《槲寄生凝集素增强γδT细胞杀伤功能及调节细胞因子分泌格局的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《槲寄生凝集素增强γδT细胞杀伤功能及调节细胞因子分泌格局的研究（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第三届争国中医药免疫学术研讨会论文汇编模型，观察南蛇藤提取物对L e w i s 大鼠关节炎的抑制作用；同时采用同位素标记等方法，观察南蛇藤提取物对抗原特异性淋巴细胞( L y m p hn o d ec e l l s ，L N C ) 增殖的影响；以E L I S A 方法检测L N C培养液中I F N Y ，I L 一1 0 的水平。结果t 南蛇藤提取物灌胃给药1 5 - 3 9 k g ，对L e w i s 大鼠关节炎的发生具有较好的抑制作用，这种抑制作用从给药后第8 天开始，持续到第2 6 天。L N C 实验表明，南蛇藤提取物对B h s p 6 5 ( M y c o b a
2、 c t e r r a lh e a ts h o c kp r o t e i n6 5 ) 持异性T 淋巴细胞增殖具有抑制作用，这种作用在大鼠关节炎的不同时期具有不同的影响。细胞因子实验结果表明，南蛇藤提取物能上调L N C培养液中I L - 1 0 水平结论l 南蛇藤提取物对M t b 诱导的L e w i s 大鼠类风湿关节炎具有抑制作用，这种抑制作用与抑制特异性淋巴细胞增殖，上调I L - I O 水平。槲寄生凝集素增强Y8 + T 细胞杀伤功能及调节细胞因子分泌格局的研究余奇文张继荚马妍慧柏峻聂红沈佰华王利沈天伟李伟毅李宁丽张冬青” ( 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所，上海
3、2 0 0 0 2 5 ) 摘要】槲寄生( M i s t l e t o e ) 是一种寄生性植物，可用于治疗淋病、高血压、风湿病等疾病。近年来研究发现，槲寄生不仪具有抗感染、诱导细胞凋亡以及细胞毒作用，还具有一系列免疫调节作用，值得关注的是：槲寄生在辅助治疗肿瘤的应用中获得了引人瞩目的结果。槲寄生发挥免疫调节作用的有效成份主要为槲寄生凝集素( M i s t l e t o eL e c t i n 札) ，儿是一种由A 链和B 链以二硫键相连的糖蛋白。A 链由2 5 2 个氨基酸组成，分子量约为3 0I ( D ，具有干扰核糖体蛋白质合成作用；B 链由2 6 3 个氨基酸组成，分子量约为
4、3 5K D ，具有和D 一半乳糖及N _ 乙酰半乳糖苷结合的特性。M L 的免疫调节作用包括提高淋巴细胞对有丝分裂原的敏感性：增强I L - 2 受体的表达；提高N I ( 细胞和L A I ( 细胞的细胞毒功能以及促进趋化因子、T N 卜等细胞因子释放作用以及具有活化T 辅助细胞功能，并可使T I L 和巨噬绌胞聚集在肿瘤细胞周围而发挥抗肿瘤作用。我们采用M A C S 阳性分选法，从正常人外周血中分离y8 + T 细胞，并采用不同浓度的儿刺激Y8 + T 细胞，于不同时间观察I i L 增强y5 T 细胞对D a u d i 细胞的细胞毒作用，并观察虬协同L P S 对y8 + T细胞分
5、泌细胞因子的调节作用，探索M L 增强Y8 + T 细胞抗肿瘤作用和免疫调节之机理。结果：用“c r 释放法检测经不同浓度M L ( 0 ，1 ，1 0 ，i 0 0 和2 0 0n g m 1 ) 不同时间( 1 2 ，2 4 ，蟠h ) 诱导后的Y8 + T 细胞的细胞毒功能。l O O n gM L 经2 4 h 和鸽h 诱导后，正常人v8 + T 细胞对胍不敏感的D a u d i 细胞细胞毒百分率分别为z 9 2 5 | 6 ，2 7 3 4 ；2 0 0 n g 札经2 4h 和4 8h 诱导后，正常人Y8 + T 细胞对D a u d i 细胞细胞毒百分率分别为2 5 2 5 ，
6、2 7 3 8 。明显高于1 2 h 诱导后的细胞毒百分率( 1 0 0 n g M L 为1 4 8 9 ，2 0 0 r i g M L 为1 8 8 8 ) 及阴性对照组9 8 9 ( P O 0 5 ) 。用E L I S A法定量检测细胞因子，正常人外周Y8 + T 细胞经L P S ( 2 5m g L ) 及不同浓度的M L ( 0 ，1 ，l O ，1 0 0基金资助：国家自然科学基金3 0 4 7 1 5 9 ：”通讯作者 d q z h a n 9 1 3 3 3 y a h o o c o r n 1 8 3第三届仝国中民药免疫学术研讨会论文汇编和2 0 0ug L )
7、诱导2 4h 后，T N F n 分泌高于单独L P S 刺激组( 表1 ) ，M L 加入量为1 0 0ug L 和2 0 0ug L 两组与单加L P S 组比较，具有明显差异( P 0 0 5 ) ；I L - I O 分泌水平则随M L 浓度的增高而下降( 表) 。札对I 卜l 和I L 一1 2 的分泌无明显影响( 数据未显示) 。在5 i L ( 1 0 0 ug L ) + L P S( 2 5 r a g L ) 诱导Y6 + T 细胞分泌T N F a 实验中，于M L + L P S 加入后不同时段( O ；2 ；4 ：8 ：1 2 ；1 6 ：2 0 ；2 4 h ) 。
8、取培养上清，检测培养中上清中T N F q 浓度，结果显示：当培养达8 h 时，T N F 一浓度达到最高，随后缓慢下降。表不同浓度的M L 对Y5 T 细胞分泌T N F - 。【和I L - I O 的影响( X S D ，n g L )T a b M Lo f d i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o ne f f e c to n 丫6 + Tc e l ls e c r e t i n gT N F aa n dI L - 1 0 ( 】( 土s D ，r i g L )g r o u pn e g a t i v eL P SL P S +
9、M L ：l n gl O n gl O O n g2 0 0 n g ( 2 5m g L )I L - 1 01 2 土2 O l4 5 7 8 j ：9 0 14 7 1 5 - 4 - 6 2 63 9 2 5 ：9 8 12 1 9 1 土3 6 562 0 3 8 - + - 4 2 36讨论；Y6 + T 细胞具有抗感染、抗肿瘤效应，可以杀灭胞内病原体感染的靶细胞和N K 敏感或不敏感的肿瘤细胞。由于Y6 + T 细胞上的抗原受体缺乏多样性且无M H C 限制性，所以y6 + T细胞较L A d ( 细胞和C T L 细胞具有更宽的抗瘤谱。Y6 + T 细胞主要存在于上皮和黏膜组
10、织，在外周血中，Y6 + T 细胞约占T 细胞总数5 。增加和增强Y6 + T 细胞舶数量和活性有利于机体抗感染和抗肿瘤功能。研究证明：札可以增强N I 【细胞和巨噬细胞的细胞毒与吞噬功能。我们采用不同浓度的札刺激经M A C S 分离的Y6 + T 细胞，体外实验显示，y6 T 细胞经浓度为1 0 0 2 0 0n g m l的肌刺激培养2 4 4 8 h 后，可明显增强对N K 不敏感的D a u d i 细胞的细胞毒效应。故此，我们认为：l I f L 对肿瘤转移的预防和治疗作用不仅与N I 【细胞和巨噬细胞的激活密不可分，还与局部y6 +T 细胞的活化相关。M L 诱导的细胞毒功能是通
11、过多种途径来完成的。经札活化的Y8 + T 细胞可释放I L - 2 ，I F N _ Y 、T N F a 等细胞因子，发挥免疫调节和介导炎症反应。业已明确，在T H 细胞中，由T H I细胞合成和释放I L - 2 ，T N F 一和I F N - Y 等细胞因子可抑制T H 2 细胞释放I L 一4 、I L - 5 、I L 1 0 等细胞因子。同样，由T H 2 细胞分泌的细胞因子可抑制T H l 细胞合成和释放细胞因子。表1 结果显示，M L 可协同L P S 诱导Y6 + T 细胞释放T N F n ，抑制Y6 + T 细胞释放I L 一1 0 ，提示M L 的免疫调节作用主要是通过提高T H I 功自 而实现的。继欧洲研究者从槲寄生中提取扎用于临床治疗肿瘤以后，韩国( K i m ) 也从槲寄生中提取了札并命名为K M L - C 其实验证实K M L - - C 可预防和抑制黑色素瘤B 1 6 - B L 6 、结肠癌2 6 - M 3 i 以及淋巴癌L 5 1 7 8 Y - M L 2 5 在同系小鼠体内转移并认为K M L - C 的抗肿瘤效应比欧洲札更强。德、英等欧洲国家已把扎作为治疗和预防膀胱癌、胃癌、大肠癌等上皮黏膜性癌及其转移的辅助性药物。我国具有丰富的槲寄生资源，从国产槲寄生中提取儿并与国外产品比较，将有助于开发中国中医药宝藏，造福于肿瘤患者。
