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1、氨在肝性脑病氨在肝性脑病发生中的作用发生中的作用 肝性脑病肝性脑病hepatic encephalopathy HE 继发于于严重肝病的神重肝病的神经精神精神综合症合症欣快、反响缓慢、睡眠节律的变化,有轻度的扑翼样震颤欣快、反响缓慢、睡眠节律的变化,有轻度的扑翼样震颤前驱期前驱期 扑翼扑翼样震震颤Flapping tremor行为异常、嗜睡行为异常、嗜睡 、定向、定向了解力减退及精神错乱,了解力减退及精神错乱,经常出现扑翼样震颤经常出现扑翼样震颤昏迷前期昏迷前期明明明明显显的精神的精神的精神的精神错错乱、昏睡等病症乱、昏睡等病症乱、昏睡等病症乱、昏睡等病症昏睡期昏睡期肝性昏迷肝性昏迷 (hep
2、atic coma) 神志丧失、不能唤醒,没有扑翼样震颤神志丧失、不能唤醒,没有扑翼样震颤昏迷期昏迷期肝性脑病的发活力制肝性脑病的发活力制肝性脑病肝性脑病氨中毒学氨中毒学说假性神假性神经递质学学说-氨基丁酸学氨基丁酸学说说血血浆氨基酸失衡氨基酸失衡学学说氨中毒学说氨中毒学说 在在严重肝病重肝病时,机体内氨生成,机体内氨生成过多而肝多而肝脏 对氨的去除才干下降,致使血氨程度氨的去除才干下降,致使血氨程度显著著 升高,高升高,高浓度的氨度的氨经过血血脑屏障屏障进入入脑组 织,引起,引起脑功能妨碍。功能妨碍。如何复制肝性如何复制肝性脑病的病的动物模型?物模型?氨的来源增多氨的来源增多氨的去除减少氨的
3、去除减少肠腔注射复方氯化胺肠腔注射复方氯化胺肝叶结扎肝叶结扎实验目的实验目的 学习复制肝功能妨碍时氨代谢异常的动学习复制肝功能妨碍时氨代谢异常的动物模型的方法物模型的方法 察看肝性脑病时机体的典型表现及血氨察看肝性脑病时机体的典型表现及血氨程度的变化程度的变化 掌握肝性脑病的概念及发病机制掌握肝性脑病的概念及发病机制 u实验动物实验动物u 家兔,体重家兔,体重 甲兔:甲兔: 雌雌/ /雄雄u 乙兔:乙兔:u实验器材实验器材u 家兔急性手术器械一套,兔固定台,粗棉线,家兔急性手术器械一套,兔固定台,粗棉线,细丝细丝u 线,线,1ml1ml、 2ml 2ml、5ml5ml、 10ml 10ml注射
4、器各注射器各1 1具具 ,婴儿秤、分散瓶,婴儿秤、分散瓶2 2个个u药品药品u 1 1利多卡因,利多卡因,1 1肝素,肝素,2.5%2.5%复方氯化铵溶复方氯化铵溶液,液,u 0.5mol/L 0.5mol/L硫酸,纳氏试剂,饱和碳酸钾硫酸,纳氏试剂,饱和碳酸钾实验方法实验方法 甲兔:结扎大部肝叶注射复方甲兔:结扎大部肝叶注射复方NH4Cl 乙兔:不结扎肝叶乙兔:不结扎肝叶 注射复方注射复方NH4Cl剑剑突下做一突下做一突下做一突下做一6-8cm6-8cm长长切口切口切口切口-防止气胸防止气胸防止气胸防止气胸称重、分称重、分称重、分称重、分组组-甲兔和乙兔分量一甲兔和乙兔分量一甲兔和乙兔分量一
5、甲兔和乙兔分量一样样/ /相近相近相近相近 固定固定固定固定-四肢伸展仰卧位?四肢伸展仰卧位?四肢伸展仰卧位?四肢伸展仰卧位? 剪毛、麻醉各剪毛、麻醉各剪毛、麻醉各剪毛、麻醉各2ml2ml-颈颈部、上腹部部分麻醉?部、上腹部部分麻醉?部、上腹部部分麻醉?部、上腹部部分麻醉?甲兔结扎肝叶,找到甲兔结扎肝叶,找到十二指肠,穿牵引十二指肠,穿牵引线线乙兔不结扎肝叶,找乙兔不结扎肝叶,找到十二指肠,穿牵到十二指肠,穿牵引线引线 颈总动颈总动脉插管脉插管脉插管脉插管-取血取血取血取血1mL1mL测测血氨血氨血氨血氨( (取血后肝素化取血后肝素化取血后肝素化取血后肝素化) )提早取提早取胶布胶布剪口剪口游
6、离长度游离长度 甲兔甲兔出出现大抽搐大抽搐时再次再次放血放血1ml测血氨。血氨。记录所用复方所用复方NH4Cl总量和量和时间。 乙兔乙兔与甲兔出与甲兔出现大抽搐大抽搐时注射的复方注射的复方NH4ClNH4Cl量量和和时间一一样时,从,从颈总动脉再次放血脉再次放血1ml1ml测血氨。血氨。继续推注复方推注复方NH4ClNH4Cl直直至乙兔出至乙兔出现大抽搐,大抽搐,记录所用复方所用复方NH4ClNH4Cl总量和量和时间。向肠腔注射复方向肠腔注射复方NH4Cl5ml/5min)小小结第一次取血第一次取血时间第二次取血第二次取血时间、弃掉肝素、弃掉肝素停停顿注射复方注射复方NH4CL注射器的运用注射
7、器的运用大抽搐:四肢伸直,巩固如柱,头尾昂起,脊柱挺硬大抽搐:四肢伸直,巩固如柱,头尾昂起,脊柱挺硬迅速迅速血氨测定方法血氨测定方法(纳氏试剂显色法纳氏试剂显色法)饱和碳酸钾溶液饱和碳酸钾溶液1ml1ml血液血液1ml1ml 立刻以玻璃棒蘸硫酸立刻以玻璃棒蘸硫酸1滴滴迅速盖上分散瓶迅速盖上分散瓶倾斜分散瓶将血液及碳酸钾充分混匀倾斜分散瓶将血液及碳酸钾充分混匀45度角旋转度角旋转10分钟,放置分钟,放置0分钟分钟取出玻棒取出玻棒,取取纳氏氏试剂3ml将玻棒上含氨硫酸洗入将玻棒上含氨硫酸洗入试管中管中肉眼察看液体肉眼察看液体颜色色,颜色深浅反映血液氨的色深浅反映血液氨的浓度高低度高低(可用可用、+
8、、+、+、+表示表示颜色深浅色深浅) 玻棒用前玻棒用前调调整好高度整好高度 蘸液蘸液约约1cm 勿使玻棒与血液及瓶内壁接触勿使玻棒与血液及瓶内壁接触提早提早察看工程察看工程 氨在肝性脑病发生中的作用察看氨在肝性脑病发生中的作用察看组组 出现大抽搐所需出现大抽搐所需 出现大抽搐出现大抽搐 血血氨浓度氨浓度 别别 NH4Cl用量用量(ml) 所需时间所需时间(min) 第第1次次 第第2 次次 呼吸呼吸 肌张力肌张力甲兔甲兔乙兔乙兔本卷须知本卷须知原那么上选择体重相差不超越原那么上选择体重相差不超越250g的家兔进展对照的家兔进展对照 专人测定血氨专人测定血氨肝叶结扎线置于肝叶根部,防止勒破肝脏肝
9、叶结扎线置于肝叶根部,防止勒破肝脏复方复方NH4Cl切勿漏入腹腔切勿漏入腹腔乙兔与甲兔同时推注复方乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔?或晚于甲兔?发生大抽搐时迅速放血发生大抽搐时迅速放血0 5min 10min 15min 20min 25min 30min5ml 10ml 15ml 20ml 25ml 30ml 35ml 大抽搐:四肢伸直,巩固如柱,头尾昂起,脊柱挺硬大抽搐:四肢伸直,巩固如柱,头尾昂起,脊柱挺硬讨论要点讨论要点1.肝性脑病的概念肝性脑病的概念2.模型是如何复制的氨中毒学说模型是如何复制的氨中毒学说3.实验数据横纵向对比分析实验数据横纵向对比分析4.实验景象的分析氨对
10、脑的毒性作用实验景象的分析氨对脑的毒性作用察看工程察看工程呼吸运动、肌张力、抽搐。呼吸运动、肌张力、抽搐。 氨在肝性脑病发生中的作用察看氨在肝性脑病发生中的作用察看组组 出现大抽搐所需出现大抽搐所需 出现大抽搐出现大抽搐 血氨血氨浓度浓度 别别 NH4Cl用量用量(ml) 所需时间所需时间(min) 第第1次次 第第2次次甲兔甲兔乙兔乙兔氨对脑代谢功能的影响1、干扰脑细胞能量代谢、干扰脑细胞能量代谢2、使脑内神经递质改动、使脑内神经递质改动3、氨对神经细胞膜的抑制造用、氨对神经细胞膜的抑制造用参考结论:参考结论: 血氨增高是肝性脑病的重要诱因血氨增高是肝性脑病的重要诱因 甲兔为肝性脑病,乙兔为急性氨中毒甲兔为肝性脑病,乙兔为急性氨中毒 肝脏具有解氨毒的作用,但有一定限制肝脏具有解氨毒的作用,但有一定限制 氨对大脑具有毒性作用氨对大脑具有毒性作用