上蒸干，放冷，加 0.4ml 5%香草醛-冰乙酸溶液和1.0ml 高氯酸，于 60℃水浴中加热 15min 后移入冰水浴中，再加入 5.00ml 冰乙酸，摇匀，于室温放置 15min 后，照紫外-可见分光光度法(中国药典 2010 年版一部附录 V B)，以相应的试剂为空白，在 548nm 的波长处测定吸收度。
以吸收度 A 为纵坐标，浓度 C(μg)为横坐标，绘制标准曲线供试品溶液的制备及供试品溶液的制备及 TLC-TLC-光度法测定光度法测定 称取“含油率”项下的灵芝孢子油约 0.1g，精密称定，置于 1ml 量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀吸取上液 10 μl，点于硅胶 G 板(20cm×20cm×0.25cm)上，以石油醚-乙酸乙酯(95:5)展开， 晾干，将 Rf 值小于 0.6 部分的硅胶刮下(Rf 值为 0.6～1.0 的部分为甘油酯，Rf 值为 0～0.6 的部分为三萜类化合物)，用乙酸乙酯洗脱，洗脱液在100℃水浴上蒸干，放冷，加入 0.40ml 5%香草醛-冰乙酸溶液和 1.00ml 高氯酸，于 60℃水浴加热 15min 后移入冰水浴中，再加入 5.00ml 冰乙酸，摇匀，置于室温，15min 后，在 548nm 的波长处测定吸收度，计算样品中总三萜的含量本品按干燥品计算，含灵芝总三萜不得少于 0.5%功能与主治功能与主治】健脾益气，养心安神用于心脾两虚，病后体弱，肿瘤患者的辅助治疗用法与用量用法与用量】1～2g 【贮藏贮藏】置干燥处，防霉，防蛀。