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1、生物选修三易考知识点背诵专题1基因工程基因工程的看法基因工程是指依照人们的梦想，进行严格的设计，经过体外DNA重组和转基因技术，恩赐生物以新的遗传特色，创办出更符合人们需要的新的生物种类和生物产品。基因工程是在DNA分子水平进步行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。（一）基因工程的基本工具1. “分子手术刀”限制性核酸内切酶（限制酶）（1）根源：主假如从原核生物中分别纯化出来的。（2）功能：能够鉴识双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，所以拥有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段尾端平常有两种形式：黏性尾端和平尾端。2. “
2、分子缝合针”DNA连结酶(1) 两种DNA连结酶（EcoliDNA连结酶和T4-DNA连结酶）的比较：同样点：都缝合磷酸二酯键。差别：EcoliDNA连结酶根源于T4噬菌体，只好将双链DNA片段互补的黏性尾端之间的磷酸二酯键连结起来；而T4DNA连结酶能缝合两种尾端，但连结平尾端的之间的效率较低。(2) 与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只好将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的尾端，形成磷酸二酯键。DNA连结酶是连结两个DNA片段的尾端，形成磷酸二酯键。3. “分子运输车”载体（ 1）载体具备的条件：能在受体细胞中复制并坚固保留。拥有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。拥有标志基因，供
3、重组DNA的判断和选择。（ 2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体以外，并拥有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其余载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的构造基因。2. 原核基因采纳直接分别获取，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至9095DNA解链；第二步：冷却到5560，引物联合到互补DNA链；第三步：加热至7075，热坚固DNA聚合酶从引物初步互补链的合成。第二步
4、：基因表达载体的建立1. 目的：使目的基因在受体细胞中坚固存在，而且能够遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2. 构成：启动子停止子标志基因1（1）启动子：是一段有特别构造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶鉴识和联合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最后获取所需的蛋白质。（2）停止子：也是一段有特别构造的DNA片段，位于基因的尾端。（ 3）标志基因的作用：是为了判断受体细胞中能否含有目的基因，进而将含有目的基因的细胞优选出来。常用的标志基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_1. 转变的看法：是目的基因进入受体细胞内，而且在受体细胞内保持坚固和表达的过程。2. 常用
5、的转变方法：将目的基因导入植物细胞：采纳最多的方法是农杆菌转变法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原由是生殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转变方法是：先用Ca2+办理细胞，使其成为感觉态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感觉态细胞混淆，在必然的温度下促使感觉态细胞汲取DNA分子，达成转变过程。3. 重组细胞导入受体细胞后，优选含有基因表达载体受体细胞的依照是标志基因能否表达。第四步：目的基因的检测和表达1. 第一要检测转
6、基因生物的染色体DNA上能否插入了目的基因，方法是采纳DNA分子杂交技术。2. 其次还要检测目的基因能否转录出了mRNA，方法是采纳用标志的目的基因作探针与mRNA杂交。3. 最后检测目的基因能否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原抗体杂交。4. 有时还需进行个体生物学水平的判断。如转基因抗虫植物能否出现抗虫性状。（三）基因工程的应用1. 植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的质量。2. 动物基因工程：提升动物生长速度、改良畜产质量量、用转基因动物生产药物。3. 基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。（四）蛋白质
7、工程的看法蛋白质工程是指以蛋白质分子的构造规律及其生物功能的关系作为基础，经过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以知足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只好生产自然界已存在的蛋白质）2专题2细胞工程（一）植物细胞工程1. 理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵生殖细胞干细胞体细胞；植物细胞动物细胞2. 植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织试管苗植物体（2）用途：微型生殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。（ 3）地位：是培养转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3. 植物
8、体细胞杂交技术（1）过程：（ 2）引诱交融的方法：物理法包含离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为引诱剂。（ 3）意义：战胜了远缘杂交不亲和的阻拦。（二）动物细胞工程1. 动物细胞培养（1）看法：动物细胞培养就是从动物机体中拿出有关的组织，将它分别成单个细胞，此后放在适合的培养基中，让这些细胞生长和生殖。（ 2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶办理分别成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞从头用胰蛋白酶或胶原蛋白酶办理分别成单个细胞连续传代培养。（3）细胞贴壁和接触控制：悬液中分其余细胞很快就
9、贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不停增添，当贴壁细胞分裂生长到表面互相控制时，细胞就会停止分裂增殖，这类现象称为细胞的接触控制。（ 4）动物细胞培养需要知足以下条件：无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌办理。平常还要在培养液中增添必然量的抗生素，以防培养过程中的污染。其余，应按期改换培养液，防备代谢产物累积对细胞自己造成危害。营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。平常需加入血清、血浆等天然成分。3温度：适合温度：哺乳动物多是36.50.5；pH：7.27.4。气体环境：2.动物体细胞核移植技术和克隆动物95%空气5%CO2。O2是细胞代谢所必要的，C（1）哺乳动物
10、核移植能够分为胚胎细胞核移植O2的主要作用是保持培养液的pH。（比较简单）和体细胞核移植（比较难）。（5）动物细胞培养技术的应用：（2）采纳去核卵(母)细胞的原由：卵(母)细胞制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有比较大，简单操作；卵(母)细胞细胞质多，营毒物质、培养医学研究的各样细胞。养丰富。细胞交融的原理细胞交融的方法引诱手段用法植物体细细胞膜的流动性去除细胞壁后引诱离心、电刺激、战胜了远缘杂交的胞杂交原生质体交融振动，聚乙二醇不亲和性，获取杂等试剂引诱栽种株动物细胞细胞膜的流动性使细胞分别后引诱除应用植物细胞制备单克隆抗体的交融细胞交融杂交锋段外，再技术之一加灭活的病毒诱导抗原注入小鼠体内
11、分别B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞交融杂交瘤细胞细胞培养选择培养细胞注入小鼠培养基体内培养体外培养从腹水提取从培养液提取单克隆抗体（3）体细胞核移植技术的应用：加快牲畜遗传改良进度，促使良畜群繁育；保护濒危物种，增大存活数目；生产难得的医用蛋白；作为异种移植的供体；用于组织器官的移植等。4（ 4）体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺点等。3. 动物细胞交融动物细胞交融也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞联合形成一个细胞的过程。交融后形成的拥有本来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。动物细胞交融与植物原生质体交融的原理基真同样，引诱动物细胞交融的方法与植物
12、原生质体交融的方法近似，常用的引诱要素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。动物细胞交融的意义：战胜了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培养的重要手段。4. 单克隆抗体抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分别出的抗体产量低、纯度低、特异性差。杂交瘤细胞的特色：既能大批生殖，又能产生专一的抗体。单克隆抗体的长处：特异性强，敏捷度高，并能大批制备。单克隆抗体的作用：作为诊疗试剂：正确鉴识各样抗原物质的细微差别，并跟必然抗原发生特异性联合，拥有正确、高效、简单、迅速的长处。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少许用于治疗其余疾病。专题3胚胎工程（一）动物胚胎发育的基本过程1、胚胎工程是指对动物初期胚胎或配子所进行的多种显微操作和办理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎切割、胚胎干细胞培养等技术。经过办理后获取的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后辈，以知足人类的各样需求。2、动物胚胎发育的基本过程（ 1）受精场所是母体的输卵管上段。（ 2）卵裂期：特色：细胞有丝分裂，细胞数目不停增添，但胚胎的整体体积其实不增添，或略有减小。（3）桑椹胚：特色：胚胎细
