广陈皮中黄酮类化合物和挥发油成分及其活性研究摘要陈皮（Peｒiｃaｒpi吼Ｃitｒi Rｅticulｔae）是芸香科植物橘及其栽培变种的干燥果皮， 作为我国传统药材收载于《中国药典》主产于广东新会的茶枝柑是陈皮道地药材， 因其具有理气健脾、燥湿化痰等功效而广泛应用于食品和药品中本文立足于对广陈皮中的黄酮类化合物和挥发油两大类活性成分进行系统探讨，对广陈皮中黄酮类 化合物进行分离纯化和结构鉴定,对比分析不同贮藏年份、不同采收期的广陈皮和 不同柑橘皮品种中黄酮类化合物组分和含量差异及其抗氧化活性差异，并研究6种黄 酮单体的抗氧化活性、黄酮单体两两组合及有机酸、氨基酸分别与广陈皮黄酮模拟 体系之间的抗氧化协同作用.同时，对不同贮藏年份广陈皮挥发油的成分进行分析 鉴定,并比较各挥发油的抗氧化活性和抑菌活性差异为“陈久者良＂和“道地性" 提供理论支持主要研究结果如下： １.广陈皮中黄酮类化合物的分离纯化和结构鉴定比较了广陈皮不同极性部位总黄酮含量及ＤPPH自由基清除效果，筛选出乙酸乙酯部总黄酮含量最高且活性最 强.采用液相色谱.质谱联用技术对广陈皮乙酸乙酯部含有的黄酮类化合物进行分 析，初步鉴定出其中的８种黄酮类化合物，分别为：葡萄糖基芹菜素、橙皮苷、 3’，4’,5，7，8.五甲氧基黄酮、３’,４'，5，6，７—五甲氧基黄酮、川陈皮素、4 ７，5,7，8一四甲氧基黄 酮、3，5,6,７,8，3’，４’。
七甲氧基黄酮和橘皮素同时，采用传统分离纯化方法对乙酸乙 酯部进行分离，得到6个化合物,经理化鉴定和光谱解析(1HNＭR、１３C-ＮMＲ、ＭS)鉴定其均为黄酮类化合物,分别为:橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、56,7， ８，3',４'．五甲氧基黄酮、４’，5,7，8．四甲氧基黄酮和３’，4'，５，7，8—五甲氧基黄酮2．不同贮藏年份、不同采收期广陈皮和不同品种柑橘皮黄酮含量的比较.以分 离出的6种黄酮类化合物为标准品，建立HPＬC定量分析广陈皮黄酮类化合物方法 分别分析了不同贮藏年份广陈皮、不同采收期广陈皮和不同品种柑橘皮中主要黄酮 类化合物含量结果表明，随贮藏时间的增加，广陈皮中各主要黄酮类化合物总量 呈减少趋势；主要黄酮类化合物总含量和橙皮苷含量随采收期推迟而显著减少 (p＜0．０5）；不同品种柑橘皮主要黄酮类化合物含量差异较大3．不同贮藏年份、不同采收期广陈皮和不同品种柑橘皮抗氧化活性的比较采用ＤPPH法、F凡心法和ABTＳ法分别分析比较了不同贮藏年份、不同采收期广陈Ｔ / 华中农业大学2０1l届博士学位论文皮以及不同品种柑橘皮的抗氧化活性，并探讨黄酮类化合物含量与抗氧化性之间的 相关性。
结果表明，广陈皮抗氧化能力随贮藏时间增加总体呈下降趋势，不同贮藏 年份广陈皮的总黄酮含量与DPPH自由基清除能力和ＡＢTS自由基清除能力呈正相 关，而与Ｆ扎心铁还原能力相关性不明显.不同采收期广陈皮抗氧化能力为:青皮>微红皮〉大红皮.不同采收期广陈皮的总黄酮含量与DPPＨ自由基清除能力、 ABＴS自由基清除能力和F融址铁还原能力呈正相关性不同品种柑橘皮抗氧化能 力存在一定的差异，南丰桔的抗氧化能力最强对不同品种柑橘皮来说,其总黄酮 含量和DPPH自由基清除能力、ＡBTS自由基清除能力和F凡心铁还原能力之间的 相关性都不强，其中,总黄酮含量和DPＰH自由基清除能力之间的相关系数最大，为0.5044４．广陈皮黄酮类化合物体外抗氧化活性协同效应采用ABTS法和F黜址法 测定了广陈皮中６种黄酮化合物单体的抗氧化活性，分析了单体化合物两两之间、5 种有机酸和2０种氨基酸分别与广陈皮黄酮模拟体系之间的抗氧化协同效应.结果表 明，6种黄酮类化合物中,橙皮苷的抗氧化活性最强，其次是5．羟基．６，7，８,3’，4’.五 甲氧基黄酮单体化合物两两组合时,ABTS值除4’，5,７,8四甲氧基黄酮和５羟基．6,7,8，3’,4’.五甲氧基黄酮两两混合表现为协同效应外，其它4种单体化合物均表现 为拮抗效应，当川陈皮素与其他化合物混合时拮抗效应较理论值显著增强（ｐ
各有机酸和氨基酸在广陈皮黄酮类化合物模拟体系中主要表现为拮抗效应,仅组氨 酸和精氨酸显示出协同效应广陈皮挥发油成分分析比较比较cleＶｅngｅr法和改进的Cｌevｅnger法提取 广陈皮挥发油的出油率,结果表明,采用改进的Ｃｌeｖｅｎｇｅr法可显著提高广陈皮挥 发油出油率（p〈0．０5）采用ＧＣ．ＭS分析不同贮藏年份广陈皮挥发油的成分及含量 变化，结果表明,不同贮藏年份广陈皮挥发油中共检测出53种成分，萜烯烃类化合 物26种、醇类化合物10种、醛类化合物有10种、酯类化合物3种、酮类化合物2 种和酚类化合物1种萜烯烃类是挥发油的主要成分，D．柠檬烯、B．月桂烯、丫松 油烯、伐.蒎烯、p．蒎烯和异松油烯是萜烯烃类中最主要的成分.D.柠檬烯的含量最 高，占挥发油中挥发性物质总量的68.２％—76从CllaCｌli 2008，ChaCｌli 20０４，ChaＣK 2０0l，ＣllaClｌi 199８,CllａＣlｌi 19９4挥发油 中分别检测出５3，48，４6，47和45种挥发性物质随着贮藏年份的增加,挥发性物质Ⅱ广陈皮中黄酮类化合物和挥发油成分及其活性研究减少.其中，Ｄ一柠檬烯和p.月桂烯含量逐渐降低，而a.蒎烯和Ｂ.蒎烯含量逐渐增加。
６．不同贮藏年份广陈皮挥发油抗氧化活性和抑菌活性比较采用DPPＨ法、ABTS法和F黜廿法分析不同贮藏年份广陈皮挥发油的体外抗氧化活性，采用滤纸片 平板扩散法和测定最小抑菌浓度来确定挥发油的抑菌能力结果显示，不同贮藏年 份广陈皮挥发油抗氧化活性变化较大,仅F＆妤值是随着贮藏时间的增加而增加的 广陈皮挥发油对11种供试菌种有不同程度的抑制作用,对革兰氏阳性菌及真菌的抑 制效果更好不同贮藏年份广陈皮挥发油的抑菌效果差异不大. 关键词:广陈皮；黄酮类化合物;抗氧化活性；挥发油成分;协同效应UI华中农业大学2０ｌl届博士学位论文Ａbstrａctｎ，-耙叩f删Ｃ删Ｒｅ虎洳纰(尸傩)ｉs也e ｄｒied ripe peel of C咖淞,P如池幻Ｂｌａllc０ anｄ itS CｕltiVａｒs,wｍch haS beｅn妇wleｄgｅｄ by也e Ｐｅopk’s蛐liｃ oｆ瓯Ila阚acopoe远觚ｄ l粥been used hｌ tr2曲tiｏllａｌ Ct血ｅ∞heｒｂ2Lｌ medickｓ f-０r a lonｇ t硫e.ａ护淞旭虎’“肠幻‘(彻c厅f'，m幽咀y pｒoducｅd in Ｘjnllui co咖哆of G啪gｄｏｎｇ Ｐr0Vince iｎ C曲坞is reｇarded勰a ｇenuinｅ尸CＲ。
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