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显微镜原理、调试、使用和保养

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显微镜原理、调试、使用和保养_第1页
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显微镜原理、调试、使用和保养3. 透射光光源〔tranilluminator〕 透射光光源由灯室〔lamp housing〕、灯座〔lamp socket〕、卤素灯〔halogen lamp〕、集光与聚光系统〔lamp collector and lamp condenser〕及其调整装置组成4. 透射光光源与反射光光源的转换开关〔toggle switch〕 这是一代 AXIO 系列显微镜特有的装置,透射光和反射光可通用当具 有透/反两用的配置时,利用这一转换开关能便利而又快速的使透射光和反射光相互转换在纯 透射光的配置中,这一开关就改为电源开关5. 电源开关〔mains switch〕与亮度调整旋钮〔brightness control〕 电源开关用来接通或切断显微镜所需用的沟通电源电源开关旋钮也可调整照明光源的亮度,使所观看的视域可随时获得适当的亮度,可调范围为3-12V作显微照相时,可依据曝光以及彩色底片色温的要求来调整灯光的亮度当预备关掉电源之前,应先将亮度调整旋钮调到最小6. 粗、微调焦旋钮〔coaxial coarse/fine focusing controls〕 调焦旋钮转动时带动燕尾导板上下移动,而导板上则装有物台托架和聚光镜托架,从而使物台趋向或远离物镜到达调焦 的效果。

7. 透射光用的滤光片选择按钮〔push buttons for filter magazine〕 透射光显微镜检方法所需用的一组滤光片已安装在显微镜的底座内,通 过底座外的按钮就可以依据不同的需要来选择适用的一块或一组滤光片通常的滤光片配套有:(1) 蓝色色温转换滤光片:用来把光源的色温由3200K 转换成日光型彩色底片所需的 5500K 色温;(2) 绿色滤光片:用来增加相差观看方法中成像的反差,或者以黑白底片作显微照相时,可以提 高片成像的反差;(3) 浅灰色滤光片:是透光率为 50%的中性减光滤光片,可把视野的亮度减弱一半;(4) 灰色滤光片:是透光率为 25%的中性减光滤光片,可把视野的高度减弱 75%;(5) 透光率仅为 6%的中性减光滤光片,可把视野的亮度变得相当暗,95%以上的光都已被吸取掉8. 光源的视场光阑〔luminuos field diaphragm〕 视场光阑是显微镜照明光路系统中的重要部件之一,它只能依据库勒照明系统的 要求来进展调整,视场光阑不行以任意开大,但 要依据使用的物镜倍数来调整适当的大小视场 光阑的主要功用有:(1) 掌握杂散光在成像光路系统中的影响,特别是免除杂散光比照相系统的干扰,使显微照相的 底片不至于蒙上一层灰雾;(2) 掌握照明光束的大小,使所观看的视域能受到均匀的照明;(3) 在荧光显微镜检方法中,可以把激发光限制在所需激发样品的视域范围内,以防止视域外的 样品过早受到激发。

9. 聚光镜系统〔condenser system〕 聚光镜系统是照明光路系统中的重要部件之一,它也只 能依据库勒照明系统的调整要求来进展调整聚光镜系统调整的好坏,可以直接影响显微镜视域中照明的均匀性,也可影响显微镜的区分力,还 可以直接掌握显微照相底片上的反差聚光镜系 统通常由以下几个部件组成:(1) 聚光镜本体〔condenser〕 可以是简洁的阿贝聚光镜,也可以是消球差-消色差的优质聚光镜,另外还有一种是消退了内应力的偏光聚光镜聚光镜的重要参数之一是数值孔径〔NA〕, 通常为 0.32;这样的数值孔径太小,只能与以下的物镜协作使用,因此需配用前端透镜来提高数值孔径,以便与不同倍数的物镜敏捷协作使 用;(2) 前端透镜〔front lens〕 前端透镜本身的数值孔径通常为 0.63、0.90、1.30 或 1.40,它要附装在聚光镜本体上,可以便利地摆进或摆出光路最常用的前端透镜数值孔径为 0.90,当它摆入光路时,可以和 10×及以上的物镜配用, 摆出光路时可以和 10×以下的物镜如 6.3×、5× 及 2.5×等物镜配用;(3) 聚光镜的孔径光阑〔aperture diaphragm〕孔径光阑实际上是一个可变光圈,它是显微镜照明光路系统中的又一个重要部件,在透射光明视野法、微分干预相衬法以及偏光法所使用的聚光 镜中,都装有孔径光阑。

它可以影响显微镜在作 观看时的区分力;直接掌握显微照相底片上的反 差;可用来调整聚光镜的数值孔径,协作所用物 镜的数值孔径,以取得最正确的区分本领,或最大 的区分本领;还可以使光源的发光体成像于孔径 光阑所在的平面上,从而满足库勒照明系统的前 提条件在实际操作中,调整聚光镜孔径光阑可以转变显微镜中所观看到的视野亮度,这是由于历史上对 聚光镜孔径光阑的误会所造成的错误用法这里 要特别强调:不应当用聚光镜的孔径光阑来调整 视野中的亮度、更不应当用调整聚光镜位置凹凸 的方法来调整视野中的亮度!以往的错误用法希 望能在实际操作中订正过来4) 转盘〔turret〕 在多用途聚光镜系统中,为便利才把明视野的孔径光阑、暗视野的中心光挡、相差法所需用的各种不同直径的环状光圈、 微分干预相衬法用的 DIC 棱镜及其孔经光阑等部件装在转盘上再嵌入到聚光镜本体的座子内,使用时转动转盘就可以选用不同显微镜检法所适用的聚光镜,便利而又快捷聚光镜系统有两个调整装置:a. 聚光镜的调中螺丝〔centering screws〕 调中螺丝通常为 1 对,位于聚光镜托架前方的左右测和环形燕尾槽中的调中螺丝成三足鼎立之势,可以聚光镜前后、左右调整,使聚光镜的光轴与照明光路、成 像光路合轴;b. 聚光镜托架的上下调整装置〔vertical adjustment of condensercarrier〕: 利用这个调整装置,可使聚光镜的位置作上下调动,使视场光阑经过聚光镜在样品 视野中的成像调到最为清楚,光阑像的位置也可 利用托架上的调中螺丝来进展调中,从而满足库 勒照明系统调整的要求。

10. 机械移动式载物台〔specimen stage〕 载物台可以承载样品,装有可在水平方向上作前后、左右移动的调整装置,有的还可以在水平方 向上作大约 100 度的旋转,以便使样品能更好地与显微照相的取景框相适配11. 物镜转换器〔nosepiece〕 物镜转换器安装在滑插式燕尾槽座上,已作了准确的对中可快速更换物镜常用的有6 个、5 个及 4 个孔位的物镜转换器12. 物镜〔objectives〕 物镜是显微镜的核心光学部件,显微镜的放大倍数、区分本领、色差与像差的校正状况、工作距离等,都有直接由物镜来打算衡量物镜质量的根本参数主要有:a. 色差消正的程度〔或级别〕;b. 像场平坦的程度;c. 所使用的玻璃材料数值孔径〔NA〕是物镜最重要的参数,数值孔径越大,区分率越高 目前物镜的数值孔径最大只有 1.30依据物镜 色差和像差校正的程度,物镜可以分为以下类 别:(1) 消色差物镜〔achomats〕 通常对红光与蓝光两种色光作了色差校正,但视域中像场的平 坦程度并未作过完善的校正,因此只能作一般的 观看应用在偏光显微镜中,由于需要消退物镜 内各个镜片的内应力,反而需要利用这种镜片数 目不多的物镜来做偏光物镜。

2) 有限平像场消色差物镜〔flat-fieldachromats〕 这也是对两种色光作了校正的消色差物镜,但视域范围内像场的平坦程度只作了 有限范围内的校正,通常在显微照相取景框范围内像场是平坦的,以确保显微照相对焦的清楚,取景框范围以外,往往不肯定能保证同样的清楚 度适用于常规检验而又需要作显微照相的工作 中3) 完善平像场消色差物镜〔plan-achromats〕 这也是对两种色光作了校正的高级消色差物镜, 主要特点是像场在整个视域中作了完善的校正, 适合于作要求较高的显微镜检工作,特别是作显微照相效果更好由于这种物镜仍承受常用的光学玻璃,不适宜作荧光等这一类弱光的观看和照相4) 萤石玻璃消色差物镜〔neofluar〕 这也是对两种色光作了色差校正的消色差物镜,其中全 部或局部镜片则承受了可透过近紫外光〔波长约 为 365nm〕的萤石玻璃〔即氟化钙晶体〕来制造因此特别适合于作荧光与相差方法的观看与 显微照相,也可用在偏光显微镜中 (5) 完善平像场复消色差物镜〔plan-opo-chromats〕 这是最高一级的消色差物镜,对红、绿、蓝 3 种颜色都作了很好的色差校正,而视域中的像也作 了完善的校正,数值孔径比萤石物镜大,可应用 于要求极高的显微观看与显微照相中,但价格十分昂贵,由于所使用的镜片数目多达 12 片,光能损失较大,不宜用作荧光观看与照相。

6) 已消退内应力又可以调整中心的物镜〔pol Z objectives〕 这是一种适用于作偏光观看的物镜,是从以上所介绍的几种物镜中选择出来的, 在装配时特别留意消退了其中的内应力,以免内应力所引起的干预条纹干扰了偏光样品中真正的干预条纹7) 完善平像场萤石消色差多种介质浸没式物镜〔 plan-neofluar imm.〕 这是一种型物镜,承受萤石玻璃制造其中全部或局部镜片,成像质量特别光明,反差格外好,色差接近于复消色差,因此又属于半复消色差物镜数值孔径特别大,透光力量强,而且区分率格外好最大的 特点是可用好几种浸没介质,如常用的浸没油、 甘油、蒸馏水等,既可使用权盖玻片也可以不使用这种物镜制成干式物镜时,可加上校正环, 用来校正盖玻片的厚度不均匀性,以消退盖玻片厚度不规章造成的成像失真,对于厚度在0.12-0.22mm 之间的盖玻片都可以作相应的校正1986 年以来,德国蔡司公司推出的一代光学显微镜,其中的物镜突破了传统光学显微镜的概念,承受了无限远色差校正的光学系统〔infinity color-corrected system,简称 ICS 物镜〕,其特点是:由物镜射出的成像光束是一束平行光, 可在成像光路中按需要插入任意多的光学部件而不影响成像质量。

在显微镜镜体内有一特制的镜筒透镜〔tube lens〕与物镜相配,两者结合起来把物镜的色差与像差都作了格外完善的校正,而且物镜的视域相当宽阔,比传统物镜的视域扩大约 40% 13. 荧光滤光片组插板的插口〔slot for thefluorescence slider〕 这是为作荧光观看时插入荧光滤光片组插板预留的插口14. 勃氏镜插板的插口〔slot for Bertcand-lens slider〕 这是为作偏光观看时插入勃氏镜插板预留的插口,勃氏镜是偏光显微镜中用作锥光干预图试验的重要部件15. 补色器插板的插口〔slot for auxiliary objects〕 这是当作微分干预相衬观看和偏光需参加的各种补色器预留的插口16. 双目镜筒或带照相镜筒的双目镜筒〔binocular tubes or binocular phototubes〕 用来安放目镜及照相装置为便于观看,镜筒制成具有肯定倾斜角度〔30°或 45°〕,设有瞳距调整装置,可在 55°至 75°范围内调整,以适合不同使用者两眼瞳孔距离双目镜筒内装有一些折光和分光棱镜,能把从物镜出来的一束成像光束等分成两局部,分别由两个目镜作观看。

带照相镜筒的双目筒一般在右测装有光束安排棱镜 的拉杆,把它全部推入时只作观看,拉出来则一边观看一边照相,或全部作显微照相17. 目镜〔eyepieces〕 目镜是显微镜中把物镜所成的像作再一次放大的光学部件,显微镜的 总放大倍数通常就是物镜与目镜放大倍数。

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