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1、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂土壤取样土壤取样样品稀释样品稀释培养与观察培养与观察稀释涂布平板法稀释涂布平板法使用以尿素为唯一氮源的选择培养基使用以尿素为唯一氮源的选择培养基菌种鉴定菌种鉴定分离方法分离方法实验流程实验流程菌种筛选菌种筛选微生物分离、鉴定,活菌计微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏数,菌种保藏加凝固剂加凝固剂(如琼脂如琼脂)固体培养基固体培养基工业生产工业生产不加凝固剂不加凝固剂液体培养基液体培养基用途用途特点特点培养基种类培养基种类用伊红用伊红美美蓝培养基蓝培养基鉴别大肠鉴别大肠杆菌杆菌鉴别不同鉴别不同种类的微种类的微生物生物
2、产生特定的产生特定的颜色或其他颜色或其他变化变化培养基中培养基中加入某种加入某种指示剂或指示剂或化学药品化学药品鉴别培鉴别培养基养基加入青霉加入青霉素分离得素分离得到酵母菌到酵母菌和霉菌和霉菌从众多微从众多微生物中分生物中分离所需的离所需的微生物微生物依据某些微生依据某些微生物对某些物质物对某些物质的特殊需求或的特殊需求或抗性而设计抗性而设计培养基中培养基中加入某些加入某些化学物质化学物质选择培选择培养基养基举例举例用途用途原理原理制备方法制备方法种类种类有机物有机物蛋白质等蛋白质等糖类、蛋白质等有机物糖类、蛋白质等有机物大肠杆菌大肠杆菌NH3NH3CO2硝化细菌硝化细菌光能光能NH 、NO
3、等等CO2蓝藻蓝藻能源能源氮源氮源碳源碳源微生物微生物用酒精擦拭双手,用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源用氯气消毒水源化学药剂消化学药剂消毒法毒法不耐高温的液体不耐高温的液体巴氏消毒法巴氏消毒法日常用品日常用品煮沸消毒法煮沸消毒法仅杀死物体仅杀死物体表面或内部表面或内部的部分对人的部分对人体有害的微体有害的微生物生物较为温和较为温和的物理或的物理或化学方法化学方法消毒消毒应用范围应用范围常用方法常用方法结果结果条件条件项目项目培养基及容培养基及容器的灭菌器的灭菌高压蒸汽灭高压蒸汽灭菌法菌法玻璃器皿、玻璃器皿、金属工具金属工具干热灭菌法干热灭菌法接种工具接种工具灼烧灭菌法灼烧灭菌法杀死物体内杀死物体
4、内外所有的微外所有的微生物,包括生物,包括芽孢和孢子芽孢和孢子强烈的理强烈的理化因素化因素灭菌灭菌应用范围应用范围常用方法常用方法结果结果条件条件项目项目将菌液进行一系列的梯度稀将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落表面形成单个的菌落通过接种环在琼脂固体培通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,养基表
5、面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划散到培养基上。在数次划线后培养,可以分离到由线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌可见的子细胞群体,即菌落落原理原理稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法平板划线法项目项目适用于厌氧菌和兼性厌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌氧菌适用于好氧菌适用于好氧菌适用适用范围范围吸收量较少,较麻烦,吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,平板不干燥效果不好,容易蔓延容易蔓延不能计数不能计数缺点缺点可以计数,可以观察菌可以计数,可以观察菌落特征落特征可以观察菌落特征,对混可以观察菌落
6、特征,对混合菌进行分离合菌进行分离优点优点稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法平板划线法项目项目杀死接种环上杀死接种环上残存的菌种,残存的菌种,避免细菌污染避免细菌污染环境和感染操环境和感染操作者作者杀死上次划线后接种环杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每上次划线的末端,使每次划线菌种数目减少次划线菌种数目减少杀死接种环杀死接种环上原有的微上原有的微生物生物目的目的划线结束划线结束每次划线之前每次划线之前第一次操作第一次操作富含纤维素的选择培富含纤维素的选择培养基养基以尿素为唯一氮源的选以尿素为唯一氮源的选择
7、培养基择培养基选择选择培养培养基基分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物的分离的分离土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌的分离的分离项目项目CO(NH2)2H2OCO22NH3特有特有代谢代谢过程过程刚果红染色法,即刚果红与纤刚果红染色法,即刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,培养基出现以纤素被分解后,培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈维素分解菌为中心的透明圈在培养基中加入酚红指在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,示剂,若指示剂变红,pH升高,说明细菌能升高,说明细菌能分解尿素分解尿素鉴定鉴定方法方法分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌的分离的分离项目项目培养培养基乙基乙培养培养基甲基甲水水CR溶溶液液琼脂琼脂纤维纤维素粉素粉淀粉淀粉无机无机盐盐酵母酵母膏膏