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1、食品微生物食品微生物检测基础检测基础食品微生物简介食品微生物简介v微生物的概念微生物的概念v微生物包括的种类微生物包括的种类v病原微生物的概念病原微生物的概念v微生物的特性微生物的特性v细菌的基本形态和结构细菌的基本形态和结构微生物的定义：微生物的定义：是一群形体细小、结构简单、是一群形体细小、结构简单、人肉眼看不见，必须借助于光人肉眼看不见，必须借助于光学显微镜、电子显微镜放大几学显微镜、电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能百倍、几千倍甚至几万倍才能看到的生物。看到的生物。微生物包括微生物包括细菌、放线菌、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、螺旋菌、酵母菌、霉菌、螺旋菌、立克次氏体、衣原体、病
2、立克次氏体、衣原体、病毒及微藻类等。毒及微藻类等。病原微生物定义：病原微生物定义：大部分微生物是有益的，只大部分微生物是有益的，只有小部分微生物是有害的，有小部分微生物是有害的，可以引起各种疫病，这部分可以引起各种疫病，这部分微生物叫做病原微生物微生物叫做病原微生物微生物的特性微生物的特性v1个体微小，结构简单个体微小，结构简单v2分布广，种类多分布广，种类多v3繁殖快，数量大繁殖快，数量大v4易于变异，适应力强易于变异，适应力强v5易于培养，代谢活力强易于培养，代谢活力强细菌的基本形态和结构细菌的基本形态和结构细菌是一种具有细胞壁的单细胞生物细菌是一种具有细胞壁的单细胞生物.细菌的大小以微米
3、（细菌的大小以微米（m）为测量单位）为测量单位（一微米等于千分之一毫米）。（一微米等于千分之一毫米）。根据细菌形态一般分为球菌、杆菌、螺根据细菌形态一般分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类。旋菌三大类。细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细细菌具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、核糖体和内含物等基本结构。胞核、核糖体和内含物等基本结构。细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛、细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。芽孢等。食品微生物检测所涉及的类群食品微生物检测所涉及的类群微生物微生物非细胞生物非细胞生物细胞生物细胞生物病毒病毒原核生物原核生物真核生物真核生物细菌细菌酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌微生物检测程序微生
4、物检测程序v 样品的采集样品的采集v注意：注意：v1所用接触样品的用具所用接触样品的用具经过灭菌经过灭菌v2取样要均匀、特殊样取样要均匀、特殊样品要控制温度品要控制温度v3样品采好后要贴上标样品采好后要贴上标签（注明：样品名称、签（注明：样品名称、来源、数量、采样人、来源、数量、采样人、地点及时地点及时间）间）v样品的微生物检样品的微生物检验验v注意：注意：v1采好的样品送检不采好的样品送检不要超过要超过3小时小时v2检完的样品的存放检完的样品的存放时间时间v3报告的填写报告的填写菌落总数的测定菌落总数的测定首先要明白菌落的定义。首先要明白菌落的定义。菌落的定义：菌落的定义：将细菌划线接种在固
5、体培养将细菌划线接种在固体培养基上经基上经18 24小时培养，长出肉眼可见的小时培养，长出肉眼可见的有单一细菌生长繁殖而成的细菌集团。有单一细菌生长繁殖而成的细菌集团。菌落总数：菌落总数：食品检样经过处理，在一定条食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得件下培养后，所得1ml（g）检样中所含菌）检样中所含菌落的总数。落的总数。1、设备和材料：、设备和材料：（见书（见书151页）页）2、培养基和试剂：、培养基和试剂：营养琼脂营养琼脂75乙醇乙醇稀释剂：稀释剂：0.85生理盐水生理盐水菌落总数的检验程序菌落总数的检验程序25g(ml)样品样品+225ml生理盐水生理盐水(1:10的稀释液的稀释液
6、)作几个适当倍数的稀释液作几个适当倍数的稀释液(例如例如1:100，1:1000)选择选择23个适宜稀释度个适宜稀释度各取各取1ml分别加入灭菌培养皿中分别加入灭菌培养皿中每个平皿中加适量（每个平皿中加适量（1520ml）营养琼脂营养琼脂菌落记数菌落记数 （二）菌落计数方法（二）菌落计数方法做平板菌落计数，用肉眼观察，必要做平板菌落计数，用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，记下各平板菌时用放大镜检查，以防遗漏，记下各平板菌落数后，求出同稀释度的各个平板平均菌落落数后，求出同稀释度的各个平板平均菌落数。数。 （三）菌落计数的报告（三）菌落计数的报告1、平板菌落数的选择、平板菌落数的选择选取
7、菌落数在选取菌落数在30300之间的平板作为之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数。板，应采用两个平板平均数。2、稀释度的选择（见下表）、稀释度的选择（见下表）例次例次稀稀释液及释液及菌菌落落数数两稀释两稀释液之比液之比菌落总数菌落总数（个（个/g或个或个ml）报告方式报告方式（个（个/g或或ml）10-1 10-210-31多不可计多不可计164201640016000或或1.61042多不可计多不可计295461.6377503800038000或或3.8103.8104 43多不可计多不可计271602.2271
8、002700027000或或2.7102.7104 44多不可计多不可计多不可计多不可计313313000310000310000或或3.0103.0105 5527115270270270或或2.7102.7102 26000110 10107多不可计多不可计30512305003100031000或或3.1103.1104 4三、菌落数的报告三、菌落数的报告1、菌落数在、菌落数在100以内的按其实有数报告。以内的按其实有数报告。2、菌落数大于、菌落数大于100的采用两位有效数字，的采用两位有效数字，有效数字后面的数值采用四舍五入计算。有效数字后面的数值采用四舍五入计算。3、结果也可以用、结
9、果也可以用10的指数表示。的指数表示。注意事项：注意事项：v1操作要在无菌的状态下进行。操作要在无菌的状态下进行。v2操作时间越短越好。操作时间越短越好。v3样品不同选择的稀释倍数不同。样品不同选择的稀释倍数不同。v4培养基冷却温度不宜过高或过低。培养基冷却温度不宜过高或过低。霉菌和酵母菌的计数霉菌和酵母菌的计数1、设备和材料：、设备和材料：（同细菌总数测定）（同细菌总数测定）2、培养基和试剂：、培养基和试剂：孟加拉红培养基孟加拉红培养基灭菌蒸馏水灭菌蒸馏水霉菌和酵母菌的检测程序霉菌和酵母菌的检测程序25g(ml)样品样品+225ml无菌水无菌水作几个适当倍数的稀释液作几个适当倍数的稀释液选择
10、选择3个适宜稀释度，各个适宜稀释度，各以以1ml的量加入灭菌平皿内的量加入灭菌平皿内每个平皿内加入适量每个平皿内加入适量培养液约培养液约20ml左右左右菌落计数菌落计数菌落计数及报告：菌落计数及报告：1、选择菌落数在、选择菌落数在10150之间的平板进行菌落计之间的平板进行菌落计数。数。2、其他同菌落总数一样。、其他同菌落总数一样。注意事项：注意事项：1、培养温度是在、培养温度是在2528，培养时间是，培养时间是5天。天。2、在往平皿中加培养基时应多加一些。（当、在往平皿中加培养基时应多加一些。（当培养基自然漫过平皿底部时再多加一点）培养基自然漫过平皿底部时再多加一点）大肠菌群的测定大肠菌群的
11、测定一、大肠菌群一、大肠菌群MPN的概念及意义的概念及意义大肠菌群系指一群在大肠菌群系指一群在3724小时能发小时能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以次作为粪便指标来评价食品的卫粪便，故以次作为粪便指标来评价食品的卫生质量，具有广泛的卫生学意义。生质量，具有广泛的卫生学意义。培养基和试剂：培养基和试剂：乳糖胆盐发酵管乳糖胆盐发酵管伊红美蓝琼脂平板伊红美蓝琼脂平板乳糖发酵管乳糖发酵管生理盐水生理盐水革兰氏染色液革兰氏染色液大肠菌群的检验程序：大肠菌群的检验程序： 注意
12、事项：注意事项：1.乳糖胆盐发酵管和乳糖发酵管在灭菌以乳糖胆盐发酵管和乳糖发酵管在灭菌以后要检查小导管内有无气泡后要检查小导管内有无气泡,如果有气泡就如果有气泡就不能再用了。不能再用了。2.计算产气管的数量时以乳糖发酵管产气计算产气管的数量时以乳糖发酵管产气管的数量为准。管的数量为准。3.从伊红美蓝琼脂平板上挑细菌接种乳糖从伊红美蓝琼脂平板上挑细菌接种乳糖发酵管和进行革兰氏染色时一定要挑取典发酵管和进行革兰氏染色时一定要挑取典型菌落，无典型菌落时要多挑几个菌落。型菌落，无典型菌落时要多挑几个菌落。实验室生物安全实验室生物安全基本知识基本知识微生物实验室玻璃器皿的准备微生物实验室玻璃器皿的准备一
13、、洗涤一、洗涤载玻片和盖玻片在清洗前可先在载玻片和盖玻片在清洗前可先在2%盐酸溶液盐酸溶液中浸泡中浸泡1h。二、灭菌前的准备二、灭菌前的准备制作棉塞制作棉塞包扎器皿包扎器皿灭菌灭菌微生物培养基的制备微生物培养基的制备v培养基的定义：是根据细菌的生长需要培养基的定义：是根据细菌的生长需要人工配置的营养环境。人工配置的营养环境。v按物理性状分类可分为液体、半固体、按物理性状分类可分为液体、半固体、固体培养基。固体培养基。v按用途分类可分为基础培养基、营养培按用途分类可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。培养基。称出一定量粉状培养基称出一
14、定量粉状培养基加适量的水溶解加适量的水溶解分分装装灭菌灭菌检定检定保存保存消毒与灭菌消毒与灭菌v一、干热灭菌法一、干热灭菌法1.火焰灭菌（酒精灯）火焰灭菌（酒精灯）2.干热灭菌（电热干燥箱）干热灭菌（电热干燥箱）v二、湿热灭菌法二、湿热灭菌法1.煮沸消毒煮沸消毒2.流通蒸汽灭菌流通蒸汽灭菌3.巴氏消毒巴氏消毒4.加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅）加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅）消毒灭菌的基本概念v1.灭菌：杀灭物体中所有微生物的繁殖体和灭菌：杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽胞的方法。芽胞的方法。v2.消毒：杀死病原微生物的方法。消毒：杀死病原微生物的方法。v3.防腐：防止或阻止微生物生长繁殖的方法。防腐
15、：防止或阻止微生物生长繁殖的方法。v4.无菌：不含有活的微生物的意思。无菌：不含有活的微生物的意思。v5.无菌技术（无菌操作）：防止微生物进入无菌技术（无菌操作）：防止微生物进入机体或物体的方法。机体或物体的方法。显微镜的构造显微镜的构造 A、机机械械部部分分：显显微微镜镜的的机机械械装装置置是是显显微微镜镜的的重重要要组组成成部部分分。机机械械装装置置的的作作用用是是固定及调节光学镜头，固定与移动标本等。固定及调节光学镜头，固定与移动标本等。 只只有有良良好好的的机机械械装装置置，显显微微镜镜才才能能充充分分发发挥挥作作用用。显显微微镜镜的的机机械械装装置置由由各各种种精精密密零件组成。零件
16、组成。 （1）镜座：它是显微镜的底座，一般）镜座：它是显微镜的底座，一般为马蹄形，作用是支撑整个显微镜。有的显为马蹄形，作用是支撑整个显微镜。有的显微镜座内装有照明光源和反射镜。微镜座内装有照明光源和反射镜。 （2）镜镜柱柱：联联系系于于镜镜座座和和镜镜臂臂之之间间，有支持显微镜其他部分的作用。有支持显微镜其他部分的作用。 （3）镜镜臂臂：一一般般为为弯弯柄柄形形，拿拿取取显显微微镜镜时时握握此此臂臂。镜镜臂臂与与镜镜柱柱之之间间有有关关节节相相连连，可可以以作作适适当当的的倾倾斜斜，以以便便观观察察。有有些些显显微微镜镜的的镜镜臂臂与与镜镜柱柱之之间间没没有有关关系系，不不能能做做任任何何角
17、角度度的的倾倾斜斜。镜镜臂臂有有持持镜镜筒筒、镜镜台台、照照明明装装置置及调节焦距装置等作用。及调节焦距装置等作用。 （4）调节器：为了得到清晰的物象，必须调）调节器：为了得到清晰的物象，必须调节物镜和标本之间的距离，使它与物镜的工作距离节物镜和标本之间的距离，使它与物镜的工作距离相等。这种操作叫做调焦。在镜臂上方（各镜位置相等。这种操作叫做调焦。在镜臂上方（各镜位置不一样，有的一个在上方，一个在下方），有大小不一样，有的一个在上方，一个在下方），有大小两种螺旋，一般向前方转动时，镜筒下降，向后方两种螺旋，一般向前方转动时，镜筒下降，向后方转动时镜筒上升；但也有显微镜，转动时镜柱下降；转动时镜
18、筒上升；但也有显微镜，转动时镜柱下降；也有些显微镜在转动螺旋时，镜筒不变，而镜台上也有些显微镜在转动螺旋时，镜筒不变，而镜台上下升降。下升降。 。大大螺螺旋旋（粗粗调调节节）可可使使镜镜筒筒作作较较大大距距离离和和较较快快速速度度的的上上升升或或下下降降，通通常常在在使使用用低低倍倍镜镜时时，用大螺旋调节，能迅速找到物景。用大螺旋调节，能迅速找到物景。小小螺螺旋旋（细细调调节节）可可使使镜镜筒筒缓缓慢慢地地上上升升或或下下降降，可以作精细的调节，使物象更加清晰。可以作精细的调节，使物象更加清晰。 此此外外，在在镜镜柱柱附附近近还还有有一一个个聚聚光光镜镜螺螺旋旋，可以使聚光镜上升或下降可以使聚
19、光镜上升或下降 （5）镜镜筒筒：镜镜筒筒是是由由金金属属制制成成的的圆圆筒筒，上上端端放放置置目目镜镜，下下端端连连接接物物镜镜。镜镜筒筒内内壁壁，为为了了避避免免光光线线的的乱乱反反射射，喷喷上上黑黑色色无无光光漆漆。筒筒长长度度一一般般为为155250毫毫米米，常常用用的的为为160或或170毫毫米米。国国产产显显微微镜通常是镜通常是160毫米。毫米。 （6）物物镜镜转转换换器器（回回转转盘盘）：固固定定在在镜镜筒筒下下端端。它它有有34个个物物镜镜螺螺旋旋口口，呈呈盘盘状状。根根据据需需要要放放大倍数不同，可调换不同放大倍数的物镜镜头。大倍数不同，可调换不同放大倍数的物镜镜头。 （7）载
20、物台：也叫工作台或镜台。它）载物台：也叫工作台或镜台。它的作用是安放载玻片。载物台中心有一个通的作用是安放载玻片。载物台中心有一个通光孔，通光孔后方左右侧各有一个安装片夹光孔，通光孔后方左右侧各有一个安装片夹用的小孔。载物台由上下两片组成，上面一用的小孔。载物台由上下两片组成，上面一片装有旋钮，可向左右移动；下面一片通过片装有旋钮，可向左右移动；下面一片通过旋钮可使上面一片前后移动。旋钮可使上面一片前后移动。 载物台的纵横坐标都装有游标尺，既载物台的纵横坐标都装有游标尺，既能固定标本，又能使之前后移动，以便寻找能固定标本，又能使之前后移动，以便寻找物象。物象。 B、光学部分：、光学部分： （1
21、）目目镜镜：因因为为它它靠靠近近观观察察者者的的眼眼睛睛，因因此此也也叫叫接接目目镜镜。目目镜镜安安装装在在镜镜筒筒的的上上端端。各各种种目目镜镜的的口口径径尺尺寸寸都都是是统统一一的的，根根据据需需要要可可以以互互换换使使用用。目目镜镜只只起起放放大大的的作作用用，并并不不增增强强显显微微镜镜的的分分辨辨力力。一一般有般有24个，放大功率各不相同。个，放大功率各不相同。 镜镜的的圆圆筒筒上上面面刻刻有有放放大大率率，如如5、7、10、15等等符符号号可可以以区区别别。数数字字越越大大，放放大大率率越越高高，使使用时可根据需要。用时可根据需要。 （2）物镜：因为它靠近被观察的物体（标本）物镜：
22、因为它靠近被观察的物体（标本），因此也叫接物镜。许多使用者在口语上把物，因此也叫接物镜。许多使用者在口语上把物镜和目镜都通俗地叫做镜头。物镜安装在镜筒镜和目镜都通俗地叫做镜头。物镜安装在镜筒的下端，它的作用是将标本第一次放大，然后的下端，它的作用是将标本第一次放大，然后再由目镜将第一次放大的象做第二次放大。再由目镜将第一次放大的象做第二次放大。 物物镜镜是是决决定定显显微微镜镜性性能能的的最最重重要要部部位位，一一般般有有24个个，放放大大率率也也各各不不相相同同。镜镜的的圆圆筒筒上上面面有有放放大大率率如如4或或10（低低倍倍镜镜）、45（高高倍倍境境）、100（油油镜镜）等等符符号号。有有
23、些些显显微微镜镜的的物物镜镜上上还还刻刻有有镜镜口口率率，如如、等等符符号号，这这些些符符号号的的数数字越大，放大率越高。字越大，放大率越高。 一般计算显微镜的放大倍数是：一般计算显微镜的放大倍数是： 目目镜镜的的放放大大率率物物镜镜的的放放大大率率显显微微镜的放大倍数。镜的放大倍数。 例例如如，目目镜镜的的放放大大率率为为10，物物镜镜的的放放大率为大率为45，这时显微镜的放大倍数为，这时显微镜的放大倍数为450。 （3）聚光器：是由一片或数片透镜组）聚光器：是由一片或数片透镜组成。其作用相当于凸透镜，起聚光线作用。成。其作用相当于凸透镜，起聚光线作用。装在镜台下面，这样就能增强标本的照明，
24、装在镜台下面，这样就能增强标本的照明，同时能使光线射入整个物镜镜口角。为了充同时能使光线射入整个物镜镜口角。为了充分发挥显微镜的性能，在使用时聚光镜和物分发挥显微镜的性能，在使用时聚光镜和物镜两者的数值孔径应相一致。镜两者的数值孔径应相一致。 在在使使用用高高倍倍境境时时，必必须须配配以以聚聚光光镜镜，并并且且要要求求聚聚光光镜镜和和物物镜镜口口率率一一致致，效效果果最最好好。聚聚光光镜镜的的镜镜口口率率可可用用光光圈圈来来调调节节，有有些些显显微微镜镜的的光光圈圈上上刻刻有有口口径径的的记记号号。使使用用某某种种高高倍倍境时，只有对准相应刻度即可。境时，只有对准相应刻度即可。 （4）光圈：也
25、叫可变光圈，位于聚光）光圈：也叫可变光圈，位于聚光镜下方，由十几张金属薄片组成，中心部分镜下方，由十几张金属薄片组成，中心部分形成圆孔。推动光圈的把手，可以随意调节形成圆孔。推动光圈的把手，可以随意调节圆孔的大小，有的光圈的边框上还刻有标明圆孔的大小，有的光圈的边框上还刻有标明圆孔直径的尺寸。圆孔直径的尺寸。 （5）反反光光镜镜：反反光光镜镜通通常常一一面面是是平平面面镜镜，另另一一面面是是凹凹面面镜镜，装装在在聚聚光光镜镜下下面面的的镜镜座座上上，可以水平与垂直两个方向任意旋转。可以水平与垂直两个方向任意旋转。 反反光光镜镜的的作作用用是是使使光光源源发发出出的的光光线线或或天天然然光光射射
26、向向聚聚光光器器。在在自自然然光光线线下下，常常用用平平面面镜；在室内日光灯下，常用凹面镜。镜；在室内日光灯下，常用凹面镜。 革兰氏染色革兰氏染色第一步：制片第一步：制片在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成悬液并挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成悬液并涂成直径为涂成直径为1厘米的薄层。若材料为液体培养物或固体培养厘米的薄层。若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可。物中洗下制备的菌液，则直接涂布于载玻片上即可。第二步：自然干燥第二步：
27、自然干燥第三步：固定第三步：固定手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来回通过回通过3-4次，共约次，共约2-3秒钟，并不时以载玻片背面加热触及秒钟，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得过烫为宜（不超过皮肤，不觉得过烫为宜（不超过60），放置待冷后，进），放置待冷后，进行染色。行染色。第四步：染色第四步：染色1.初染（结晶紫）初染（结晶紫）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。2.媒染（碘液）媒染（碘液）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。3.脱色（脱色（95%酒精）酒精）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。4.
28、复染（沙黄复染液）复染（沙黄复染液）2-3滴一分钟然后水洗。滴一分钟然后水洗。第五步：干燥第五步：干燥第六步：镜检第六步：镜检革兰氏革兰氏阳性阳性菌被染成菌被染成紫色紫色，革兰氏革兰氏阴性阴性菌被染成菌被染成红色红色。练习题练习题v1、高压蒸汽灭菌时，当压力达高压蒸汽灭菌时，当压力达15磅，温度磅，温度121时，时，维持时间维持时间()。A、10分钟分钟B、20分钟分钟C、30分钟分钟D、25分钟分钟v2、在革兰氏染色时草酸铵结晶紫滴加在已固定的在革兰氏染色时草酸铵结晶紫滴加在已固定的涂片上染色，一般染涂片上染色，一般染()，用水洗去。，用水洗去。A、半分钟、半分钟B、1分钟分钟C、分钟、分钟
29、D、2分钟分钟v3、鞭毛是细菌的鞭毛是细菌的()器官。器官。A、捕食、捕食B、呼吸、呼吸C、性、性D、运动运动v4、真菌繁殖的主要特征是（、真菌繁殖的主要特征是（）。）。A、隔壁、隔壁B、孢子、孢子C、细胞壁结构、细胞壁结构D、营养类型、营养类型v5、球菌在一个平面上连续分裂后，连成三个或三个以上的、球菌在一个平面上连续分裂后，连成三个或三个以上的或长或短的链状，这种细菌称（）或长或短的链状，这种细菌称（）A、葡萄球菌、葡萄球菌B、双球菌、双球菌C、链球菌、链球菌D、四联球菌、四联球菌v6、细菌的君体繁殖过程可分为四期，其中细菌体积增大，、细菌的君体繁殖过程可分为四期，其中细菌体积增大，代谢活
30、跃，但细胞分裂缓慢，此阶段称（）。代谢活跃，但细胞分裂缓慢，此阶段称（）。A、迟缓期、迟缓期B、对数生长期、对数生长期C、稳定期、稳定期D、哀退期、哀退期v7、固体培养基理想的凝固剂是（）。、固体培养基理想的凝固剂是（）。A、琼脂、琼脂B、明胶、明胶C、血清、血清D、海藻酸钠、海藻酸钠v8、杀死物体中病原微生物的方法，叫（、杀死物体中病原微生物的方法，叫（）。）。A、消毒、消毒B、无菌、无菌C、防腐、防腐D、抑菌、抑菌v9、对微生物影响的物理因素包括（）。、对微生物影响的物理因素包括（）。A、温度、干燥、温度、干燥B、干燥、渗透压、干燥、渗透压C、温度、辐射、温度、辐射D、B+Cv10、VP试
31、验阳性，呈（）色。试验阳性，呈（）色。A、红、红B、绿、绿C、黄、黄D、褐褐v11、革兰氏染色液的第一液是（、革兰氏染色液的第一液是（）。）。A、碘液、碘液B、结晶紫、结晶紫C、95乙醇乙醇D、石碳酸复红石碳酸复红v12、载玻片和盖玻片在清洗前可先在（、载玻片和盖玻片在清洗前可先在（）溶洗中）溶洗中浸泡浸泡1h。A、2的盐酸的盐酸B、8盐酸盐酸C、2的的NaOHD、6NaOHv13饮料作沙门氏菌检验时，需前增菌时间是饮料作沙门氏菌检验时，需前增菌时间是()。(A)4h(B)6h(C)1216h(D)1824h14、采用高压蒸汽灭菌时，一般选用（、采用高压蒸汽灭菌时，一般选用（）。）。A、121
32、20minB、10030minC、11515minD、11020minv15、冰棒检验取样前，操作人员应（、冰棒检验取样前，操作人员应（）A、用、用95的酒精棉球擦手的酒精棉球擦手B、用、用75的酒精棉球擦手和容器口周圈的酒精棉球擦手和容器口周圈C、用、用65的酒精棉球擦容器口周围的酒精棉球擦容器口周围D、用酒精灯烤容器口周围、用酒精灯烤容器口周围v16、溶血性链球菌在血清肉汤中生长时，管中的现溶血性链球菌在血清肉汤中生长时，管中的现象是象是()。A、块状沉淀、块状沉淀B、絮状或颗粒状沉淀、絮状或颗粒状沉淀C、均匀、均匀生长生长D、混浊、混浊v17、尿素酶试验阳性呈尿素酶试验阳性呈()色。色。
33、A、黑、黑B、红、红C、绿、绿D、兰、兰v18、琼脂，属琼脂，属()培养基。培养基。A、营养、营养B、鉴别、鉴别C、选择、选择D、基础、基础v19革兰氏染色阳性细菌，在显微镜下呈革兰氏染色阳性细菌，在显微镜下呈()色色(A)红红(B)紫紫(C)黄黄(D)绿绿v20、在微生物检测中最常见的是细胞生物，其中最、在微生物检测中最常见的是细胞生物，其中最多的是（多的是（）。）。A、病毒、病毒 B、真菌、真菌C、霉菌、霉菌 D、细菌、细菌v21、各种杆菌的长短、大小和粗细很不一致，杆菌、各种杆菌的长短、大小和粗细很不一致，杆菌一般长约一般长约()微米。微米。A、0715B、23C、35D、610v22粪
34、大肠菌群检验是将所有产气的乳糖胆盐发酵粪大肠菌群检验是将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物转种于管培养物转种于()培养基。培养基。(A)乳糖发酵管乳糖发酵管(B)葡萄糖发酵管葡萄糖发酵管(C)EC肉汤管肉汤管(D)蛋白胨水管蛋白胨水管v23、半固体接种，采用下列哪种方法半固体接种，采用下列哪种方法()。A、涂布、涂布B、穿刺、穿刺C、点种、点种D、划线、划线v24原核细胞型微生物只有原核细胞型微生物只有()，无核膜。，无核膜。A、原始核、原始核B、核蛋白、核蛋白C、核仁：、核仁：D、细胞浆、细胞浆v25菌落计数时，固体样品加入稀释液后，最好置菌落计数时，固体样品加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以灭
35、菌均质器中以()的速度的速度处理处理1分钟。分钟。6.000rpm(D)10.00012.00026细菌群体生长繁殖细菌群体生长繁殖过程，包括过程，包括()期。期。A、二、二B、二、二C、四、四D、五、五v27、乳糖胆盐发酵管配制好后，放入一个小倒管后，、乳糖胆盐发酵管配制好后，放入一个小倒管后，应于应于()条件下灭茵。条件下灭茵。A、12115minB、11515minC、10020minD、11015minv28用漂白粉杀灭环境中病原微生物，称用漂白粉杀灭环境中病原微生物，称()。A、消毒、消毒B、灭菌、灭菌C、防腐、防腐D、抑菌、抑菌v29、大肠菌群的证实试验，是挑取可疑苗落接种、大肠菌
36、群的证实试验，是挑取可疑苗落接种()。A、乳糖发酵管、乳糖发酵管B、蛋白胨水、蛋白胨水C、作革兰氏染色、作革兰氏染色D、A+Cv30、霉菌及酵母菌苗菌落计数，应选择每皿菌落数、霉菌及酵母菌苗菌落计数，应选择每皿菌落数在在()之间进行计数。之间进行计数。A、30300B、30200C、30100D、15150v31、霉菌检测所需培养温度为、霉菌检测所需培养温度为2528，培养时间，培养时间是是()。A、7天天B、6天天C、5天天D、3天天v32、测定菌落总数的培养时间是、测定菌落总数的培养时间是()。A、242hB、182hC、362hD、482hv33玻璃器皿采用干热法灭菌时，玻璃器皿采用干热
37、法灭菌时，下面做法不正下面做法不正确的是确的是()。A、灭菌器放在箱内堆积留有一定空隙、灭菌器放在箱内堆积留有一定空隙B、打开电源和箱顶通气口、打开电源和箱顶通气口C、100时，关上箱顶通气口时，关上箱顶通气口D、在、在100120温度下保温温度下保温23h即可即可v34、金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点是、金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点是()。A、金黄色，大而凸起的园形菌落、金黄色，大而凸起的园形菌落B、金黄色，表面光滑的园形菌落，周围有溶血环、金黄色，表面光滑的园形菌落，周围有溶血环C、金黄色，透明，大而凸起的圆形菌落、金黄色，透明，大而凸起的圆形菌落D、白色透明圆形菌落、白色透明圆形菌落v35、乳糖胆盐发酵管制备时，应校正、乳糖胆盐发酵管制备时，应校正pH至至()加入加入指示剂，分装指示剂，分装lOmI灭菌灭菌(A)55(B)60(C)70(D)74v36细菌经培养一段时间后，细菌的繁殖速度愈来细菌经培养一段时间后，细菌的繁殖速度愈来愈慢，细菌的死亡数超过活菌数，以致细菌形态发愈慢，细菌的死亡数超过活菌数，以致细菌形态发生改变，此阶段属细菌的生改变，此阶段属细菌的()。(A)迟缓期迟缓期(B)对数期对数期(C)稳定期稳定期(D)衰退期衰退期v37物体上没有活的微生物存在叫物体上没有活的微生物存在叫()。(A)灭菌灭菌(B)无菌无菌(C)消毒消毒(D)防腐防腐
