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1、病原生物与免疫学实验教学大纲课程代码：CLMB3005 大纲执笔人：王蕾 周霞 陈永珍 邓敏 课程名称：病原生物与免疫学 大纲审批人：邱玉华英文名称：Pathogenic Organisms and Immunology 课程学时：106 实验学时：54实验室名称：医学部实验中心形态学实验室实验课性质：非独立设课适用专业：临床医学卓越医师教改班一、本课程实验教学目的与要求通过不同性质的实验教学训练，以加深学生对理论知识的理解和运用，激发学生的学习兴趣和创新意识，逐步培养学生从事相关科学研究及独立分析和解决问题的能力。掌握细胞分离培养、细胞膜型分子及可溶性分子的分析、细胞杂交与筛选以及疾病模型建
2、立与生物学鉴定等试验技能；掌握无菌操作技术、微生物染色及形态观察、细菌人工培养法、血清学检测等微生物学的基本方法和技能；掌握常见医学蠕虫、医学原虫各期形态结构特征、医学节肢动物形态结构及其致病性与常规诊断方法。二、主要仪器设备及现有台套数1.卧式高压消毒锅2 台 9.恒温水浴箱 3台 2.手提式消毒锅2 台 10.恒温振荡培养箱 2台3.实验准备用显微镜3 台 11.冰箱 10台4.示教显微镜15台 12.电子天平 1台5.学生用显微镜 每人台 13.普通天平 5台 6.净化台 2台 14.电磁炉 5台 7.恒温培养箱 6台 15.厌氧培养箱 1台8.干烤箱 2台 16.台式离心机 2台 三、
3、实验课程内容和学时分配序号实验项目名称目的要求实验内容学时分配实验类型每组人数必开选开1免疫系统的组成掌握胸腺、脾、淋巴结的组织结构，并比较三者之间的异同点(1)观看光盘：免疫系统(2)观察组织切片(3)示教片2基础性1必开2人外周血单个核细胞的分离纯化与计数掌握人外周血中单个核细胞的分离方法，了解无菌操作的一般要求。能够正确使用离心机及显微镜等。能够正确地进行细胞计数。(1) 从抗凝的人外周 血中分离出单个核 细胞（包括TB、 NK、DC及单核等）(2) 细胞观察(3) 细胞计数 3 综 合 性 2必开3细胞膜型分子的免疫荧光分析了解细胞膜型分子的表达、意义及分析方法。能够正确使用荧光显微镜
4、并对实验结果进行分析。（1） 细胞膜型分子与相应抗体（一抗）及标记抗体（二抗）结合。（2） 荧光显微镜下 观察阳性细胞（3） 镜下阳性率的 计算3 综 合 性 2必开4可溶性分子的酶联免疫分析掌握ELISA测定可溶性分子的方法、原理及分析结果的正确分析。能够规范使用酶标检测仪。（1） 取人或小动物血液或体外培养物标本（2） 按ELISA分析 程序进行操作。（3） 自动酶标仪进 行分析4设计性2必开5B淋巴细胞杂交掌握分泌特异抗体杂交瘤细胞的建株原理。能够正确地进行细胞融合的操作及阳性克隆的筛选。（1） 运用特定抗原 免疫BALB/c（2） 取免疫动物脾脏细胞与骨髓瘤 细胞进行杂交。（3） 显微
5、镜下观察 杂交细胞的形态4设计性2必开6细菌形态与结构的检查法掌握显微镜（油镜）的使用方法；革兰染色法及细菌形态观察法；熟悉细菌的特殊结构。介绍微生物实验室规则及注意事项；显微镜油镜的使用方法；革兰染色及形态观察：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌；示教标本观察：鞭毛、芽胞、荚膜、螺形菌3基础性1必开7细菌的培养法、细菌代谢产物的检查掌握细菌接种及观察细菌生长现象的基本方法；熟悉细菌鉴别常用生化反应的现象及结果判断。介绍常用培养基的制备方法及用途：肉汤培养基、普通琼脂培养基、半固体培养基、血液琼脂培养基、SS平板、庖肉培养基；细菌的接种法：金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌；示教：糖发酵、吲哚、尿素酶、硫化
6、氢试验及色素产生等常用生化反应结果；3综合性1必开8细菌的分布、理化因素对微生物的影响掌握药敏试验（纸片法）的方法及结果判断；熟悉细菌在自然界及正常人体中的分布及检查的方法；了解理化因素对微生物生长的影响。介绍实验室常用消毒灭菌方法：干热灭菌、高压蒸汽灭菌、过滤除菌；紫外线杀菌试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌；化学消毒剂抑菌试验：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌；抗生素药物敏感试验：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌；细菌的分布：环境及人体（学生自设计）的细菌检查；3设计性2必开9化脓性球菌、肠杆菌科掌握化脓性球菌的形态特征及菌落特点；分离培养肠杆菌科细菌常用的选择培养基及大肠埃希菌、沙门菌和志贺菌的培养
7、特性；熟悉凝固酶试验、玻片凝集试验的方法及结果判断。三种葡萄球菌菌落形态观察；金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌在血平板上菌落形态及溶血现象观察；淋病奈瑟菌及链球菌革兰染色标本观察；凝固酶试验：试管法（示教）；玻片法（操作）；大肠埃希菌、沙门菌及志贺菌在SS平板上的菌落特点的观察；大肠埃希菌、沙门菌及志贺菌在克氏双糖铁培养基上生长特点的观察；玻片凝集试验：沙门菌、志贺菌；3基础性1必开10其他病原性细菌掌握抗酸染色的原理、方法；支原体特征性菌落及梅毒螺旋体的形态特点；熟悉破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的形态特征。破伤风梭菌、产气荚膜梭菌染色标本观察； 产气荚膜梭菌的双层溶血现象观察；痰涂片标本抗酸染色
8、及结核分枝杆菌形态观察；支原体菌落、梅毒螺旋体染色标本观察；3基础性1必开11病毒及真菌的检查方法掌握病毒血凝试验的原理、方法及结果判断，观察真菌形态结构的常用方法；熟悉病毒感染产生的CPE现象及狂犬病毒包涵体的识别，常见病原性真菌的菌落特点及形态特征。介绍病毒的培养方法：鸡胚接种法、细胞培养法；正常培养细胞及病毒致细胞病变作用（CPE）观察；狂犬病毒包涵体-内基小体染色标本观察；病毒血凝试验真菌三种菌落形态的观察；介绍真菌培养方法：小培养；厚膜孢子、大分生孢子、新生隐球菌形态观察；3基础性1必开12线虫综合实验掌握虫卵、幼虫、成虫等虫体形态结构，了解常用实验诊断方法（1） 虫卵、幼虫、成 虫
9、等虫体形态 结构（2） 常用实验诊断 方法3综合性3必开13吸虫综合实验掌握虫卵、幼虫、成虫等虫体形态结构，了解常用实验诊断方法（1） 虫卵、幼虫、成虫等虫体形态结构（2）常用实验诊断 方法3综合性3必开14绦虫综合实验掌握虫卵、幼虫、成虫等虫体形态结构，了解常用实验诊断方法（1）虫卵、幼虫、成虫等虫体形态结构（2）常用实验诊断 方法3基础性3必开15原虫实验（一）掌握油镜的使用，掌握油镜下阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫、杜氏利氏曼原虫、阴道毛滴虫等各期结构特征、了解弓形虫各期形态（1） 阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫、杜氏利氏曼原虫、阴道毛滴虫等（2） 各期的结构特 征（3） 弓形虫各期形 态3综合性3必开
10、16原虫实验（二）掌握间日疟原虫、恶性疟原虫各期形态、了解三日疟原虫、卵形疟原虫各期形态（1） 间日疟原虫各 期形态（2） 恶性疟原虫各 期形态（3） 三日疟原虫、卵 形疟原虫各期 形态3综合性3必开17医学节肢动物实验掌握常见医学节肢动物形态、掌握按蚊、库蚊、伊蚊等三属蚊各期形态特征、掌握蜱螨形态特征、了解蝇、蚤、虱各期形态（1） 医学节肢动物 形态（2） 按蚊、库蚊、伊蚊等三属蚊各期形态特征（3） 蜱螨形态特 征3综合性3必开4、 考核方式实验成绩总分20分( 占总成绩20%)。其中出勤率5分、实际操作5分、结果的准确性5分及实验报告5分（包括原理、主要操作、结果及注意事项等)。五、实验教
11、材、参考书1、教材：（1）冯一中、诸葛洪祥 徐培君主编 医学形态学实验指导（一） 苏州大学出版社 2004年（2）居颂光 朱一蓓 主编 医学免疫学实验技术 苏州大学出版社 2011年（3）陈永珍等主编 组织胚胎实验学双语版 科学出版社 2014年2、参考书：(1) 洪秀华主编临床微生物学和微生物检验实验指导 人民卫生出版社 2004年(2) 李凡主编 医学微生物学 人民卫生出版社 2008年(3) 沈继龙主编人体寄生虫学要点解析与实验指导 人民卫生出版社2005年(4) 乔继英、程彦斌主编人体寄生虫学图谱 人民卫生出版社 2002年(5) 曾园山主编 组织学与胚胎学 科学出版社 2010年(6) 唐军民等主编组织学与胚胎学彩色图鉴北京大学医学出版社2012年(7) 陈永珍等主编 组织学与胚胎学 科学出版社 2013年(8) 高英茂主编双语版组织学与胚胎学 人民卫生出版社 2009年(9) 安利国主编 发育生物学 科学出版社 2010年7
