主要的动物病原菌课件

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1、第五第五单元元 主要的主要的动物病原菌物病原菌 球菌球菌n链球菌属球菌属-猪猪链球菌球菌n蜂房球菌蜂房球菌 肠杆菌科杆菌科n埃希菌属埃希菌属大大肠埃希氏菌埃希氏菌n沙沙门氏菌属氏菌属-沙沙门氏菌氏菌 巴氏杆菌科及相关属巴氏杆菌科及相关属n巴氏杆菌属巴氏杆菌属-多多杀巴氏杆菌巴氏杆菌n里氏杆菌属里氏杆菌属-鸭疫疫里氏杆菌里氏杆菌n嗜血杆菌属嗜血杆菌属-副猪副猪嗜血杆菌嗜血杆菌n放放线杆菌属杆菌属-胸膜胸膜肺炎放肺炎放线杆菌杆菌 革革兰氏阴性需氧杆菌氏阴性需氧杆菌n布布鲁氏菌属氏菌属-布布鲁氏菌氏菌n伯氏菌属伯氏菌属-鼻疽伯鼻疽伯氏菌氏菌n波氏菌属波氏菌属-支气管支气管败血波氏菌血波氏菌 革革兰氏

2、阳性无芽氏阳性无芽孢杆菌杆菌n李氏杆菌属李氏杆菌属-产单核核细菌李氏杆菌菌李氏杆菌 革革兰氏阳性氏阳性产芽芽孢杆菌杆菌n芽芽孢杆菌属杆菌属-炭疽炭疽芽芽孢杆菌杆菌n梭菌属梭菌属-产气气荚膜膜杆菌杆菌n拟幼虫芽幼虫芽孢杆菌杆菌 分支杆菌分支杆菌n牛分支杆菌牛分支杆菌n副副结核分支杆菌核分支杆菌 螺旋体螺旋体n猪痢短螺旋体猪痢短螺旋体 支原体支原体n鸡毒支原体毒支原体n猪肺炎支原体猪肺炎支原体n牛支原体牛支原体 真菌真菌n白僵菌白僵菌n蜜蜂球囊菌蜜蜂球囊菌变种（蜜蜂种（蜜蜂病原）病原） 类菌菌质体体n蜜蜂螺旋菌蜜蜂螺旋菌质体体 第第1 1节 球菌球菌n葡萄球菌属葡萄球菌属和和链球菌属球菌属是人和是

3、人和动物的重物的重要致病菌。要致病菌。一、链球菌属一、链球菌属 链球菌属球菌属细菌是化菌是化脓性性球菌中的另一大球菌中的另一大类常常见细菌，菌，广泛分布于自然界，多数不广泛分布于自然界，多数不致病，有些可致病，有些可导致人或致人或动物物各种化各种化脓性炎症、肺炎、乳性炎症、肺炎、乳腺炎、腺炎、败血症。血症。链球菌在血平板上的溶血现象分为链球菌在血平板上的溶血现象分为n型溶血型溶血链球菌球菌 在菌落周在菌落周围形成不透明的草形成不透明的草绿色溶血色溶血环，红细胞未溶解，血胞未溶解，血红蛋白蛋白变成成绿色。致病力不色。致病力不强，多，多为机会致病菌。机会致病菌。n型溶血型溶血链球菌球菌 菌落周菌落

4、周围形成完全透明的溶形成完全透明的溶血血环，红细胞完全溶解。胞完全溶解。这类菌致病力菌致病力强，常，常引起人及引起人及动物各种疾病。物各种疾病。n型溶血型溶血链球菌球菌 菌落周菌落周围无溶血无溶血现象。一般象。一般为非致病菌。非致病菌。1 1 形形态及染色及染色猪猪链球菌球菌球形或卵球形或卵圆形，直径形，直径0.6-1.0um0.6-1.0um。呈。呈链状状排列，排列，链长短不一。短不一。致病性菌致病性菌链长，液体培养基中菌，液体培养基中菌链长。2、培养及生化特性培养及生化特性n大多数兼性大多数兼性厌氧，少数氧，少数为专性性厌氧。氧。营养要求复养要求复 杂，需，需补充血液、血清、葡萄糖等。充血

5、液、血清、葡萄糖等。n在血液在血液琼脂平板上形成灰白色、表面光滑、脂平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整整齐、直径、直径0.5-0.75mm0.5-0.75mm的的细小菌落。小菌落。n不同菌株溶血不一。在血清肉不同菌株溶血不一。在血清肉汤中易形成中易形成长链，管底呈絮状沉淀。管底呈絮状沉淀。3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子n可致猪可致猪脑膜炎、关膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎、肺炎、心内膜炎、多炎、多发性性浆膜炎、流膜炎、流产和局部和局部脓仲。仲。n二大二大类毒力因子毒力因子n一一类与黏附有关与黏附有关n一一类毒素。毒素。4 微生物学诊断微生物学诊断n标本的采集：本的采集：根据根据临床疾病

6、床疾病类型的不同，采集适当的型的不同，采集适当的 标本本渗出液、渗出液、脓汁、乳腺炎乳液、汁、乳腺炎乳液、脑脊髓液、脊髓液、 尿液和感染尿液和感染组织。n检验方法方法（一）直接（一）直接检查： 可直接涂片，革可直接涂片，革兰氏染色氏染色镜检。（二）分离培养（二）分离培养: : 在涂片前先接种血平板，在涂片前先接种血平板，3724-48h3724-48h。 观察菌落形察菌落形态和溶血情况。然后涂片染色和溶血情况。然后涂片染色镜检。（三）（三）细菌菌鉴定：菌落形定：菌落形态、溶血特性、溶血特性、细菌形菌形态、生、生 化特性。如定群、定型，化特性。如定群、定型，则要作血清学要作血清学试验。PCRPC

7、R二、蜂房球菌二、蜂房球菌n欧洲幼虫腐臭病病原为蜂房球菌。一种欧洲幼虫腐臭病病原为蜂房球菌。一种蜜蜂幼虫病害。蜜蜂幼虫病害。第第2 2节 肠杆菌科杆菌科大大肠埃希氏菌埃希氏菌沙沙门氏菌氏菌n肠杆菌科是由一大群生化和遗传上相关肠杆菌科是由一大群生化和遗传上相关的中等大小杆菌所组成。的中等大小杆菌所组成。n其共同特性为：其共同特性为：革兰阴性革兰阴性、非抗酸性非抗酸性、无芽胞的兼性厌氧菌无芽胞的兼性厌氧菌。n本科细菌广泛分布于自然界，包括腐生本科细菌广泛分布于自然界，包括腐生菌、寄生菌和人及动物的病原菌。菌、寄生菌和人及动物的病原菌。代表属代表属n埃希菌属（埃希菌属（EscherichiaEsch

8、erichia） n沙沙门菌属（菌属（SalmonellaSalmonella） 大大肠埃希菌埃希菌 n本菌系人和温血本菌系人和温血动物物肠道内正常菌群成道内正常菌群成员之一，之一，终生伴随，生伴随，经粪便不断散播于便不断散播于周周围环境。境。n在在环境境卫生和食品生和食品卫生学上，常被用作生学上，常被用作粪便直接或便直接或间接接污染的染的检测指指标。1.1.形形态及染色特性及染色特性n大大肠杆菌杆菌为革革兰阴性无芽胞的直杆菌，阴性无芽胞的直杆菌，大小大小0.4-0.70.4-0.72-3m2-3m，n大多数菌株以周生鞭毛运大多数菌株以周生鞭毛运动，但也有无，但也有无鞭毛的鞭毛的变异株。异株。

9、n某些致病菌株有某些致病菌株有荚膜或微膜或微荚膜。膜。革兰染色的大肠杆菌革兰染色的大肠杆菌2.培养及生化特性 n本菌本菌为兼性兼性厌氧菌，氧菌，在普通培养基上生在普通培养基上生长良好良好，最适，最适生生长温度温度为3737，最适生，最适生长pHpH为为7.2-7.47.2-7.4。n麦康麦康凯琼脂上形成脂上形成红色菌落色菌落；可与沙；可与沙门氏菌区氏菌区别。n在在SSSS琼脂上一般不生脂上一般不生长或生或生长较差，生差，生长者呈者呈红色。色。n一些致病性菌株在一些致病性菌株在绵羊血平板上呈羊血平板上呈溶血。溶血。n在在营养养琼脂上生脂上生长24h24h后，形成后，形成圆形凸起、光滑、湿形凸起、

10、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落半透明、灰白色菌落，直径，直径约2-3mm2-3mm。nS S型菌株在肉型菌株在肉汤中培养中培养18-24h18-24h，呈均匀，呈均匀浑浊，管底有粘性，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌沉淀，液面管壁有菌环。 n本菌能本菌能发酵多种碳水化合物酵多种碳水化合物产酸酸产气。大多数菌株可气。大多数菌株可迅速迅速发酵乳糖和山梨醇酵乳糖和山梨醇 3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子n一一类是是细菌寄生部位菌寄生部位发生改生改变，如移位侵入，如移位侵入肠外外组织或器官，成或器官，成为机会致病菌；机会致病菌；n另一另一类是病原性大是病原性大肠杆菌，与人和杆菌，与人和动物的大物的大肠

11、杆菌病（杆菌病（ColibacilosisColibacilosis）密切相关，正）密切相关，正常情况下极少存在于健康机体内常情况下极少存在于健康机体内 与与动物疾病有关的大物疾病有关的大肠杆菌可分杆菌可分为五五类：n产肠毒素大毒素大肠杆菌，杆菌，ETEC ETEC ：幼畜腹泻幼畜腹泻n肠致病型大致病型大肠杆菌，杆菌，EPEC EPEC n产类志志贺毒大毒大肠杆菌，杆菌，SLTECSLTECn败血性大血性大肠杆菌，杆菌，SEPECSEPECn尿道致病性大尿道致病性大肠杆菌，杆菌，UPECUPEC（2 2）与大）与大肠杆菌致病有关的毒力因子杆菌致病有关的毒力因子定居因子：定居因子：粘附素粘附素n

12、包括菌毛和非菌毛包括菌毛和非菌毛类蛋白，具有粘附于宿主的蛋白，具有粘附于宿主的小小肠上皮上皮细胞的能力，故称胞的能力，故称为粘附素粘附素（adhesinadhesin）n在在动物源物源ETECETEC中已中已发现的菌毛粘附素主要有的菌毛粘附素主要有F4F4（K88K88）、F5F5（K99K99）、F6F6（987P987P）、）、F41F41、F42F42、F165F165、F17F17（旧称（旧称为FYFY或或Att25Att25）和）和F18 F18 。 肠毒素毒素n是是ETECETEC在体内或体外生在体内或体外生长时产生并分泌生并分泌到胞外的一种蛋白到胞外的一种蛋白质毒素，毒素，n可分

13、可分为不耐不耐热肠毒素毒素（heat-labile heat-labile enterotoxinenterotoxin，LTLT）和）和耐耐热肠毒素毒素（heat-stable enterotoxinheat-stable enterotoxin，STST）两种。）两种。4.4.微生物学微生物学诊断断n分离培养：分离培养：无菌采集病无菌采集病变组织，在血，在血琼脂或麦康脂或麦康凯平板上划平板上划线分离培养。分离培养。n生化生化鉴定：定：挑取挑取麦康麦康凯平板上的平板上的红色菌落色菌落或血平或血平板上呈板上呈溶血的典型菌落，分溶血的典型菌落，分别转种三糖种三糖铁（TSITSI）培养基和普通）培

14、养基和普通琼脂斜面做初步生化脂斜面做初步生化鉴定和定和纯培养。培养。n抗原抗原鉴定：定：将将TSITSI琼脂反脂反应模式符合埃希菌属的生模式符合埃希菌属的生长物或其相物或其相应的普通斜面的普通斜面纯培养物做培养物做O O抗原抗原鉴定。定。n检测毒力因子：毒力因子：进而而检测毒力因子，便可确定其毒力因子，便可确定其属于何属于何类致病性大致病性大肠杆菌。杆菌。大肠杆菌大肠杆菌分离鉴定程序分离鉴定程序 二、沙门氏菌二、沙门氏菌 n沙沙门菌属是一群寄生于人和菌属是一群寄生于人和动物物肠道内道内的革的革兰阴性杆菌，生化特性和抗原阴性杆菌，生化特性和抗原结构构相似，兼性相似，兼性厌氧。氧。n绝大多数大多数

15、发酵葡萄糖酵葡萄糖产酸酸产气，也偶气，也偶尔有不有不产气的。在三糖气的。在三糖铁琼脂上常脂上常产生生H H2 2S Sn为人人类食物中毒的主要病原之一，食物中毒的主要病原之一，对医医学、学、兽医学和公共医学和公共卫生均十分重要。生均十分重要。1.1.形形态及染色特性及染色特性n沙沙门菌的形菌的形态和染色特性与同科的大多和染色特性与同科的大多数其它菌属相似，呈直杆状，数其它菌属相似，呈直杆状，0.7-0.7-1.51.52.0 -5m2.0 -5m，革，革兰阴性。阴性。n除除雏沙沙门菌和菌和鸡沙沙门菌无鞭毛不运菌无鞭毛不运动外，外，其余各菌均以周生鞭毛运其余各菌均以周生鞭毛运动，且，且绝大多大多

16、数具有数具有型菌毛。型菌毛。致病性致病性n本属具有极其广泛的动物宿主，是一种重要的本属具有极其广泛的动物宿主，是一种重要的人畜共患病病原。人畜共患病病原。n不仅引致人的伤寒、副伤寒、急性胃肠炎、败不仅引致人的伤寒、副伤寒、急性胃肠炎、败血症等疾病，还侵害幼、青年动物，使之发生血症等疾病，还侵害幼、青年动物，使之发生败血症、胃肠炎及其它组织局部炎症。败血症、胃肠炎及其它组织局部炎症。n对成年动物则往往引起散发性或局限性沙门菌对成年动物则往往引起散发性或局限性沙门菌病，发生败血症的怀孕母畜可表现流产。病，发生败血症的怀孕母畜可表现流产。n在发病的畜禽群中，具有一定比例的个体是隐在发病的畜禽群中，具

17、有一定比例的个体是隐性感染或康复带菌者，并间歇地排菌，成为主性感染或康复带菌者，并间歇地排菌，成为主要传染源。要传染源。n沙门菌很容易在动物与动物、动物与人、人与沙门菌很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间通过直接或间接的途径传播，没有中间人之间通过直接或间接的途径传播，没有中间宿主。宿主。n主要传染途径是消化道主要传染途径是消化道。卫生不良、应激以及。卫生不良、应激以及发生病毒或寄生虫感染，均可诱发易感动物沙发生病毒或寄生虫感染，均可诱发易感动物沙门菌病。门菌病。（2）毒力因子）毒力因子n菌毛菌毛n内毒素内毒素n肠毒素毒素4.微生物学诊断微生物学诊断n分离培养：分离培养：未污染的被检组织可

18、直接培未污染的被检组织可直接培养基平板上划线分离，但已污染的被检养基平板上划线分离，但已污染的被检材料需要增菌培养基增菌后，再用鉴别材料需要增菌培养基增菌后，再用鉴别培养基分离。培养基分离。n生化鉴定生化鉴定n血清型分型血清型分型沙门菌的革兰氏染色沙门菌的革兰氏染色沙门菌的麦康凯培养沙门菌的麦康凯培养第3节 巴氏杆菌科及相关属 n巴氏杆菌属（Pasteurellan里氏杆菌属（Riemerella）n放线杆菌属（Actinobacillus）n嗜血杆菌属（Haemophilus）n多杀巴氏杆菌病n鸭疫里氏杆菌病n猪传染性胸膜肺炎n猪副猪嗜血杆菌病一、巴氏杆菌属：多杀性巴氏杆菌一、巴氏杆菌属：多

19、杀性巴氏杆菌n本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病（PasteurellosisPasteurellosis）的病原体，主要使）的病原体，主要使动物物发生出血性生出血性败血病或血病或传染性肺炎。染性肺炎。n广泛分布于世界各地。广泛分布于世界各地。n在同种或不同在同种或不同动物物间可相互可相互传染，也可染，也可感染人，大多因被感染人，大多因被动物咬物咬伤所致。所致。1.形态及染色形态及染色n为球杆状或短杆状菌，两端球杆状或短杆状菌，两端钝圆，大小大小为0.25-0.40.25-0.40.5-2.50.5-2.5 m m。n单个存在，有个存在，有时成双排列成双排列n病料涂片用瑞

20、氏染色或美病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色染色时，可，可见典型的典型的两极着色两极着色n无鞭毛，不形成芽胞。无鞭毛，不形成芽胞。n革革兰染色阴性染色阴性 美蓝染色2.培养及生化特性培养及生化特性n需氧或兼性需氧或兼性厌氧菌。氧菌。对营养要求养要求较严格。格。n在普通培养基上生在普通培养基上生长贫瘠，在麦瘠，在麦康康凯培养上不生培养上不生长。n在加有血液、血清或微量血在加有血液、血清或微量血红素素的培养基中生的培养基中生长良好。良好。n在血在血琼脂平板上培养脂平板上培养24h24h，长成成水滴水滴样小菌落小菌落，无溶血，无溶血现象。象。n从病料从病料新分离的新分离的强毒菌株具有毒菌株具有荚膜膜，菌落

21、，菌落为粘液型，粘液型，较大。大。3.致病性与毒力因子致病性与毒力因子n本菌是多种动物的重要病原菌。本菌是多种动物的重要病原菌。n对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、马、兔等对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、马、兔等都可致病，都可致病，n急性型呈出血性败血症迅速死亡，如急性型呈出血性败血症迅速死亡，如牛出血性牛出血性败血症败血症、猪肺疫猪肺疫、禽霍乱禽霍乱、兔巴氏杆菌病等；、兔巴氏杆菌病等；n慢性型则呈现慢性型则呈现萎缩性鼻炎（萎缩性鼻炎（猪、羊）、关节炎猪、羊）、关节炎及局部化脓性炎症等。及局部化脓性炎症等。n实验动物中实验动物中小鼠极易感染小鼠极易感染，鸽对杀禽亚种，鸽对杀禽亚种的易感性强。的易感性强。

22、猪肺疫禽霍乱禽霍乱n具有具有荚膜的菌株有膜的菌株有较强的抗性，的抗性，荚膜成分膜成分为透明透明质酸酸，有抗吞噬作用。，有抗吞噬作用。n研究表明，研究表明，杀禽禽亚种的致病力与菌体的内毒素有关。种的致病力与菌体的内毒素有关。该内毒素是一种含氮的磷酸脂多糖，与菌体内毒素是一种含氮的磷酸脂多糖，与菌体结合合不不紧密，用福密，用福尔马林林盐水可洗脱，少量注入水可洗脱，少量注入鸡体，体，即可引致禽霍乱，表即可引致禽霍乱，表现出血性出血性败血症状。血症状。n已知已知A A、B B、D D型菌株具有型菌株具有4 4型菌毛。本菌的型菌毛。本菌的铁载体名体名为多多杀素（素（multocidinmultocidi

23、n），也与毒力有关。），也与毒力有关。微生物学诊断微生物学诊断n采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新、骨髓等新鲜病料涂片或触片，以碱性美病料涂片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染液或瑞氏染色液染色，色，显微微镜检查，如，如发现典型的典型的两极着色的短杆两极着色的短杆菌菌，结合流行病学及剖合流行病学及剖检，即可作初步，即可作初步诊断。断。n但慢性病例或腐但慢性病例或腐败材料不易材料不易发现典型菌体，典型菌体，须进行行培养和培养和动物物试验。n可用血可用血琼脂分离培养，疑似菌落再接种在三糖脂分离培养，疑似菌落再接种在三糖铁培培养基，养基，细菌生菌生长，使底部，使

24、底部变黄。必要黄。必要时可可进一步一步做生化反做生化反应作作鉴定。定。动物物试验 n用病料用病料悬液或分离培养菌，皮下注射液或分离培养菌，皮下注射小小鼠鼠、家兔或、家兔或鸽，动物多在物多在24-48h24-48h内死亡。内死亡。n参照患畜的生前参照患畜的生前临床症状和剖床症状和剖检变化，化，结合分离菌株的毒力合分离菌株的毒力试验，作出，作出诊断。断。血清学血清学鉴定定n若要若要鉴定定荚膜抗原和菌体抗原型，膜抗原和菌体抗原型，则要要用抗血清或用抗血清或单克隆抗体克隆抗体进行血清学行血清学试验。n检测动物血清中的抗体，可用物血清中的抗体，可用试管凝集、管凝集、间接凝集、接凝集、琼脂脂扩散散试验或或

25、ELISAELISA。二、里氏杆菌属：鸭疫里氏杆菌二、里氏杆菌属：鸭疫里氏杆菌n鸭疫里氏杆菌（疫里氏杆菌（R. anatipestiferR. anatipestifer）是本）是本属的代表种，原名属的代表种，原名鸭疫巴氏杆菌。疫巴氏杆菌。n该菌与巴氏杆菌属的菌与巴氏杆菌属的rRNArRNA不同源，与黄杆不同源，与黄杆菌等相近，因此建菌等相近，因此建议建立里氏杆菌新属，建立里氏杆菌新属，归于于黄杆菌科黄杆菌科（FlavobacteriaceaeFlavobacteriaceae1.形态及染色形态及染色n菌体呈杆状或菌体呈杆状或椭圆形，大小形，大小0.3-0.3-0.50.50.7-6.5m0.

26、7-6.5m，偶，偶见个个别长丝状。状。n多多为单个，少数成双或短个，少数成双或短链排列。排列。n可形成可形成荚膜，无芽胞，无鞭毛。膜，无芽胞，无鞭毛。n瑞氏染色可瑞氏染色可见两极着色。两极着色。n革革兰染色阴性。染色阴性。培养及生化特性培养及生化特性n本菌本菌营养要求养要求较高，普通培养基和麦康高，普通培养基和麦康凯培养基培养基上不生上不生长。初次分离培养供。初次分离培养供给5%-10%5%-10%的的CO2CO2易于易于生生长。n在在巧克力巧克力或胰蛋白或胰蛋白胨大豆大豆琼脂（脂（TSATSA）平板上，）平板上，CO2CO2培养箱或蜡培养箱或蜡烛缸中，缸中，3737培养培养24-48h24

27、-48h，生，生长的菌落无色素，呈的菌落无色素，呈圆形、表面光滑，直径形、表面光滑，直径1-2mm1-2mm。n在含血清或胰蛋白在含血清或胰蛋白胨酵母的肉酵母的肉汤中，中，3748h3748h培培养，呈上下一致养，呈上下一致轻微混微混浊，管底有少量沉淀。，管底有少量沉淀。 n本菌不本菌不发酵葡萄糖、蔗糖，可与多酵葡萄糖、蔗糖，可与多杀性巴氏杆性巴氏杆菌区菌区别。n极少数菌株极少数菌株发酵麦芽糖或肌醇。靛基酵麦芽糖或肌醇。靛基质、硝酸、硝酸盐还原、原、柠檬酸檬酸盐利用、利用、VPVP、甲基、甲基红试验、硫、硫化化氢产生、尿素分解等均生、尿素分解等均为阴性。阴性。n氧化氧化酶、触、触酶试验为阳性。

28、多不溶血，多液化阳性。多不溶血，多液化明胶，明胶，nG+CG+C多多为35mol%35mol%。致病性与毒力因子致病性与毒力因子n本菌是本菌是雏鸭传染性染性浆膜炎的病原菌。膜炎的病原菌。n可引起可引起1-81-8周周龄、尤其、尤其2-32-3周周龄雏鸭大批大批发病、死亡，生病、死亡，生长发育育严重受阻。重受阻。n也从患也从患败血症的血症的鸡、鹅、火、火鸡、野生水、野生水禽分离。兔和小鼠不易感。禽分离。兔和小鼠不易感。n豚鼠腹腔注射大量豚鼠腹腔注射大量细菌可致死。菌可致死。微生物学诊断微生物学诊断n取取发病初期病病初期病鸭的的脑及心血，用巧克力及心血，用巧克力培养基容易分离到本菌。培养基容易分离

29、到本菌。n肝、脾分离率低，肝、脾分离率低，仅10%10%左右。分离左右。分离时应同同时接种麦康接种麦康凯培养基，以便及培养基，以便及时区区别大大肠杆菌。杆菌。n分离的分离的细菌菌应进行葡萄糖和蔗糖行葡萄糖和蔗糖发酵酵试验，也可接种小鼠，与多，也可接种小鼠，与多杀性巴氏菌相性巴氏菌相区区别。PCRPCR法可用作快速法可用作快速诊断。断。 三、嗜血杆菌属：副猪嗜血杆菌三、嗜血杆菌属：副猪嗜血杆菌n副猪嗜血杆菌病，也写作副猪嗜血杆菌病，也写作猪副嗜血杆菌病，又称格猪副嗜血杆菌病，又称格拉拉泽氏病或革拉氏病或革拉泽氏病。氏病。n引起的猪的疾病，表引起的猪的疾病，表现为猪的猪的纤维性多性多发性性浆膜炎、

30、膜炎、关关节炎、胸膜炎和炎、胸膜炎和脑膜炎膜炎等。等。 血清型n根据热稳定抗原的差异可将本菌分为至少根据热稳定抗原的差异可将本菌分为至少15个血清型，个血清型，约约25%分离株无法定型，优势菌型为分离株无法定型，优势菌型为4型及型及5型。型。n不同血清型毒力存在差异，不同血清型毒力存在差异，1、5、10、12、13及及14型为高毒力型为高毒力，2、4、8、15为中毒力为中毒力，其它血清型视，其它血清型视为无毒力。但同一血清型的不同菌株毒力可不同。为无毒力。但同一血清型的不同菌株毒力可不同。1.1.形形态及染色及染色n 多多为短杆状，也有呈球、杆状或短杆状，也有呈球、杆状或长丝状状等多形性。大小

31、等多形性。大小为1.51.50.3-0.40.3-0.4 m m。n多多单个、也有短个、也有短链排列。排列。n无鞭毛，无芽胞，新分离的致病菌株有无鞭毛，无芽胞，新分离的致病菌株有荚膜。膜。美美兰染色呈两极染色呈两极，革，革兰染色染色为阴阴性。性。2.培养及生化特性培养及生化特性初次分离培养初次分离培养时供供给5%-10%CO25%-10%CO2可促可促进生生长。生。生长需供需供给X X因子和因子和V V因子。因子。nX X因子因子是血是血红蛋白中的血蛋白中的血红素及其衍生物素及其衍生物nV V因子因子为辅酶即烟即烟酰胺腺胺腺嘌噙二核苷酸（二核苷酸（NADNAD）或）或辅酶n血液中的血液中的V

32、V因子一般因子一般处于被抑制状于被抑制状态，将，将鲜血血琼脂加脂加热80-80-9090，5-15min5-15min，制成，制成巧克力培养基巧克力培养基，培养基中的抑制物被，培养基中的抑制物被破坏，破坏，释出出V V因子。因子。3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子n多多发性性浆膜炎等膜炎等4.4.微生物学微生物学诊断断nTSATSA分分离，分分离，PCRPCR鉴定等定等四、放四、放线杆菌属：猪胸膜肺炎放杆菌属：猪胸膜肺炎放线杆菌杆菌n本菌旧称猪胸膜肺炎嗜血杆菌或副溶血本菌旧称猪胸膜肺炎嗜血杆菌或副溶血嗜血杆菌嗜血杆菌n但但DNADNA杂交交试验表明，本菌与林氏放射杆表明，本菌与林氏放射杆

33、菌有很高的同源性，因此自菌有很高的同源性，因此自19831983年起改年起改为现名，并划名，并划归放放线杆菌属杆菌属。n本菌引致本菌引致猪猪传染性胸膜肺炎染性胸膜肺炎，是集，是集约化化猪猪场常常见猪病之一。猪病之一。1.形态及染色形态及染色n小球杆菌，具多形性。新小球杆菌，具多形性。新鲜病料呈两极病料呈两极染色，有染色，有荚膜和鞭毛，具运膜和鞭毛，具运动性。性。n兼性兼性厌氧，置氧，置1010 COCO2 2中可中可长出粘液性菌出粘液性菌落。最适生落。最适生长温度温度3737。n在普通在普通营养基不养基不长，需，需添加添加V V因子因子n常用巧克力培养基培养。常用巧克力培养基培养。n在在绵羊血

34、平板上，可羊血平板上，可产生生稳定的定的溶血，溶血，金黄色葡萄球菌可增金黄色葡萄球菌可增强其溶血圈（其溶血圈（CAMPCAMP试验阳性阳性） CAMP试验3.致病及毒力因子微生物学诊断微生物学诊断n取病死猪肺坏死取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物、胸水、鼻及气管渗出物作涂片，作涂片，显微微镜检查是否有革是否有革兰阴性两极染色阴性两极染色的球杆菌。的球杆菌。n确确诊需取上述病料接种巧克力需取上述病料接种巧克力琼脂或脂或绵羊血羊血琼脂，置脂，置5% CO2 375% CO2 37越夜培养。如有溶血小菌越夜培养。如有溶血小菌落生落生长，应进一步作一步作CAMPCAMP试验，。，。n近年来近年来

35、则采用采用PCRPCR法，法，检测荚膜合成相关基因膜合成相关基因等，可达快速等，可达快速诊断和定型。断和定型。第第4节节 革兰氏阴性需氧杆菌革兰氏阴性需氧杆菌n布布鲁氏菌属氏菌属-布布鲁氏菌氏菌n伯氏菌属伯氏菌属-鼻疽伯氏菌鼻疽伯氏菌n波氏菌属波氏菌属-支气管支气管败血波氏菌血波氏菌 胞内菌的基本概念胞内菌的基本概念n根据病原菌与宿主根据病原菌与宿主细胞的关系，病原菌分胞的关系，病原菌分为胞外胞外菌菌和和胞内菌胞内菌两两类。n胞外菌胞外菌是指可以在宿主是指可以在宿主细胞外的胞外的细胞胞间隙、血液、隙、血液、淋巴液、淋巴液、组织液等体液中生液等体液中生长繁殖的繁殖的细菌。菌。n胞内菌胞内菌又分两

36、种，即又分两种，即兼性胞内菌兼性胞内菌和和专性胞内菌性胞内菌。兼性胞内菌是指在宿主体内，主要寄居在兼性胞内菌是指在宿主体内，主要寄居在细胞内胞内生生长繁殖，在体外无活繁殖，在体外无活细胞的培养基中亦可生胞的培养基中亦可生长。专性胞内菌性胞内菌则不不论在体内体外，都必在体内体外，都必须在活在活细胞胞内生内生长繁殖繁殖 一、布氏杆菌属：布氏杆菌n有羊、牛、猪、鼠、有羊、牛、猪、鼠、绵羊和犬羊和犬6 6个种，个种，2020个生物型。个生物型。n是引起多种是引起多种动物和人物和人发病的病原。病的病原。1.形态与染色n球杆状，无鞭毛，不形成芽孢。球杆状，无鞭毛，不形成芽孢。n革兰氏阴性。革兰氏阴性。2.

37、培养及生化特性培养及生化特性n此属此属细菌菌专性需氧性需氧，但，但许多菌株，尤其是在初多菌株，尤其是在初代分离培养代分离培养时尚需尚需5%-10% CO25%-10% CO2。最适生。最适生长温度温度3737，最适，最适pHpH为为6.6-7.46.6-7.4。n泛酸泛酸钙和内消旋和内消旋赤赤藓糖醇糖醇可刺激某些菌株生可刺激某些菌株生长。n大多数菌株在初次培养大多数菌株在初次培养时生生长缓慢，在慢，在48h48h内内罕罕见形成菌落，常需形成菌落，常需5-10d5-10d甚至甚至20-30d20-30d，但，但实验室室长期期传代保存的菌株，培养代保存的菌株，培养48-72h48-72h即可生即可

38、生长良好。良好。n普通培养基上生普通培养基上生长缓慢；在含有慢；在含有35%35%的甘油或血的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好；更好；n菌落特点菌落特点n甘油甘油琼脂：脂：细小、光滑、小、光滑、圆形、湿形、湿润、粘稠的灰白、粘稠的灰白色色渐至灰黄色菌落至灰黄色菌落n血血琼脂：脂：不溶血不溶血n马铃薯培养基：蜂蜜状粘稠菌苔，薯培养基：蜂蜜状粘稠菌苔，颜色由淡黄色色由淡黄色淡褐色淡褐色深褐色；深褐色；对鉴定有价定有价值n孔雀孔雀绿酸性复酸性复红培养基上，形成淡培养基上，形成淡绿色菌落色菌落n麦康麦康凯上不能生上不能生长n在液体培养基中呈在液体培养基中呈轻微微浑

39、浊生生长，无菌膜。，无菌膜。但培养日久，可形成菌但培养日久，可形成菌环，有，有时形成厚的菌膜；形成厚的菌膜；在固体培养基上，菌落可以分在固体培养基上，菌落可以分为n光滑（光滑（S S）型菌落）型菌落n粗糙（粗糙（R R）型菌落）型菌落n粘胶状的粘液（粘胶状的粘液（M M）型菌落）型菌落3致病性和毒力因子n将本属分将本属分为该属属现包括包括6 6个种个种2020个生物型，个生物型，n马尔他布氏杆菌他布氏杆菌（Br.melitensisBr.melitensis）生物型）生物型1313、n流流产布氏杆菌布氏杆菌（Br.abortusBr.abortus）生物型）生物型1919n猪布氏杆菌猪布氏杆菌

40、（Br.suisBr.suis）生物型）生物型1515n绵羊布氏杆菌羊布氏杆菌（Br.ovisBr.ovis）n沙林鼠布氏杆菌沙林鼠布氏杆菌（Br.neotomaeBr.neotomae）n犬布氏杆菌犬布氏杆菌（Br.canisBr.canis）6 6个种。个种。毒力差异毒力差异n在不同种别和生物型，甚至同型细菌的在不同种别和生物型，甚至同型细菌的不同菌株之间毒力差异明显。不同菌株之间毒力差异明显。n对豚鼠的致病性顺序是对豚鼠的致病性顺序是n马尔他布氏杆菌马尔他布氏杆菌猪布氏杆菌猪布氏杆菌流产布氏流产布氏杆菌沙林鼠布氏杆菌杆菌沙林鼠布氏杆菌犬布氏杆菌绵犬布氏杆菌绵羊布氏杆菌。羊布氏杆菌。n引致

41、多种引致多种动物和人的布氏杆菌病。物和人的布氏杆菌病。细菌菌可可经气溶胶气溶胶传播播，是潜在的生物武器。，是潜在的生物武器。n本菌本菌不不产生外毒素，但有毒性生外毒素，但有毒性较强的内毒素的内毒素。n光滑型的流光滑型的流产布氏杆菌入侵机体粘膜屏障后，布氏杆菌入侵机体粘膜屏障后，被吞噬被吞噬细胞吞噬胞吞噬成成为胞内寄生菌胞内寄生菌，并在淋巴，并在淋巴结生生长繁殖形成繁殖形成感染灶。感染灶。n潜伏期潜伏期2 2周至周至7 7个月，一旦侵入血流，个月，一旦侵入血流，则出出现菌血症，菌血症，由于由于内毒素的作用致使机体内毒素的作用致使机体发热。n之后之后细菌定位于菌定位于网状内皮系网状内皮系统、乳腺及

42、生殖器、乳腺及生殖器官。官。n在妊娠中期，在妊娠中期，细菌在富含菌在富含赤赤藓醇醇的胎的胎盘绒毛膜及其周毛膜及其周边大量繁殖，大量繁殖，导致坏死性胎致坏死性胎盘炎，致使孕畜流炎，致使孕畜流产。 4.4.微生物学微生物学诊断断n鉴于布氏杆菌病有可能由于布氏杆菌病有可能由实验室感染所室感染所致，所以致，所以发达国家达国家规定凡涉及本菌的定凡涉及本菌的样本本检测，均，均应在在生物安全生物安全2 2级实验室室进行，行，凡涉及凡涉及本菌的培养本菌的培养，则需在需在生物安全生物安全3 3级实验室室内操作。内操作。n布氏杆菌病常表布氏杆菌病常表现为慢性或慢性或隐性感染，性感染，其其诊断和断和检疫主要疫主要依

43、靠血清学依靠血清学检查及及变态反反应检查。细菌学菌学检查仅用于用于发生流生流产的的动物和其它特殊情况。物和其它特殊情况。（1）细菌学检查）细菌学检查n病料最好用病料最好用采集采集流流产胎儿的胃内容物、胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流肺、肝和脾以及流产胎胎盘和羊水等。和羊水等。n也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其、骨髓和其它有局部病它有局部病变的器官。的器官。n显微微镜检查 病料病料可可直接涂片直接涂片染色染色镜检，作革作革兰氏和柯氏和柯兹洛夫

44、斯基染色洛夫斯基染色镜检。（2）分离培养鉴定 n无无污染病料染病料: :可直接划可直接划线接种于前述适宜培养基，接种于前述适宜培养基，n污染病料染病料: :则应接种到加有放接种到加有放线菌菌酮0.1mg/ml0.1mg/ml、杆菌、杆菌肽25 IU/ml25 IU/ml、多粘菌素、多粘菌素B 6 IU/mlB 6 IU/ml和加有色素的和加有色素的选择性性琼脂平板。均一式接两套份，分脂平板。均一式接两套份，分别置大气置大气环境及境及5%10% 5%10% CO2CO2环境，境，3737培养。每培养。每3d3d观察一次，如有察一次，如有细菌生菌生长，可挑可挑选可疑菌落做可疑菌落做细菌菌鉴定；如无

45、定；如无细菌生菌生长，可，可继续培养至培养至30d30d后，仍无生后，仍无生长者方可者方可认为阴性。阴性。n挑挑选可疑菌落，做涂片、染色和可疑菌落，做涂片、染色和镜检，确定，确定为疑似菌疑似菌后后进行行纯培养，再以布氏杆菌抗血清（高免血清或培养，再以布氏杆菌抗血清（高免血清或A A、M M单相血清，如不凝相血清，如不凝时，可再用，可再用R R血清）作玻片凝集血清）作玻片凝集试验。nPCRPCR法作快速法作快速诊断。断。（3）血清学检查）血清学检查n有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。体检查和病料中布氏杆

46、菌检查两类方法。n用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。因而具有较大实用价值。n荧光抗体技术荧光抗体技术n反向间接血凝试验反向间接血凝试验n间接炭凝集试验间接炭凝集试验n免疫酶组化法染色免疫酶组化法染色n动物在感染布氏杆菌动物在感染布氏杆菌715d可出现抗体，检测血清中可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。（4）变态反应检查）变态反应检查n皮肤变态反应一般在感染后的

47、皮肤变态反应一般在感染后的2025d出现，出现，因此不因此不适适宜作早期诊断。宜作早期诊断。n本法适于动物本法适于动物绵羊和山羊及猪绵羊和山羊及猪的大群检疫，主的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。要用于绵羊和山羊，其次为猪。n检测时，将布氏杆菌水解素检测时，将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，根皱襞部或猪耳根部皮内，24及及48h后各观察后各观察反应一次。反应一次。n若注射部发生红肿，即判为阳性反应若注射部发生红肿，即判为阳性反应。二、伯氏菌属二、伯氏菌属-鼻疽伯氏菌鼻疽伯氏菌n鼻疽伯氏菌旧名鼻疽假单胞菌，为马、鼻疽伯氏菌旧名鼻疽假单胞菌，为马、骡、驴等

48、骡、驴等单蹄兽鼻疽单蹄兽鼻疽的病原，也能感染的病原，也能感染人，其他家畜和多种野生动物，人，其他家畜和多种野生动物，n是一种人兽共患的重要病原。是一种人兽共患的重要病原。n1.1.形形态与染色：革与染色：革兰氏阴性氏阴性n2.2.培养及生化特性：培养及生化特性：专性需氧性需氧n3.3.致病性及毒力因子：致病性及毒力因子：马属属动物，人可物，人可感染感染n4.4.微生物学微生物学诊断：断：变态反反应；生物安全；生物安全等等级3 3级；血清学；血清学检查三、波氏杆菌：支气管败血波氏菌三、波氏杆菌：支气管败血波氏菌最初从犬中分离，可感染多种哺乳最初从犬中分离，可感染多种哺乳动物物n1.1.形形态与染

49、色：革与染色：革兰氏阴性氏阴性n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子：致病性及毒力因子： 犬犬传染性支气管炎染性支气管炎n4.4.微生物学微生物学诊断：断：细菌学菌学检查；血清学；血清学检查。第第5 5节 革革兰氏阳性无芽氏阳性无芽孢杆菌杆菌n李氏杆菌属李氏杆菌属-产单核核细菌李氏杆菌菌李氏杆菌 n可引起人和可引起人和动物的李氏杆菌病。物的李氏杆菌病。n1.1.形形态与染色：与染色： 革革兰氏阳性，无芽氏阳性，无芽孢n2.2.培养及生化特性培养及生化特性 培养基上培养基上长成露滴状小菌落，成露滴状小菌落， 型溶血型溶血n3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 多种多

50、种动物感染，物感染，败血症，流血症，流产等等n4.4.微生物学微生物学诊断断增菌后分离培养；增菌后分离培养；动物物试验：小鼠；血清学：小鼠；血清学鉴定定第第6节节 革兰氏阳性产芽孢杆菌革兰氏阳性产芽孢杆菌n芽芽孢杆菌属杆菌属-炭疽芽炭疽芽孢杆菌杆菌n梭菌属梭菌属-产气气荚膜杆菌膜杆菌一、芽一、芽孢杆菌属杆菌属-炭疽芽炭疽芽孢杆菌杆菌n1.1.形形态与染色与染色 菌体两端平切，培养基中呈菌体两端平切，培养基中呈竹竹节状，革状，革兰氏阳性氏阳性。n2.2.培养及生化特性培养及生化特性 粗糙型菌落粗糙型菌落n3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 是引起人和各种是引起人和各种动物炭疽的病原。物炭疽

51、的病原。n4.4.微生物学微生物学诊断断 严禁解剖禁解剖二、梭菌属二、梭菌属-产气气荚膜杆菌膜杆菌曾称曾称为魏氏梭菌。魏氏梭菌。n1.1.形形态与染色与染色n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 A A型菌引起人气性坏疽和食物中毒；型菌引起人气性坏疽和食物中毒；B B型菌引型菌引起羔羊痢疾；起羔羊痢疾；C C型菌引起型菌引起绵羊猝疽等；羊猝疽等；D D引起羔引起羔羊等羊等败血症；血症；E E引起引起犊牛、羔羊牛、羔羊肠毒血症。毒血症。n4.4.微生物学微生物学诊断断第第7节节 分枝杆菌属分枝杆菌属牛分枝杆菌牛分枝杆菌副结核分枝杆菌副结核分枝杆菌n本属菌

52、许多是人和多种动物的病原菌。本属菌许多是人和多种动物的病原菌。n对动物有致病性的主要是对动物有致病性的主要是n结核分枝杆菌结核分枝杆菌n牛分枝杆菌牛分枝杆菌n禽分枝杆菌禽分枝杆菌n副结核分枝杆菌副结核分枝杆菌一、牛分枝杆菌（一、牛分枝杆菌（M. bovis）n本菌与人的本菌与人的结核分枝杆菌（核分枝杆菌（M. M. tuberculosistuberculosis，简称称结核杆菌）和禽分核杆菌）和禽分枝杆菌（枝杆菌（M. avium M. avium ）许多特性相近，多特性相近，nCycle of Mycobacterium bovis transmission between cattle

53、and humans. The thickness of the arrows suggests probability. Adapted from Collins and Grange (1987). 1.形态与染色形态与染色n结核分枝杆菌核分枝杆菌为细长、直或微弯的杆菌，、直或微弯的杆菌，单在、少数在、少数成成丛，大小，大小为0.20.20.50.51.51.54.0m4.0m。牛分枝杆菌菌。牛分枝杆菌菌体体较短而粗，禽分枝杆菌呈多形性。短而粗，禽分枝杆菌呈多形性。n在在陈旧的培养基或干酪性病灶内的菌体可旧的培养基或干酪性病灶内的菌体可见分枝分枝现象。象。n与一般革与一般革兰阳性菌不同，本

54、菌的阳性菌不同，本菌的细胞壁不胞壁不仅有有肽聚糖，聚糖，还有特殊的糖脂。有特殊的糖脂。n糖脂成份有效地刺激哺乳糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免疫系物的免疫系统，分枝杆菌分枝杆菌因此被制成免疫佐因此被制成免疫佐剂得到普遍得到普遍应用，著名的弗氏佐用，著名的弗氏佐剂（FreundFreunds adjuvants adjuvant）即是例）即是例证。 2.培养与生化特性培养与生化特性n本菌本菌为专性需氧菌，性需氧菌，对营养要求养要求严格，格，最适最适pH 6.4pH 6.47.07.0，n最适温度最适温度为373737.537.5，在，在30303434可生可生长；低于；低于3030或高于或高于42

55、42均不均不生生长，但禽分枝杆菌可在，但禽分枝杆菌可在4242生生长。n在添加特殊在添加特殊营养物养物质的培养基上才能生的培养基上才能生长，但，但生生长缓慢慢，特，特别是初代培养，一是初代培养，一般需般需101030d30d才能看到菌落。才能看到菌落。 3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子n致病致病过程以程以细胞内寄生胞内寄生和形成局部病灶和形成局部病灶为特点。特点。n细菌主要通菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡，被巨噬呼吸道侵入机体肺泡，被巨噬细胞吞胞吞噬，但不被消化降解，相反在其内繁殖，形成病灶，噬，但不被消化降解，相反在其内繁殖，形成病灶，产生干酪生干酪样坏死。坏死。n坏死灶被吞噬坏死灶被吞噬

56、细胞、胞、T T细胞与胞与B B细胞等包胞等包围，形成，形成结核核结节。n牛分枝杆菌主要引起牛结核病，其他家畜、牛分枝杆菌主要引起牛结核病，其他家畜、野生反刍动物、人、灵长目动物、犬、猫野生反刍动物、人、灵长目动物、犬、猫等肉食动物均可感染。等肉食动物均可感染。n实验动物中豚鼠、兔有高度敏感性。实验动物中豚鼠、兔有高度敏感性。n对仓鼠、小鼠有中等致病力，对家禽无致对仓鼠、小鼠有中等致病力，对家禽无致病性。病性。4.微生物学诊断微生物学诊断n显微微镜检查 取患病器官的取患病器官的结核核结节及病及病变与非病与非病变交界交界处组织直接涂片，抗酸染直接涂片，抗酸染色后色后镜检，如，如发现红色成色成丛杆

57、菌杆菌时，可做，可做出初步出初步诊断。断。n分离培养分离培养 将病料中加入将病料中加入6 6 H H2 2SOSO4 4或或4 4 NaOHNaOH液液处理理15min15min后后，经中和、离心，取少中和、离心，取少许沉淀物接种在培养基斜面上，每份病料沉淀物接种在培养基斜面上，每份病料接接4 46 6管，管口封管，管口封严，置，置3737培养培养8 8周，每周，每周周观察一次，培养阳性察一次，培养阳性时，需，需进行培养特行培养特性和生化特性性和生化特性鉴定。定。n动物接种物接种 将上述将上述经处理的供分离培养用的病理的供分离培养用的病料接种于料接种于动物，皮下或腹腔注射物，皮下或腹腔注射0.

58、5ml0.5ml，n禽分枝杆菌可使禽分枝杆菌可使鸡致病；致病；结核杆菌核杆菌对豚鼠有豚鼠有较强的致病性，皮下注射的致病性，皮下注射3 35 5周可引起明周可引起明显病病变；n牛分枝杆菌牛分枝杆菌对兔有致病性，接种后兔有致病性，接种后3 3周至周至3 3个月个月死亡。死亡。n变态反反应 临床上最广泛床上最广泛应用的是用的是迟发性性变态反反应试验，即，即结核菌素核菌素试验，采用，采用PPDPPD皮内注射法，皮内注射法，n按我国按我国动物物检疫操作疫操作规程程规定，牛定，牛颈部皮内注射部皮内注射0.1ml0.1ml（1010万万IUIUmlml）72h72h后局部炎症反后局部炎症反应明明显，皮，皮肿

59、胀厚度差厚度差4mm4mm为阳性；阳性；n如局部炎症不明如局部炎症不明显，皮，皮肿胀厚度差在厚度差在2 24mm4mm间，为疑疑似；如无炎症反似；如无炎症反应，皮肤，皮肤肿胀厚度差在厚度差在2mm2mm以下，以下，为阴阴性。性。n凡判凡判为疑似反疑似反应牛，牛，30d30d后需复后需复检一次，如仍一次，如仍为疑似，疑似，经303045d45d再次复再次复检，如仍，如仍为疑似可判疑似可判为阳性。阳性。n血清学血清学检查 鉴于于结核病核病细胞免疫与体液免疫的分离胞免疫与体液免疫的分离现象，象，抗体阳性意味着病情抗体阳性意味着病情恶化，正化，正处于感染活于感染活动期，期，检测特异性抗体可特异性抗体可

60、诊断断结核病。核病。 酶联免疫吸附免疫吸附试验（ELISAELISA）是目前）是目前检测抗体抗体的的较好方法，决定好方法，决定ELISAELISA特异性的关特异性的关键是是选择结核杆菌特异性核杆菌特异性诊断抗原。断抗原。nPCR PCR 广泛广泛应用于于分离菌株及用于于分离菌株及结核病人的核病人的临床床样本（痰液）的本（痰液）的检测，特异性，特异性强而且快速。而且快速。二、副二、副结核分支杆菌核分支杆菌引起反引起反刍动物慢性消耗性物慢性消耗性传染病。染病。n1.1.形形态与染色与染色n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子致病性及毒力因子n4.4.微生物学微生物学诊断：

61、分离培养，断：分离培养，变态反反应；抗体抗体检测第第8 8节 螺旋体螺旋体猪痢短螺旋体猪痢短螺旋体n1.1.形形态与染色：存在与染色：存在2-42-4个弯曲；个弯曲；n2.2.培养及生化特性：培养及生化特性：严格格厌氧；氧；n3.3.致病性及毒力因子：引起猪痢疾，又致病性及毒力因子：引起猪痢疾，又名血痢、黑痢。名血痢、黑痢。n4.4.微生物学微生物学诊断断第第9 9节 支原体支原体一、一、鸡毒支原体，又名禽毒支原体，又名禽败血支原体。血支原体。n1.1.形形态与染色与染色n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子：感染致病性及毒力因子：感染鸡和火和火鸡，n4.4.微生物学

62、微生物学诊断：断：难以分离培养。以分离培养。二、猪肺支原体，二、猪肺支原体，n1.1.形形态与染色与染色n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子：只感染猪，引起猪致病性及毒力因子：只感染猪，引起猪喘气病。喘气病。n4.4.微生物学微生物学诊断断三、牛支原体三、牛支原体n1.1.形形态与染色与染色n2.2.培养及生化特性培养及生化特性n3.3.致病性及毒力因子：引起牛致病性及毒力因子：引起牛传染性胸染性胸膜肺炎，又称牛肺疫。膜肺炎，又称牛肺疫。n4.4.微生物学微生物学诊断断第第1010节 真菌真菌n一、白僵菌一、白僵菌引起家蚕的白僵病。引起家蚕的白僵病。n1.1.生生长发育周期及形育周期及形态特征特征n2.2.白僵菌的代白僵菌的代谢产物物n3.3.分生分生孢子的生存力与抵抗力子的生存力与抵抗力n二、蜜蜂球囊菌变种（蜜蜂病原）二、蜜蜂球囊菌变种（蜜蜂病原）谢谢 谢谢