《啶酰菌胺和咯菌腈复配对草莓灰霉病菌的室内毒力测定及田间防效》由会员分享，可在线阅读，更多相关《啶酰菌胺和咯菌腈复配对草莓灰霉病菌的室内毒力测定及田间防效（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国蔬菜学术论文下载 www. c n v e g . o r g啶酰菌胺和咯菌腈复配对草莓灰霉病菌的 室内毒力测定及田间防效张 亚1，2 刘 青1 刘双清1 廖晓兰1，3*（1湖南农业大学植物保护学院，湖南长沙410128；2植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室，湖南长沙410128；3湖南省生物农药与农药制剂加工工程技术研究中心，湖南长沙410128）摘 要： 采用生长速率法测定了啶酰菌胺、 咯菌腈及其复配物对草莓灰霉病菌的室内毒力， 通过Wadley法进行增效作用评价，并验证了复配物对草莓灰霉病的田间防效。结果表明：啶酰菌胺和咯菌腈以质量比 11、51、31、2：1、32 复配对草莓灰
2、霉病菌表现增效作用，以质量比 13、14、15、41 复配则表现相加作用。其中 31 复配的增效作用最明显，增效系数为 4.47，田间对草莓灰霉病的最佳防效可达 74.40%。关键词：啶酰菌胺；咯菌腈；草莓灰霉病菌；增效作用；田间防效etal.，1987；Yourman&Jeffers，1999；Dianezetal.，2002） 。研究表明，草莓灰霉病菌对多菌灵、腐霉利、异菌脲、乙霉威、嘧霉胺等药剂已经产生了抗药性，因此迫切需要通过复配技术降低草莓灰霉病菌的抗药性，延缓药剂的使用寿命（周明国等，1990；韩巨才等，2004；陈莉等，2007；礼茜等，2007；陈仁等，2015） 。啶酰菌胺是
3、一种线粒体呼吸抑制剂，通过抑制线粒体电子传递链上琥珀酸辅酶 Q 还原酶活性达到控制病菌菌丝生长的作用，其作用机理与其他酰胺类和苯甲酰胺类杀菌剂类似（颜范勇等，2008；冯小龙，2016） 。咯菌腈通过抑制葡萄糖磷酰化有关的转移酶，最终导致病菌死亡，其作用机理独特，与现有杀菌剂无交互抗性（杨玉柱和焦必宁，2007） 。这两种药剂都是生产上常用于防治草莓灰霉病的化学药剂，本试验拟通过复配技术筛选出对草莓灰霉病菌具有增效作用的复合物， 并进行田间防效试验，旨在为今后防控草莓灰霉病提供用药依据。1 材料与方法 室内毒力测定和田间药效评价于 20162017年分别在湖南农业大学植物保护学院生物农药工程中
4、心和衡阳市衡东县新塘镇草莓种植示范基地进行。张亚，男，博士，副教授，主要从事生物农药研究与开发，E-mail：* 通讯作者（Correspondingauthor） ：廖晓兰，女，教授，博士生导师，主要从事生物农药研究与开发，E-mail：收稿日期：2017-07-16；接受日期：2017-12-07基金项目：公益性行业（农业）科研专项（201303025） ，湖南省大学生创新性实验计划项目（DFCXY2014152，DFCS201604）草莓灰霉病是危害草莓生产的重要病害，每年由该病造成的经济损失可达 10%30%，有的甚至高达 89%（Ugolinietal.，2014） 。该病的寄主范围
5、广泛，不仅可以侵染草莓，而且还可侵染番茄、黄瓜、辣椒、葡萄等多种植物（Williamsonetal.，2007；Zhangetal.，2014） 。生产上防控草莓灰霉病的方法主要包括农业防治（清除病残体、调控温湿度、 通风透光、 紫外照射） 、 生物防治（以菌制菌） 、化学防治（利用合成农药）等，其中化学防治具有见效快、节约成本等优势，一直是控制草莓灰霉病的重要方法（Rosslenbroich&Stuebler，2000；Huangetal.，2012；吉沐祥等，2013；Shaoetal.，2015；Aquevequeetal.，2016；Janisiewiczetal.，2016） 。目前
6、防治草莓灰霉病的化学药剂主要有多菌灵、腐霉利、异菌脲、嘧霉胺等，但长期大量使用化学药剂不仅污染土壤，破坏生态平衡，造成农药残留，而且容易使病菌产生抗药性（Hunter5353研究论文中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES2018（2） ：53-57中国蔬菜学术论文下载 www. c n v e g . o r g1.1 试验材料与药剂供试菌株为草莓灰霉病野生菌株（Botrytis cinerea） ，由湖南农业大学植物保护学院生物农药课题组从发病的草莓病果上分离获得纯种菌株（刘双清等，2016） 。供试药剂为 98.51% 啶酰菌胺原药，购自上海秦巴化工股份有限责任公司；98% 咯菌
7、腈原药，购自北京伊诺凯科技有限公司；50% 啶酰菌胺可湿性粉剂（推荐用药浓度为 0.60mgmL-1） ，购自巴斯夫（中国）有限公司；50% 咯菌腈可湿性粉剂（推荐用药浓度为 0.05mg mL-1） ，购自先正达（苏州）作物保护有限公司；50% 腐霉利可湿性粉剂（推荐用药浓度为 0.80mgmL-1） ，购自海南正业中农高科股份有限公司； 乙醇、丙酮、吐温 -80、葡萄糖、琼脂、NaOH、HCl 等化学试剂购自国药集团化学试剂有限公司。参考方中达（1998）的方法配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA 培养基） 。1.2 试验仪器ME204E 分析天平（梅特勒 - 托利多国际股份有限公司） ，E
8、ppendorf 移液枪（艾本德中国有限公司） ，LDZX-30E 灭菌锅（上海申安医疗器械厂） ，YJ-VS-2 型超净工作台（无锡一净净化设备有限公司） ，MPJ-250 型培养箱（上海森信实验仪器有限公司） ，电炉（北京中兴伟业仪器有限公司）以及量筒、玻璃棒、烧杯、三角瓶、直尺、铅笔、标签纸、封口膜、挑针、容量瓶、接种针、打孔器、培养皿、菜刀、纱布等。1.3 试验方法1.3.1 室内毒力测定 采用生长速率法测定药剂对草莓灰霉病菌的抑制作用（凌金峰等，2016） 。取适量丙酮将啶酰菌胺和咯菌腈原药溶解，制备成浓度为 100gmL-1的母液。将啶酰菌胺和咯菌腈分别按照 11、13、14、15
9、、51、41、31、2：1、32 的质量比配成混合液，无菌水稀释，并加入适量吐温 -80 使药剂均匀分布于水相中，将药液与培养基按 19 的体积比配制成最终含药量为 0.001、0.01、0.1、1、10gmL-1的含药平板，同时设无药平板为对照。用打孔器在预培养 48h 的菌落边缘打取菌饼，正面朝下接种到含药平板上，每处理 3 次重复，置于 20培养箱中，黑暗培养 72h 后，采用十字交叉法测量各处理菌落直径。计算各处理浓度的抑制率，并采用 DPS6.55软件的专业统计方法进行生物测定分析，明确啶酰菌胺、咯菌腈及其复配物的毒力回归方程，EC50值和相关系数。试验共进行 2 次。采用 Wadl
10、ey 法进行增效作用评价（农业部农药检定所，2006） 。当增效系数 SR 1.5 为增效作用；0.5 SR 1.5 为相加作用；SR 0.5 为拮抗作用。a（a+b） bSR式中：A、B 分别代表两种药剂，a、b 分别代表两种药剂在混剂中所占比例，ob 为实际观察值，th 为理论值。对照菌落增长直径 - 处理菌落增长直径对照菌落增长直径抑制率 =100%1.3.2 田间药效试验 田间试验在湖南省衡阳市衡东县新塘镇草莓基地进行，选择草莓灰霉病历年发生均匀且发病较重的大棚，草莓品种为红颜，株距 3038cm，土壤肥力中等，草莓长势均匀一致。试验共设 5 个处理，50% 啶酰菌胺可湿性粉剂（T1）
11、 、50% 咯菌腈可湿性粉剂（T2） 、50% 啶酰菌胺可湿性粉剂和 50% 咯菌腈可湿性粉剂复配物（质量比为 31，该比例对草莓灰霉病菌的增效作用最明显） （T3） ，以 50% 腐霉利可湿性粉剂为药剂对照（CK1） ，清水作为空白对照（CK0） 。每处理 3次重复，共 15 小区，采用完全随机排列，小区面积 10m2。采用辉腾 3WBS-20A 型背负式手动喷雾器均匀喷施药剂，每小区施药液 750mL 左右。草莓普遍开花结果初期，病害发生前施药 3 次，每次间隔 7d，并于第 3 次施药后 710d，根据草莓灰霉病田间试验标准调查复配物对草莓的药害情况、病果率，计算防治效果。对照区发病率
12、- 处理区发病率对照区发病率防治效果 =100%1.4 数据分析原始数据经 Excel 软件进行初步处理，采用DPS6.55软件的专业统计方法对室内毒力数据进行生物测定分析，获得药剂的 EC50、回归方程以及相关系数；采用 DPS6.55软件的试验统计方法对田间防5454研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES中国蔬菜学术论文下载 www. c n v e g . o r g效数据进行单因素完全随机方差分析，明确不同药剂处理之间差异。2 结果与分析2.1 啶酰菌胺与咯菌腈复配对草莓灰霉病菌的抑制作用由表 1 可知，啶酰菌胺和咯菌腈均对草莓灰霉病菌具有抑制作用，其中咯菌腈的毒力高于啶酰菌胺
13、，其抑制中浓度远低于啶酰菌胺。当咯菌腈的含量啶酰菌胺时，其在复配物中所占的比例越高，增效系数越低：当啶酰菌胺和咯菌腈复配比例为11 时，表现增效作用；当啶酰菌胺和咯菌腈复配比例为 13、14、15 时，均表现相加作用。当啶酰菌胺和咯菌腈复配比例为 32、 2： 1、 31、51 时均表现增效作用，但比例为 41 时则表现相加作用，这可能跟菌株在培养箱中放置的位置有关。 31复配的增效系数为4.47， 增效作用最明显。2.2 啶酰菌胺与咯菌腈复配对草莓灰霉病的田间防治效果由表 2 可知，啶酰菌胺和咯菌腈按照质量比31 复配（T3）可以显著降低草莓灰霉病的发病率，对草莓灰霉病具有较好的控制效果，两
14、年防效均达 70% 以上，显著高于腐霉利的药剂对照。经过田间观察发现，无论是复配物还是单剂均未对草表 1 啶酰菌胺和咯菌腈复配对草莓灰霉病的室内毒力测定杀菌剂回归方程相关系数EC50（ob） /gmL-1EC50（th） /gmL-1增效系数（SR）啶酰菌胺y=0.2457x+5.16750.99730.2080咯菌腈y=0.7912x+6.20420.97740.0301啶酰菌胺咯菌腈（11）y=0.8456x+6.25560.98460.03280.05261.60啶酰菌胺咯菌腈（13）y=0.7478x+6.15200.99170.02880.03831.33啶酰菌胺咯菌腈（14）y=0
15、.8393x+6.16980.98760.04020.03630.90啶酰菌胺咯菌腈（15）y=0.6792x+5.81710.98970.06270.03510.56啶酰菌胺咯菌腈（51）y=0.5036x+5.65930.98430.04910.10482.13啶酰菌胺咯菌腈（41）y=0.6624x+5.68540.99120.09230.09531.03啶酰菌胺咯菌腈（31）y=0.6886x+6.32750.99880.01880.08404.47啶酰菌胺咯菌腈（21）y=0.7766x+6.15540.99000.03250.07002.15啶酰菌胺咯菌腈（32）y=0.7745x+6.17710.98380.03080.06182.01表 2 啶酰菌胺与咯菌腈复配对草莓灰霉病的防治效果处理2015 年2016 年病果率/%防治效果/%病果率/%防治效果/%T16.740.10bc 66.040.04ab5.800.25c69.830.01bT26.940.04bc 65.050.05ab6.670.20b65.270.01cT35.630.60c71.460.06a4.920.40d74.40
