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1、红细胞免疫检测及临床运用红细胞免疫检测及临床运用新进展新进展锦州医学院附属第一医院检验中心 张蕴丽一、红细胞免疫根本实际一、红细胞免疫根本实际一概述n血液与免疫有亲密联络。n本世纪初，Landsteiner采用免疫学方法在人类红细胞与血液混合实验中发现了人类ABO血型系统。认识到红细胞外表存在许多能与血清中相应抗体凝集的抗原，如Mn，P型、Rn、Lutheran、Lewis、Kell、Duffy、Kidd等。除了目前所知数十种血型抗原外，红细胞还含有不少其它抗原，这些抗原在异常情况下，可引起对本身红细胞免疫应对产生抗体而导致红细胞系统疾病，如输血反响、新生儿溶血症、本身免疫溶血性贫血，药物过敏
2、性红细胞溶血等。n由于红细胞免疫粘附实际的发现以及红细胞免疫功能研讨的逐渐深化，1981年美国生殖免疫学家Siegel提出“红细胞免疫系统的概念，指出RBC是不可忽视的免疫细胞，也象白细胞一样具有重要的免疫功能，是完好机体免疫系统中的一个子系统，是不可短少的一个重要组成部分。这一实际提出刷新了人们对RBC的认识只停留在CO2、O2呼吸载体的概念上，开辟了免疫学的新领域。 n我国在红细胞免疫研讨任务始于1982年。n1989年成立全国红细胞免疫研讨协作组。n1993年12月又成立了全国免疫学会根底免疫委员会红细胞免疫专业学组。二红细胞免疫开展史n20世纪30年代，杜克LH. Duke首先发现锥虫
3、在抗血清及补体存在时，可粘附于人类RBC上。nBrown和Broom：不同人的RBC对锥虫的粘附才干高低不同。Brown本人的RBC对抗体调整过的锥虫不断未能显示任何反响，但Broom的RBC却有很强免疫粘附作用。因此他们比较了52例各种疾病患者与26例正常人的RBC粘附活性，发现两例TB病患者与1例风湿热患者粘附才干降低。 n1953年：纳乐逊R.A.Nelson察看体内外梅毒螺旋体，型肺炎双球菌粘附于灵长类动物人、猴、狒狒等的红细胞和非灵长类动物血小板上，促进吞噬景象。他用正常人RBC、WBC与相应抗体致敏的型肺炎双球菌进展培育，发现肺炎双球菌可粘附于正常人RBC外表并被WBC吞噬，其吞噬
4、率达60%，未加抗体组4%和未加RBC组18%，推测RBC膜存在免疫粘附受体，免疫复合物同该受体结合可促进WBC的吞噬作用。由此命名为免疫粘附景象Immnme adhereru phenomenon。 n1956年：Nelson又将肺炎球菌注入猿猴体内，发现其绝大多数细菌粘附于RBC上，以为灵长类动物RBC的免疫粘附景象起到对血中异物的去除及细菌的固定作用，由此以为是宿主机体防御的一部分。n1963年：尼雪俄考K. Nishioka证明红细胞这种免疫粘附景象是经过人红细胞膜C3受体来实现，现称C3受体为第一补 体 受 体 Ccomplement Receptor Typel, CR1。n70年
5、代后期有关CR1的研讨报道很多。n1980年弗尔龙D.T.Teavon从红细胞膜上分别出CR1，研讨CR1的性质：分子量19万25万，多态性膜糖蛋白，CR1总数95%以上存在于RBC膜上，CR1除了存在RBC膜上，还存在于多种细胞膜上如多核WBC、单核细胞、巨噬细胞、B细胞、肥大细胞、肾小球上皮细胞。nECR1在RBC膜上呈簇状分布。n1981年美国生殖免疫学家西格尔I.Sigel在前人研讨根底上发现n1RBC有多种免疫功能n2RBC可粘附胸腺细胞n3血清中存在红细胞免疫粘附抑制因子，预见了血清中存在红细胞免疫调理系统。n4RBC膜过氧化物酶活性与CR1活性有关。n5RBC有杀伤致病原的效应细
6、胞样作用推测RBC在阻止肿瘤细胞血行转移中有作用。n综上提出“红细胞免疫学说。 n1982年梅多夫M, E, Medlf体外证明RBC的CR1和血浆中因子共同作用将粘附的免疫复合物Ic中的C3b降介为C3dg，C3d而失去炎性。n1982年郭峰证明体外RBC可粘附补体调理过的酵母菌，并证明SLE，肿瘤患者红细胞免疫粘附酵母菌的才干低下，该实验证明RBC可直接粘附补体调理过的病原体。n1983年科娜康夫在猴血循环内注入免疫复合物IC，用同位素示踪，发现大多数IC很快与红细胞结合，并迅速被运至肝、脾，在该特定环境下，巨噬细胞膜上FC段受体比RBC膜上CR1活性强，使IC从红细胞膜上零落而被吞噬消毁
7、RBC促吞噬作用。 n1984年西格费索A.Sigfuson经过体外美州商陆素刺激淋巴细胞转化实验发现参与本身RBC可添加淋巴细胞转化率和培育液中IgG、IgA量。n1985福斯里德J.Forslid在体外经过对比实验证明红细胞促吞噬作用与红细胞CR1和SOD酶活性有关。n1986年郭峰经过体外对比实验证明RBC可粘附补体调整的各种肿瘤细胞，并证明肿瘤患者RBC免疫粘附肿瘤细胞的下降，发现RBC可直接粘附未经补体调理过的肿瘤细胞，其机理不明。n1992年刘景田等证明这种直接免疫粘附的机理与红细胞膜上CR1和肿瘤细胞膜上C3b分子有关，肿瘤细胞膜上的补体来源于荷瘤小鼠的腹水中，而荷瘤小鼠的腹水中
8、确有少量补体物质的存在。n1986年凯斯L.Keyes等发现人本身红细胞可添加T细胞产生-干扰素。n1987年鲁杰利斯M.T.Rugeles发现本身红细胞参与外周血单个核细胞培育管中可加强原发性和继发性特异抗体应对。n1987年郭峰经过体外对比实验证明血清中还存在一种加热5830不灭活的红细胞免疫粘附促进因子。 n1988年叶瑞拉G.Yirella经过体外抗淋巴细胞功能相关抗原3LFA-3单抗或CD2单抗处置和不处置的红细胞对促进B细胞增殖和免疫球蛋白的影响分析，以为红细胞的这种作用是因CD58LFA-3，CD59与T细胞的CD2分子相互作用亲密相关。推测是由于RBC促进T细胞IL-2受体表达
9、和加强对外源性IL-2应对的敏感度所致，能够与添加B细胞生长因子或分化因子有关。表达LFA-3的红细胞有利于激活T辅助细胞。T辅助细胞接受第一信号加工后的抗原刺激外，还接受第二信号经过LFA-3/CD2相互作用。 n1988年万内利J.R.Yannelli在培育瓶内加RBC可促进LAK细胞的产量和活性，RBC数与淋巴细胞数为100：1时IL-2激活的LAK细胞活力最大。经过单抗阻断实验，证明这种促进作用与细胞膜上LFA-3与淋巴细胞膜CD2相互作用亲密相关。 n1988年威瑞拉Vireal用单抗标志法证明红细胞膜有CR3。n1989年郭峰发现RBC和淋巴细胞或粒细胞可共同围攻粘附各种肿瘤细胞。
10、n1990年派考德J.P.paceand采用折痕标志免疫电镜比较PMN和红细胞的CR1形状，发现细胞细胞上几乎50%的CR1量3单位簇状分布，而这种簇状分布在PMN不到15%。CR1的这种簇状分布可使它与C3包被的IC结合位点呈多价性，衔接更为结实。n1994年刘景田发现CR1免疫调理因子，其中包括CR1免疫调理促进因子和CR免疫调理抑制因子。对粒细胞、淋巴细胞主要指B淋巴细胞也有同样的调理作用。三红细胞的免疫物质n免疫细胞的免疫功能是经过其免疫物质实现的，红细胞的免疫物质主要为存在于红细胞膜上的蛋白质分子。现已发现红细胞有许多与免疫有关的物质如CR1、CR3、CD58、CD59、DAF，SO
11、D酶等。 n红细胞与其它免疫细胞的比较红细胞与其它免疫细胞的比较 免疫细胞红细胞T细胞B细胞NK细胞K细胞巨噬细胞中性粒细胞细胞数/ML5.410921060.51060.31063.66106IgGFC受体CR1免疫粘附免疫功能粘附提呈抗原等细胞免疫体液免疫细胞免疫细胞免疫处置提呈抗原调理吞噬n1补体受体CR1，CR3n补体受体存在于不同种类的血细胞上，不同的血细胞所具有的补体受体不同，补体受体根据结合补体C3片段种类的不同可分为CR1，CR2、CR3三类。nCR1是C3b、C4b的受体也是与红细胞免疫粘附作用有关受体。nCR2是C3d的受体，C3d是C3b裂解的终末产物。nCR3是iC3b
12、的受体是C3b受I因子，H因子在CR1参与作用下构成的无活性C3biC3b人类细胞上的补体受体 细胞种类细胞种类 补体受体类型补体受体类型 CR1CR2 CR3 红细胞红细胞血小板血小板单核单核-巨噬细胞巨噬细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞中性粒细胞中性粒细胞肾小球上皮细胞肾小球上皮细胞B淋巴细胞淋巴细胞 NK细胞细胞 n红细胞的补体受体主要是CR1，最近发现还有CR3nCR1是一种单肽链糖蛋白，具有明显的多肽性，有4个同种异型，其配体是C3b、iC3b、C4b、iC4b均可结合于CR1，但C3b仅需少量即可发生免疫粘附约60个分子/细胞，而C4b那么需较大数量2500个分子/细胞，才干发生反响。
13、niC3b也可结合于CR1，但结合程度较轻，它与CR3型受体结合才干强。nCR1活性能被胰酶、糜蛋白酶、鞣酸、甲醛、强酸、强碱所破坏，在PH6.77.3下最能发扬其细胞免疫粘附作用。n血细胞中CR1数量：红细胞CR1与白细胞CR1数比例21：1，红细胞膜上的CR1呈簇状分布，在吞噬细胞上主要呈散在分布，每簇约含2-15个CR1，红细胞CR1总数与簇数和每簇中CR1单体数高度相关。nCR1簇状分布优点：可使它与C3b包被的IC结合位点呈多价性，衔接更为结实。n红细胞膜上的CR1总数比白细胞多。n红细胞对粘附C3b分子的抗原如肿瘤细胞、细菌等的亲和力显著大于吞噬细胞，红细胞在去除CIC致热原中占有
14、重要位置。CR3：能够具备对某些小抗原有吞噬，经过释放过氧化酶对抗原加以消毁和可直接识别某些细菌有关。n2淋巴细胞功能相关抗原-3LFA-3n为红细胞膜上的一种蛋白分子，是CD2的天然配体，广泛分布于红细胞、T淋巴细胞，B淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞，血小板等外表是由14KD和19KD二条单链多肽和糖基组成的糖蛋白，分子量为55-70KD。nCD2为T细胞分化抗原中最早出现的，胸腺细胞时即出现，相当于OKT系统中OKT11，CD4即辅助T细胞CD8抑制T细胞细胞均存在此一分化抗原。nLFA-3作用：LFA-3与受体CD2结合后可传送足以诱导T细胞增殖，淋巴因子分泌及非MHC限制性细胞毒作用的
15、跨膜信号，使T细胞活化，分泌IL-2，IFN-r和表达IL-2受体等，另外CD2/LFA-3在胸腺发生及T、B细胞相互作用中均起作用。n因此，LFA-3与CD2作用是免疫细胞间相互协调作用，淋巴细胞活化，产生淋巴因子的分子根底。n3人类补体膜辅助因子蛋白MCPn是红细胞膜上功能蛋白的一种，能与CR1，DAF等基因协调完成红细胞对补体活性的调理，是灭活C3b、C4b、iC3b的细胞外表辅助因子，可维护本身细胞免疫补体损伤。n4降介加速因子DAFn亦称为补体衰变加速因子，是一种糖蛋白，不同细胞膜上DAF分子量不同。DAF与红细胞膜上MCP、CR1等多种功能蛋白共同协调完成红细胞对补体活性的调理，使
16、宿主细胞免受本身补体级联放大过程中引起的损伤。DAF主要作用于Bb及C2a，而CR1主要作用于C3b片段，DAF结合C3b的才干比CR1小得多。 n5I因子n即C3b灭活因子，是一种糖蛋白。作用添加吞噬细胞对抗原的粘附，从而加强其免疫功能。与NK/K细胞上的CR3结合，发扬依赖补体的细胞毒作用CDCC，杀灭肿瘤细胞或其它异已细胞。n6过氧化物酶n在RBC免疫粘附后该酶活性加强，提高消毁抗原物质的才干，且可将抗原决议簇提呈给T细胞，经过T细胞外表受体TCR激活T细胞功能。n7过氧化物歧化酶nRBC内含有SOD超氧化物歧化酶，该酶是一类重要的氧自在基去除酶，使O2超氧化物阴离子自在基变为H2O2，
17、O2分子，经过去除氧自在基O2，使细胞和组织免受损害，维护和加强免疫细胞的免疫功能。n8红细胞免疫粘附抑制因子n存在血清中，1981年发现一种糖蛋白。主要抑制红细胞C3b受体活性，可降低红细胞粘附携带IC的才干。n9红细胞免疫粘附促进因子n也存在于血清中，为一种糖蛋白，提高红细胞C3b受体活性，故可使红细胞免疫粘附活性加强。三红细胞的免疫功能n1红细胞免疫粘附、携带及去除抗原异物的功能n免疫粘附：指细菌、寄生虫、梅毒螺旋体、胸腺细胞、肿瘤细胞等抗原物质激活补体或这些抗原与相应的抗体结合激活补体构成复合物粘附于血细胞红细胞、白细胞或血小板上。n红细胞的免疫粘附作用：经过细胞膜外表的补体受体实现的
18、。 n抗原与抗体构成的Ab-Ab复合物或Ag-Ab-C构成存在，红细胞经过其膜上CR1、CR3的免疫粘附功能将Ag异物携带至肝脾加以消毁的，因此红细胞是机体去除循环系统液相中CIC的主要承当者，几乎一切的补体调理过的抗原和IC都是由红细胞结合运至肝脾消毁的。n在肝脾血流降速时，RBC与固定巨噬细胞比例剧降为10:15:1时，吞噬细胞上CR1、CR3、FCR对红细胞上IC中的C3b、iC3b总亲和力大于红细胞CR1的亲和力时，微循环中的Ag-Ab-C复合物才干从RBC转向巨噬细胞，巨噬细胞便将红细胞免疫粘附的复合物夺下，并将其免疫粘附吞噬，红细胞释放回血液循系统，不被吞噬，继续执行CIC的功能。
19、但对那些结合有特异性抗原、抗体、补体复合物的RBC被吞噬细胞吞噬、去除血行中大量潜在的致病性免疫复合物。nRBC经过去除血循环中的抗原异物，如细菌、病毒、癌变细胞等，在防御微生物感染，坚持机体内环境的平衡，维持自稳机能方面有着重要意义。 n2红细胞识别和储存抗原的功能nGarrey用新生兔做动物实验，将标志氚的牛血洁白蛋白3H-BSA注入新生家兔腹内，用外周血涂片及组织切片的放射显影法察看循环中RBC和肝血管内的RBC，发现6小时后血循环中出现携带BSA的红细胞，12h后绝大部分抗原浓集于肝脏血管内，注入1-2天，肝血管系统内外红细胞外表聚集了大量抗原，携带抗原的红细胞在肝、血循环中可继续4-
20、6周以上。n该实验结果提示新生兔的RBC有识别和储存异种抗原物质的才干。同时将标志氚的兔血洁白蛋白3H-BSA抗原，采用同样方法察看，阐明新生兔RBC对同种抗原亦具有识别才干和免疫耐受性。n郭峰报道RBC可粘附血清调理过的酵母菌和各种肿瘤细胞。机理可以为酵母菌和肿瘤细胞可旁路激活补体粘附C3b，再与RBC上的CR1相结合而被识别。由此以为RBC能识别，储存各种抗原。n3红细胞具有效应细胞样作用nRBC膜外表存在过氧化物酶活性，是一种典型溶酶体酶，抗原粘附RBC可提高粘附区域过氧化物酶活性，使RBC作为效应细胞起作用，RBC经过这种酶激活的作用，可直接杀伤病原体，消毁粘附的抗原抗体复合物，加强C
21、IC的去除。因此以为RBC本身也有防御感染的作用。n4红细胞具有抗原提呈细胞APC样作用nRBC具有双重粘附特性，既可粘附IC，又可粘附本身胸腺细胞及T细胞上，从而可以将抗原提呈给胸腺细胞及T细胞，起抗原提呈细胞APC样作用，加强T细胞免疫功能，更有效地去除IC。n5红细胞促进淋巴细胞的免疫功能nRBC具有促进T、B淋巴细胞和体液免疫功能，扩展细胞免疫及体液免疫效应。RBC具有双重免疫粘附特性，即RBC不仅与Ag-Ab-C相互粘连，且可与自体的胸腺淋巴细胞和T淋巴细胞粘附，构本钱身玫瑰花结，这种双重免疫粘附，在IC与T淋巴细胞之间起着桥梁作用，使抗原与T淋巴细胞接近，从而将抗原提呈给T淋巴细胞
22、，添加T淋巴细胞捕捉抗原的时机，从而扩展T细胞依赖的免疫应对。nT淋巴细胞在RBC作用下，能促使IL-2受体表达及-干扰素产生，抗CD2单克隆抗体可抑制RBC对T细胞产生干扰素的促进作用。n红细胞IFA-3与T细胞CD2的作用在促进T淋巴细胞活化及产生淋巴因子的分子根底 。 红 细 胞 经 过 LAF-3/CD2以 及 CR1-CIC/TCR对T细胞粘附，提呈抗原，激活T细胞增殖而起抗原提呈细胞作用。红细胞能促进B细胞增殖分化产生抗体和加强抗体依赖的细胞毒性ADCC作用。n红细胞还能加强淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫粘附作用，直接加强NK细胞的抗肿瘤活性，且红细胞加强NK细胞依赖于Ca2+的存在。n
23、红 细 胞 能 显 著 添 加 LAK细 胞 Lyhphokime cativctell killed cell对肿瘤细胞的杀伤作用。在培育瓶内参与RBC可促进LAK细胞的产量和活性，RBC数与淋巴细胞数为100:1时IL-2激活的LAK细胞活力最大。LAK细胞系淋巴因子激活的杀伤性淋巴细胞，对多种肿瘤细胞均有杀伤作用，是目前肿瘤过继疗法中一各很有出路的细胞。n因此，RBC对T、B淋巴细胞、NK、LAK细胞等的免疫功能有着重要的影响。而白细胞分泌的细胞因子如胸腺素、IL-2、IFN-等可促进红细胞的免疫功能。n6红细胞促进吞噬细胞的吞噬功能nRBC经过其外表的CR1补体受体与病原体与相应抗体组
24、成IC的衔接，可促进吞噬细胞对微生物的吞噬作用。且与红细胞外表的补体受体CR1数量与活性有关。nSiegel推测RBC可阻止癌细胞在血循环中分散。癌细胞可粘附红细胞，易被吞噬细胞捕捉、吞噬、去除，防止癌细胞的分散。红细胞具有加强吞噬细胞抗肿瘤作用。 n7红细胞去除阴离子的作用n超氧阴离子O2是生物体内主要的自在基FR，在许多情况下，对机体是有害的，是导致炎症、衰老及癌变等的缘由之一。红细胞超氧化物歧化酶SOD是一类重要的氧自在基去除酶，具有抗炎、抗衰及抗辐射的作用，可消除微环境中超氧化物阴离子自在基对巨噬细胞膜和淋巴细胞的破坏作用，以维护和加强吞噬功能和淋巴细胞的免疫功能，使吞噬细胞产生IL-
25、1、TNF等因子的才干加强。SOD可去除微环境中的氧自在基对LAR活性的抑制，提高LAK细胞的产量与活性。n8红细胞参与补体活性的调控n补体系统经过免疫细胞上补体受体在调理细胞和体液免疫中处于枢纽位置。其中C3b分子占据重要位置。而红细胞有CR1、I因子、DAF与血浆H因子协同，先将C3b固定，后降解为iC3b、C3b，C3dg，使细菌、肿瘤细胞打上标志，使其更易被相应补体受体T、B淋巴细胞、NK、LAK细胞，吞噬细胞所识别，补体系统经红细胞协调作用调控各免疫细胞的免疫反响。n9红细胞本身免疫调控系统n血清中存在红细胞免疫粘附抑制因子和促进因子，分别抑制和促进红细胞免疫粘附活性，正常情况下这一
26、对调理因子处于动态平衡。当比例失调，红细胞免疫功能低下或紊乱。二、红细胞免疫学实验技术n目前国内外测定RBC免疫功能的方法有：花环法、放免法、酶联法、红细胞培育技术，发光法。n郭峰将红细胞免疫调理功能测定方法的研讨概括为三个测定： n1红细胞免疫粘附功能的测定，包括：nRBC-C3b受体花环nRBC-IC花环n红细胞SPA混合花环n肿瘤RBC花环直向肿瘤红细胞花环率DTER、促肿瘤红细胞花环率ETER、自然肿瘤红细胞花环率NTERn抗IgG单克隆抗体Coombs实验n2红细胞免疫功能本身调控才干的测定。包括：n血清中红细胞免疫粘附抑制因子测定n血清中红细胞免疫粘附促进因子测定n3红细胞对其它免
27、疫细胞的免疫调控才干的测定n红细胞促淋巴细胞吞噬功能的形状学方法n肿瘤红细胞淋巴细胞混合花环n肿瘤红细胞粒细胞混合花环n近年来，红细胞免疫测定法的研讨有了新的进展，如：n自然肿瘤红细胞花环实验，补体致敏酵母多糖血凝法，肿瘤细胞血凝法，红细胞促吞噬功能发光技术，红细胞免疫粘附混合花环实验，红细胞CR1PCR技术，红细胞促NK细胞活性测定技术等。 二、红细胞免疫技术二、红细胞免疫技术n一红细胞C3b受体花环及免疫复合物花环实验n1原理：n红细胞C3b受体花环：红细胞膜上CR1可与C3b致敏酵母多糖粘附构成花环，花环率的高低与CR1的活性及数量有关；RBC免疫复合物IC花环：RBC膜粘附的IC中C3
28、b分子可与酵母多糖粘附构成花环，花环率的高低与血清中CIC的含量有关。 n2方法学n郭峰法：n预备实验：1待测RBC肝素抗凝悬液指血，静脉血均可经生理盐水洗涤离心3次，2000rmin，3-5min，按红细胞计数方法配成1.25107ml运用液备用；2补体致敏酵母多糖冻干试剂按阐明书要求溶解。用生理盐水洗涤离心2次程度离心，按RBC计数法计数配成1108ml运用液备用。n正式实验：取两支试管，每管加待测RBC运用液0.075 ml，第一管再加补体致敏酵母多糖运用液0.075ml，第二管再加酵母多糖运用液0.075ml，都摇匀放37oC 水浴30min；取出用手腕悄然摇匀，加生理盐水 0.15m
29、l；混匀后再加0.25%戊二醛 0.05ml，悄然混匀；取13量程度涂片，吹干，加甲醇固定加少许瑞氏液，再加瑞氏缓冲液PH6.4，用盐水或自来水少许冲洗加盐水后高倍显微镜计数。一个红细胞结上2个或2个以上酵母菌为一朵花环。计数200个RBC，算出百分率。第一管为RBCC3b受体花环率，第二管为RBC-IC花环率。n刘景田法刘景田法nl l补体体致致敏敏YSYS酵酵母母冻干干试剂和和补体体未未致敏致敏YSYS酵母酵母冻干干试剂n按按阐明明书要要求求溶溶解解、洗洗涤，配配制制浓度度为l108l108mlml。n2 2红细胞胞悬液制液制备n取取未未梢梢血血或或肝肝素素抗抗凝凝血血1 1滴滴参参与与2
30、ml2ml生生理理盐水水洗洗两两次次，每每次次2000r2000rminmin3min3min，配成配成1.251071.25107mlml浓度。度。n3操作n取上述致敏酵母菌悬液与未致敏酵母菌悬液各50l参与2支康氏试管，各加红细胞悬液50l，混匀，37水浴30min，取出加0.25戊二醛1滴，悄然混匀，室温5 10min，程度抹片，低温枯燥，瑞氏染色，湿片镜检，以一个红细胞上结合两个或两个以上酵母菌为阳性细胞，计200个红细胞求阳性率。 计数血细胞计数仪1.25107/ml洗两次RBC.ICRRBC悬液50l+未致敏菌50l(RBC.C3b.RR)RBC悬液50l+致敏菌50l37孵育30
31、min固定510min程度抹片低温枯燥染色、镜检、计数RBC.IC阳性花环率%RBC.C3bR阳性花环率%末梢血1滴+2ml生理盐水实验程序实验程序n3本卷须知：n1计数要准确，RBC与酵母菌比例要适宜；n2酵母菌要分散不能自凝，要充分吹打分散，水浴时加盖，防止水进入 RBC破坏；n3戊二醛参与前后都应悄然混匀，防止假花环出现；n4涂片要均匀、簿，高倍镜下一个视野大约10个RB C为妥；n5各实验室要建立本人的正常值。n4意义：n作为RBC免疫粘附功能的目的。二项都低下判为原发性红细胞免疫功能低下，为RBC膜C3b受体遭到破坏和影响所致;假设RBCC3b受体花环率降低而 RBCIC花环率升高，
32、为继发性红细胞免疫功能低下，是由于 CIC添加，RBC粘附IC过多引起；如两项都升高，为红细胞免疫功能亢进与紊乱。该两项实验可作为临床上免疫性疾病的辅诊、判别预后、疗效察看等目的运用；可做为器官移植，疾病发病机理与药物挑选红细胞免疫目的运用；可做为中医中药免疫学研讨目的运用。n二二 红细胞红细胞SPASPA混合花环实验混合花环实验n1 1原理原理n葡葡萄萄球球菌菌 A A蛋蛋白白SPASPA能能与与红红细细胞胞膜膜粘粘附附 ICIC中中 IgGFcIgGFc段段相相结结合合，而而 C3bC3b致致敏敏酵酵母母菌菌能能与与红红细细胞胞膜膜上上未未粘粘附附ICIC的的C3bC3b受受体体结合，各自
33、构成花环。结合，各自构成花环。n2方法学n在试管内参与洗过3次待测红细胞悬液1.25 107ml0.05 ml，补体致敏酵母菌悬液1108/ ml0.05ml混合，放 37水浴 30min；再加 0.05mlSPA菌体悬液洗过一次后按红细胞计数法6.25 108ml，混匀，37水浴30min；取出程度涂片、瑞氏染色、油镜察看，RBC结上2个以上酵母菌为RBCC3b受体花环酵母菌花环；结上10个以上SPA 菌体为RBC-IC花环SPA菌体花环；结上10个SPA菌体和2个酵母菌以上为混合花环，未结合上SPA菌体与酵母菌为裸体红细胞。计数200个RBC，算出各自花环率。RBC为红色，酵母菌为兰色，S
34、PA菌体为小的浅兰色。n3本卷须知n根本同RBCC3b受体花环与RBCIC花环。另需留意的是染色要适当，不能太深；同时留意区别红细胞棘突变型与SPA菌体的区别如SLE患者有棘状红细胞出现，酶标 SPA或 SPA纯蛋白可替代 SPA菌体。n4意义n根本同RBCC3b受体花环与RBCIC花环。但该实验同时显示四种免疫功能形状不同的红细胞，按程度不同，将RBC分为四种亚群： n1SPA菌体花环为已全被IC或抗RBC抗体粘附的红细胞亚群；n2酵母菌花环为未粘附IC或抗RB C抗体的红细胞亚群；n3混合花环为部分粘附IC或有少许抗RBC抗体，并C3b受体有空位的红细胞亚群；n4裸体红细胞为未粘附IC或抗
35、体，并且C3b受体活性低不能粘附补体致敏酵母茵的红细胞亚群。 n此实验做为科研方法深化研讨各种免疫性疾病的免疫学发病机理更有价值。该实验的胜利也证明红细胞按免疫功能情况不同，可分为亚群，结合Coombs实验运用能够更有价值。在资料不断积累过程中会进一步开辟该实验的适用价值，对本身免疫溶血性贫血发病机理新的解释会进一步深化。n三三 血血清清中中红细胞胞免免疫疫调理理因因子子活活性性的的测定定n1 1原理原理n血血清清中中存存在在促促进与与抑抑制制红细胞胞免免疫疫功功能能的的两两种种物物质，即即红细胞胞免免疫疫促促进因因子子RFERRFER与与抑抑制制因因子子RFIRRFIR，前前者者耐耐热583
36、0min5830min不不被被灭活活，后后者者不不耐耐热5830min5830min灭活活而而设计红细胞胞C3bC3b受受体体花花环促促进与抑制与抑制实验。n2方法学n郭峰等法n促进与抑制实验两种方法可同时操作：取三支试管，第一、二支试管参与待测新颖血清各0.075ml。第一管放58水浴30min。第二管放室温，第三管参与0.075ml生理盐水；然后每管再参与洗过3次的正常人0型红细胞悬液1.25107ml0.05Inl混匀，放 37.水浴 30min；再加补体致敏酵母菌悬液1108ml0.05ml混匀，放 37水浴30min，加 7滴生理盐水混匀，再加 2滴 0.25戊二醛混匀 n从各管中取
37、出约 13细胞悬液程度涂片、吹干，加甲醇固定后，用瑞氏液染色。红细胞呈红色，酵母菌呈兰色。血清灭活管涂片高倍镜下计数二种花环规范，一种是红细胞结上 2个或 2个以上酵母菌为一朵花环计算促进率运用；一种是结上3个或3个以上酵母菌为一朵花环计算抑制率运用。n血清未灭活管涂片高倍镜计数，红细胞结上三个或三个以上酵母菌为一朵花环计算抑制率运用。生理盐水管涂片高倍镜计数，红细胞结上2个或2个以上酵母菌为一朵花环。每管涂片都计数200个红细胞，按各自规范，算出花环率。按不同公式求出促进率与抑制率，以此规范代表血清中红细胞免疫促进因子和红细胞免疫抑制因子活性。 58灭活血清组花环率RBCC3bRR抑制率RF
38、ER=58灭活血清组花环率未灭活血清组花环率RBCC3bRR促进率RFER58灭活血清组花环率生理盐水组花环率生理盐水组花环率=n刘景田等法：一步法刘景田等法：一步法红细胞免疫胞免疫调理因子理因子测定定n1 1资料料n1.11.1补体体致致敏敏YsYs酵酵母母冻干干试剂：按按阐明明书要要求求溶解、洗溶解、洗涤，配制，配制浓度度为11081108mlmln1.21.2电子子血血细胞胞计数数仪：山山东三三联电子子公公司司产品，型号品，型号DXJ2DXJ2。n1.31.3生物生物显微微镜：日本：日本产，型号，型号CHB145CHB145T T。n1.41.4电热恒恒温温水水浴浴锅：江江苏省省张家家港
39、港医医疗器器械械厂，型号厂，型号HH.SHH.S。n1.51.5标本本来来源源：为临床床确确诊的的住住院院患患者者，其其中中食食道道癌癌2424例例，胃胃癌癌1212例例，肝肝癌癌9 9例例，肺肺癌癌6 6例例，膀胱癌膀胱癌1111例。例。n2方法与结果n2.l 改郭峰原方法的两步法为一步法n按郭峰原法处置血清，分别参与灭活管5830min和未灭活管室温各0.075ml，第三管参与生理盐水0.075ml，然后依次加人洗过三次的正常人O型RBC悬液1.25107/ml，和补体致敏Ys酵母菌悬液运用液(1108ml)各0.05ml混匀，置37水浴30min，其他步骤按郭峰法操作，并与郭峰原法对照，
40、其结果如下：表2-1 一步法与两步法检测结果对比X土s 例数 两步法 一步法 P RFERREIRE/I626262116.821.7153.8622.10.5114.820.156.36.92.00.40.050.050.05n从上表可以看出，1用一步法对52例恶性肿瘤患者红细胞免疫调理因子的检测结果与两步法原方法检测结果根本相一致，二者无显著性差别P005，阐明将血清、O型 RBC和补体致敏 Ys酵母菌三者依次加人进展一次孵育与三者分别参与进展两次孵育所得结果是一样的，阐明一步法是可行的，可以替代两步法。2恶性肿瘤患者血清中RFER明显下降对照组 18.928.3，RFIR明显上升对照组3
41、4.8 4.6，与恶性肿瘤患者红细胞免疫功能低下是一致的。n血清中红细免疫促进因子与红细胞免疫抑制因子在血清中的含量，可用其RFER与RFIR的比值来表示，值的大小可反映血清中调理因子的变化规律，同时亦能间接反映红细胞的免疫功能。其比值愈大，血清中红细胞免疫促进因子含量愈高，其抑制因子含量愈低，红细胞免疫功能就愈强；反之，比值愈小，血清中红细胞免疫促进因子含量愈低，抑制因子含量愈高，红细胞免疫功能愈弱。上表中RFERRFIR的比值明显减少正常对照为5.71.2，与恶性肿瘤患者血清中红细胞免疫促进因子下降、抑制因子上升、红细胞免疫功能低下相一致。可见，测定患者血清中RFER与RFIR的比值在临床
42、上有着重要意义。 n2.2一致了阳性花环的断定规范，改原方法中一个红细胞上结合2个或2个以上酵母菌计算促进率运用以及结合3个或3个以上酵母断计算抑制率运用为一朵阳性花环，一概改为一个红细胞上结合2个或2个以上酵母菌为一朵阳性花环计算促进率与抑制率都按这个规范这样的优点是：1程序简便，节约时间和人力；2实验结果比较精细、准确，不易出现较大的误差。n2.3改室温为37，使实验结果稳定，不易受室温变化的影响，结果可靠。总之，在目前血清红细胞免疫调理因子还不能提纯，直接测定其含量还比较困难的情况下，采用郭峰创建的RFER与RFIR的测定方法，是反映红细胞自我调理功能的重要目的。该法在郭峰原法的根底上进
43、展了改良，建立了RFERR与RFIR一步测定法，有利于推行运用。 n3本卷须知n根本同红细胞C3b受体花环实验。另外对血清灭活温度的控制坚持58，作用时间固定半小时很重要。正常人O型红细胞要肝素抗凝新颖血，强调研讨组与实验组标本同批化验，用同批补体致敏酵母菌。n4意义n为红细胞免疫本身调控机理研讨提供简便有效的手段；对药物作用免疫学机理和疾病发病机理研讨以及对机体红细胞免疫功能变化分析都有其重要价值。四四 血清中血清中CRICRI免疫调理因子测定免疫调理因子测定n1981年，美国学者Siegel发现血清中存在红细胞免疫粘附抑制因子，并以为血清中存在红细胞免疫自我调控系统。1988年，郭峰发现血
44、清中还存在红细胞免疫粘附促进因子。1994年，刘景田等在 Siegel和郭峰研讨的根底在，发现血清中的调理因子不仅对红细胞上的CRI，有调理作用，而且对粒细胞(淋巴细胞主要指B淋巴细胞)上的CRI；也有同样的调理作用，并且调理幅度根本一致，故将血清中的调理因子称为CRI免疫调理因子，其中具有正调理作用者称为CRI免疫调理促进因子，具有负调理作用者称为CRI免疫调理抑制因于。 n同时在比较三种细胞的根底上，选择能长期保管、体积较大、敏感性高的粒细胞作为血清中CRI免疫调理因子测定实验用的被调理细胞，并以高效价补体致敏的酵母菌作靶细胞。其测定结果为血清中CR1免疫调理因于对粒细胞、红细胞等的免疫一
45、调理作用，该结果既能反映血清中调理因子对粒细胞上 CRI的调理作用，也可以反映对红细胞上CR1的调理作用，故此实验方法可用于血清中红细胞免疫调理因子的测定。 n一资料nHBSSH无酚红 Hanks平衡盐溶液；小牛血清；生理盐水；冻干被调理细胞及冻干高效价补体致敏Ys酵母试剂陕西省人民医院免疫研讨室消费；生物显微镜；小型离心机；普通冰箱等。n二预备实验：n1被调理细胞悬液制备：取冻干被调理细胞1支，用含1小牛血清的HBSS一H液洗2次，每次2000rmin离心8min，用HBSSH恢复体积0.35ml使其浓度为1x 107ml细胞悬液备用。2补体致敏高效价Ys酵母茵悬液制备：取冻干高效价补体致敏
46、Ys酵母试剂1支，用生理盐水洗2次，恢复体积0.35ml，使其浓度为6X 107ml悬液备用。n正式实验：n取58灭活及末灭活血清各0.lml，参与灭活管与末灭活管，另设对看管加生理盐水0.lml，每管分别加被调理细胞悬液10l混匀，3730min孵育，取出后用含1小牛血清HBSSH洗2次，弃去上清液，再加高效价补体致敏酵母菌悬液10l，混匀，3730min孵育，混匀，加 0.25戊二醛 1滴，混匀，置室温 510min，程度抹片，自然枯燥，瑞氏染色，高倍镜检，以被调理细胞上结合3个以上酵母菌为一朵阳性花环，计数200个被调理细胞，求阳性花环率，按以下公式计算CR1免疫调理促进因子对C3bRR
47、的促进率和CR1免疫调理抑制因子对C3bRR的抑制率。58灭活管花环率盐水对看管花环率对看管花环率促进率=100%58灭活管花环率未灭活管花环率58灭活管花环率抑制率=100%表2-2操作程序灭活管末灭活管对照组58灭活血清（ml）未灭活血清（ml）生理盐水（ml）被调节细胞（ml）0.1/0.01/0.1/0.01/0.10.01混匀，3730min孵育，洗2次 补体致酵母菌（ml）0.010.010.01混匀，3730min孵育，加0.25%戊二醛1滴，水平抹片，自然干燥，瑞氏染色，高倍镜，求阳性率三被调理细胞的比较表2-3 被调理细胞的比较 O型RBC 粒细胞 大小瑞氏染色镜下观察敏感度
48、保存方法、时间6-9m，平均7.2m红色片子厚，底色暗，不易辨别低在4ACD保存液中可保持三天，不能经冷冻干燥保存1013m紫红色底色干净，清晰易辨别高加细胞膜稳定剂在4可保存5天，经冷冻干燥活性可保存一年以上n四临床运用n采用上述试剂和实验方法，对60例安康人、30例乙肝患者HBsAg、HBeAg和抗HBc阳性患者、30例恶性肿瘤肺癌9例、胃癌 14例、肝癌7例、17例骨折患者、11例急性肾炎，共148例患者的血清标本进展检测，其结果如下表：表2-4不同人群CR1免疫调理团子检测结果X士 S*与对照组相比，P0.05；*与对照组相比，P0.1n促进率抑制率乙肝患者恶性肿瘤创伤（骨折）组急性肾
49、炎健康献血员303017116074.117.4 * *72.0515.8 * *96.618.2* *157.032.6*144.128.161.414.3* *68.516.8* *56.212.2* *25.17.1*31.956.7n从上表可以看出，恶性肿瘤、乙肝患者和创伤骨折患者红细胞免疫调理功能与安康人比较，其促进率明显下降p0.05，抑制率明显升高p0.05，急性肾炎患者促进率升高而抑制率下降P0.05，与国内外报道根本一致，阐明用粒细胞作被调理细胞来检测血清中的调理因子对红细胞上CR；的调理作用是完全可行的。n五本卷须知n1冻干试剂用少量盐水反复冲洗干净，离心时防止细胞丧失，恢
50、复体积后计数。n2溶解后未用的试剂，被调理细胞置4冰箱四天内效价不变，高效价补体致敏酵母试剂置冰盒内一周内效价不变。n3其它本卷须知同红细胞C3b受体花环试额n六意义：同红细胞免疫调理因子测定。 国外有关红细胞国外有关红细胞CR1CR1研讨研讨的几种测定方法的几种测定方法n红细胞的免疫粘附作用是经过细胞膜上的I型补体受体CR1；或C3b受体来实现的。目前国内外对CR1的研讨很多。现将国外有关红细胞CR1研讨的几种实验方法引见如下：nl红细胞-红细胞花环实验(Red CellRed Cell Rosette):即Siegel初次提出的规范RICA实验。人红细胞采用EDTA抗凝血绵羊红细胞予先用成
51、人血清在21作用60分钟。一切细胞均用改良 Hanks液洗三遍配成所需浓度。实验时在试管中参与 2的人红细胞0.1ml，2的抗体予处置过的绵羊红细胞0.1ml，再加0.0100.025ml 1：5稀释的人脐血清作补体来源。n混合后即取一滴置载玻片上，上加盖片，室温2023作用20分钟，相差显微镜下随机计数100个人红细胞，以粘附至少一个羊红细胞为阳性，算出百分率。由于人红细胞平均直径78m，而羊红细胞只需45m，两者相差近一半，故镜下不难区别。n 2 免 疫 粘 附 血 凝 实 验 immune adherence haemagglutination IAHA：用人混合血清经盐析和二乙胺乙基纤
52、维素层析得到人IgG。-70保管。用时溶于磷酸缓冲液，65加热30分钟，冰水冷却，15000g离心15分钟。取上清为人聚合丙种球蛋白AHG。在U型微滴定板上将AHG系列倍比稀释原始浓度100gml每孔25l，再加等量补体，37作用45分钟，参与二硫基苏糖醇溶液固定。 n然 后 将 待 测 红 细 胞 用 EDTA-GVB配 成 2108ml，取25l参与各孔，置 24下60分钟后察看结果。IgG聚合后暴显露 C3b结合点与补体C3b结合，参与苏糖醇固定使 C3b不被降解，可与红细胞外表C3b受体结合而致红细胞凝集。以发生血凝的AHG的最高稀释度的倒数为 IAHA的效价，表示 C3b受体的活性，
53、此法敏感性与特异性均高。 n 3 血 吸 附 法 Haemadorption technique，HA：待测红细胞用 PBS洗三遍，3000xg离心作成集块，液氮速冻，切成 6-8m厚的切片，置盖玻片上。用兔抗羊红 IgM抗体致敏羊红细胞、加血清37作用10分种，构成抗原抗体补体复合物，洗过二遍用GVB配成1的悬液作指示细胞。n在微培育载片的凹孔中加满指示细胞，盖上覆有红细胞切片的盖片，使切片正好位凹孔中央，颠倒载片使指示细胞下沉到红细胞切片上，室温置30分钟再倒回来，使未结合的指示细胞分开玻片。结果断定以待测红细胞严密结合一层指示细胞为3+，部分覆盖指示细胞为2+，散在结合为+，没有血吸附景
54、象-，该法比血凝法更敏感。 n4放射免疫测定法Radiohomunoassay，RIA：根据放射性同位素标志部位不同有几种方法。n放射碘标志抗人IgG抗体法：将一定浓度的待测红细胞、AHG和人补体置37共同作用30分钟，使AHG经过补体C3b结合到红细胞膜C3b受体上，洗涤过后再参与碘标志的兔抗人IgG，4作用30分钟，使碘标抗体结合到AHG上，然后将红细胞洗过，测其放射性，结果用待测红细胞吸收的放射碘标志抗人 IgG量与正常人红细胞吸收量之比的平均值表示。 n放射碘标志Fab2法：静脉抗凝血红细胞0下洗过配成一定浓度，加人125碘标志的非免疫 Fab2或125碘标志的抗 C3b受体 Fab2
55、，20作用 60分钟，各取 0.075ml参与含0.3ml邻苯二甲酸二丁酯的微量离心管中，8000g离心30秒，切断离心管，管中沉淀和上清液分别含结合与未结合的抗体。抗 C3b受体的 Fab2结合量减去非免疫Fab2结合量，得出特异结合量，按Scatchard法算出每个红细胞抗原饱和量。 n放射碘标志二聚体 C3b法：将一定浓度的红细胞与125碘标志的二聚体 C3b单独或加0.2mg非标志的抗C3b受体Fab2，0共育20分钟，再用上述微量沉淀法别分开结合与未结合的配体，未加抗体管的结合量减去加人抗C3b受体Fab2管的结合量，那么为特异结合量，再按scatchard法计算出红细胞结合C3b的
56、量。n放射碘标志抗人C3b受体单抗法：用纯化人红细胞CR1免疫小鼠取鼠脾细胞与浆细胞瘤细胞交融，消费抗 CR1的单克隆抗体。用125碘标志单抗加待测红细胞 37作用 30分钟，取50l参与微量离心管，8000g离心30秒，切去顶部，于 r计数器内测定放射量，算出红细胞外表受体数。或将红细胞溶解后取二个稀释度的提取物参与包被C3b的塑料板孔内。37作用 2小时，洗过后加125碘标志的抗 CR1单抗，置室温 1小时，洗过后切开，计数仪测放射量，再由纯化CR1所作的规范曲线中，求得红细胞提取物的受体量。该法特异性强。n 5 间 接 血 凝 法 indirect heamagglutination t
57、echwue， IHA：用 PBS将鼠抗 CR1单克隆抗体对倍稀释参与等量5待测红细胞悬液， 4作用 1小时，然后将微滴定板倾斜使其近乎垂直约10分钟。未凝集的红细胞那么象泪滴一样地流出来，而凝集的红细胞那么粘附在孔底，结果以能引起凝集的抗CR1抗体的最高稀释度表示。该法防止了普通单抗法放射标志的过程。n 6 酶 联 免 疫 吸 附 实 验 EmpmeLinked Immunosorbent Assay，ELISA：取100lPLL(聚-L-溶素)参与平底聚苯乙烯96孔微滴定板的各孔中，20下孵育30分钟，翻过板来倒空，用吸水纸反复吸净。待测红细胞用PBS洗过三遍配成悬液，取100l同时加人四
58、孔中每孔约 5 106个细胞，室温置 30分钟。再加 0.l的戊二醛 PBS溶液100l ，22放置 30分钟。弃去戊二醛，加 200l PBS，3分钟后倒空，吸水纸吸，反复洗三遍。 n再加1小牛血清250l 22作用60分钟，洗三遍将未结合血清冲掉。然后取100l PBSl:100稀释的鼠抗人C3b受体单克隆抗体加人各孔，22孵育60分钟，洗三次，碱 性 磷 酸 酶 结 合 的 兔 抗 鼠 IgG， 用PBSl:100稀释，取100l参与各孔，22孵育60分钟，再洗三次最后将200l新配制的底物溶液加人各孔反响60分钟，每孔取150l反响产物置另一板的相应孔中，在405um测吸光度。该法不需
59、求同位素标志，也防止了大试管ELISA法底物使红细胞溶解的缺陷。 n 7 流 式 细 胞 仪 测 定 法 Folwcytometric assay，FCA：待测红细胞用 1%小牛血清磷酸盐缓冲液PBCFCS洗三遍，然后再配成0.51.5x 108ml的悬液。取10l加鼠抗人单克隆抗体50l5.5ugml冰育 40分钟。再用2ml的PBC.FCS洗两遍，加荧光素异硫氰酸盐FITC标志的兔抗鼠免疫球蛋白F23430ll20稀释，或者加150稀释的FITC标志的兔抗大鼠免疫球蛋白F23430l冰浴30分种，洗二遍。n用0.5的多聚甲醛盐水溶液 800l将红细胞重新混悬及固定。鼠抗人CD8、鼠抗人生长
60、激素、正常鼠血清或二级抗体可单独用作对照用流式细胞仪检测24小时内标志的红细胞2000个。红细胞CR1程度用中位荧光频道MFCN表示。该法结果准确。n8除上述方法外，还可根据红细胞膜上C3b受体在血清I因子灭活C3b时起辅因子的作用采用酶活性测定法Enzymic assay， EA：将人 C3b分别出来用125碘标志，参与固定浓度的I因子，再加人待测红细胞或红细胞膜的提取物，37下共同作用一段时间，中止反响后，用SDS聚丙烯酸胺凝胶电泳，用放射照相术察看凝胶上碘标蛋白的裂解图像，然后将凝胶切成小条测其放射性。经过丈量C3b的链位置上放射性与凝胶总放射活性之比，可得出C3b降解的程度，从而推断红
61、细胞膜上 C3b受体的活性。红细胞免疫在临床运用的研讨红细胞免疫在临床运用的研讨 n红细胞免疫开展的显著特点，就是人们在注重红细胞免疫根底实际和实验方法研讨的同时，也注重了临床运用的研讨，将红细胞免疫与临床各科疾病严密地结合起来。从目前已报导的资料来看，临床上大部分和红细胞免疫功能有关。如本身免疫性疾病、肿瘤、传染病、变态反响病、老年病、内分泌系统疾病等，以及外伤、创伤、感染、温度、血液库存时间等要素均可导致红细胞免疫功能的变化。郭峰将临床疾病红细胞免疫功能的变化分为三个类型： n1代偿性红细胞免疫功能缺陷或继发性红细胞免疫功能缺陷：n其表现为红细胞C3b受体花环率下降，红细胞免疫复合物花环率
62、升高，血清中红细胞免疫促进因子RFER含量下降或变化不显著，红细胞免疫抑制因子RFIR含量升高，肿瘤红细胞花环率NTER、DTER、ETER、ATER普通都有下降，如肿瘤、传染病等患者的红细胞免疫功能表现。n2 失代偿红细胞免疫功能缺陷或原发性红细胞免疫功能缺陷：n其表现为红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率均下降，如少数SLE、PNH、慢性化脓性骨髓炎等患者的红细胞免疫功能表现。 n3红细胞免疫功能紊乱与亢进：n 其表现为红细胞C3b受体花环率升高，红细胞免疫复合物花环率亦升高或变化不显著。如硬皮病、原发性癫痫、银屑病等患者的红细胞免疫功能表现。n临床疾病红细胞免疫的研讨，在疾病发
63、病机理的讨论、疗效察看、判别预后和诊断上都有重要价值，尤其在普查、挑选、早期发现恶性肿瘤方面有重要意义。在治疗上，运用胸腺素、转移因子、IL-2、-干扰素以及多糖类中药等都可提高红细胞免疫功能，促进机体恢复正常。制备LAK细胞有意将红细胞参与，可提高LAK细胞的产量和活性。从细胞中提取SOD酶，制成商品已运用于抗衰老，加强机体免疫功能上。dOgSjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr%u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F
64、7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjUmYp!t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQip!
65、t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUlXp#w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+A2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaL
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