葡萄糖的检测报告实验目的实验目的1）通过葡萄糖杂质检查，了解一般杂质检查的项目、方法和意义2）掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属及砷盐限度检查的原理和方法背景背景葡萄糖是一种含醛基的六碳糖，分子式为C6H12O6，是生物体内最主要的单糖其主要功用是提供机体生理活动所需的能量已知1mol葡萄糖彻底氧化放能2870kJ (686kCal)，占机体所需总能量的70%80%无色或白色结晶粉末甜度约为蔗糖的70%熔点146(分解)密度(25) 1.544g/cm3溶于水，稍溶于乙醇，不溶于乙醚有还原性，能还原斐林溶液有右旋光性可由淀粉经稀硫酸水解制得葡萄糖理化性质葡萄糖理化性质性状：无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜，有吸湿性，易溶于水旋光性旋光性-D-葡萄糖在20时的比旋光度数值为+52.2溶解度溶解度在20时单一的葡萄糖溶液最高浓度为50%甜度甜度-D-葡萄糖的比甜度为0.7黏度黏度葡萄糖的黏度随着温度的升高而增大依据费歇尔投影式，氧化度高的碳原子在上方，最下面的手性碳原子上的横向基团，在右侧为D型，在左侧为型哈沃斯式C5取代基在环面上方为D型，在下方为L型葡萄糖的结构特点葡萄糖的结构特点1、多羟基化合物，极性大。
2、四个手性碳原子，具旋光性3、含醛基4、含一分子结晶水一、仪器、试药准备及试液的配制1、仪器的准备干燥试管、电子或分析天平(感量0.1mg)、纳氏比色管、水浴锅、高温炉2、试药的准备稀硝酸、硝酸银、稀盐酸、氯化钡、硫酸钾、硫氰酸铵、硫酸铁铵、硫代乙酰胺、醋酸铵、硝酸铅3、试液的配制(1)稀硝酸 取硝酸105mL,加水稀释至1000mL,即得本液含HNO3应为9.5%10.5%2)硝酸银试液 取硝酸银17.5g,加水适量使溶解成1000mL,摇匀本液浓度为0.1mol/L3)标准氯化钠溶液 称取氯化钠0.165g,置1000mL容量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液临用前,精密量取贮备液10mL,置100mL容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL相当于10g的Cl-)4)稀盐酸 取盐酸234mL,加水稀释至1000mL,即得本液含HCl应为9.5%10.5%3、试液的配制(5)标准硫酸钾溶液 称取硫酸钾0.181g,置1000mL容量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL相当于100g的)6)硫氰酸铵溶液 取硫氰酸铵30g,加水适量使溶解成100mL,摇匀,即得。
本液浓度为30%7)标准铁溶液的制备 称取硫酸铁铵0.863g,置100mL容量瓶中,加水溶解后,加硫酸2.5mL,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液临用前,精密量取贮备液10mL,置100mL容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL相当于10g的Fe)3、试液的配制(8)硫代乙酰胺试液 称取硫代乙酰胺4g,加水使溶解,稀释至100mL,置冰箱中保存临用前,取混合液(由1mol/L氢氧化钠溶液15mL、水50mL、甘油20mL混合组成)5.0mL,加上述硫代乙酰胺溶液1.0mL,置水浴加热20s,冷却,立即使用9)醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g,加水25mL溶解后,加7mol/L盐酸溶液38mL,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH至3.5,用水稀释至100mL,即得10)标准铅溶液的制备 称取硝酸铅0.160g,置1000mL容量瓶中,加硝酸5mL与水50mL溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液临用前,精密量取贮备液10mL,置100mL容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL相当于10g的Pb2+)二、检验内容葡萄糖要进行氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、干燥失重、炽灼残渣等一般杂质检查,同时检查溶液的澄清度与颜色(目的是检查水不溶性物质或有色杂质)、乙醇溶液的澄清度(目的是检查醇不溶性杂质,如糊精)、蛋白质、亚硫酸盐与可溶性淀粉(因为制备时使用的酸可能带有亚硫酸盐,而可溶性淀粉为引入的中间体)。
为什么葡萄糖的质量标准中没有含量测定？因为全检有一项是比旋度，由公式tD=(100)/(LC)可知，浓度已知，溶液体积也已经知道，因而已经可以求出葡萄糖含量所以全检中不用再进行含量测定检验项目中，任何一项不符合规定，则不可药用鉴别】（1）取本品约0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀检查】1、溶液的澄清度与颜色取本品5.0g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10mL,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液中国药典(2020版)附录比较,不得更浓;如显色,与对照液(取比色用氯化钴溶液3.0mL,比色用重铬酸钾溶液3.0mL与比色用硫酸铜溶液6.0mL,加水稀释成50mL)1.0mL加水稀释至10mL比较,不得更深2、乙醇溶液的澄清度取本品1.0g,加乙醇20mL,水浴加热回流约40min,溶液应澄清3、氯化物原理：氯化物检查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量取本品0.6g,加水溶解,配成约25mL溶液(溶液如显碱性,可滴加硝酸使遇pH试纸显中性),再加稀硝酸10mL;溶液如不澄清,应滤过。
置于50mL纳氏比色管中,加水使成约40mL,摇匀,即得供试品溶液;另取标准氯化钠溶液6.0mL,置于50mL纳氏比色管中,加稀硝酸10mL,加水配成约40mL溶液,摇匀,即得对照品溶液于供试品溶液与对照品溶液中,分别加入硝酸银试液1.0mL,用水稀释至50mL,摇匀,在暗处放置5min,同置于黑色背景上,从比色管上方向下观察、比浊,供试品溶液不得比对照品溶液更浓(0.01%)4、硫酸盐原理：硫酸盐检查法是利用硫酸根离子与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较，以判断药物中硫酸盐是否超过限量取本品2.0g,加水溶解配成约40mL(溶液如显碱性,可滴加盐酸使遇pH试纸显中性);溶液如不澄清,应滤过置于50mL纳氏比色管中,加稀盐酸(9.5%10.5%)2mL,摇匀,即得供试品溶液另取标准硫酸钾溶液2.0mL,置于50mL纳氏比色管中,加水配成约40mL溶液,加稀盐酸2mL,摇匀,即得对照品溶液于供试品溶液与对照品溶液中,分别加入25%氯化钡溶液5mL,用水稀释至50mL,充分摇匀,放置10min,同置于黑色背景上,从比色管上方向下观察、比浊,供试品溶液不得比对照品溶液更浓(0.01%)。
5、干燥失重取本品1-2g,平铺在与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,加盖,精密称定将称量瓶放入洁净的烘箱或干燥器中进行干燥时,取下瓶盖,置于称量瓶旁,放入105干燥箱中干燥取出后迅速盖好瓶盖,置于干燥器内放冷至室温,迅速精密称重(放置时间与称重顺序与空称量瓶一致)于105干燥箱中干燥至恒重,即得减失质量不得超过9.5%6、铁盐原理重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质取本品2.0g,加水20mL溶解,置于50mL纳氏比色管中,加硝酸3滴,缓缓煮沸5min,冷却,加水稀释使成45mL加硫氰酸铵溶液(30100)3.0mL,摇匀,如显色,与标准铁溶液2.0mL用同一方法制成的对照液比较,不得更深(0.001%)7、重金属、原理：重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质取25mL纳氏比色管两支,甲管中加标准铅溶液2.0mL与醋酸盐缓冲液(pH为3.5)2mL后,加水稀释至25mL取本品4.0g,置于乙管,加水溶解后,加醋酸盐缓冲液(pH为3.5)2mL,用水稀释至25mL若供试液带颜色,可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液,使之与乙管一致。
再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL,摇匀,放置2min,同置白纸上,自上向下透视,乙管中显出的颜色与甲管比较,不得更深(含重金属不得超过百万分之五)8、炽灼残渣取本品1.02.0g置于已炽灼至恒重的坩埚中,精密称定,缓缓炽灼至完全炭化,放冷至室温,加硫酸0.51.0mL使恰湿润,低温加热至硫酸蒸气除尽后,放入高温炉中,于700800炽灼使完全炭化,移置干燥器内,放冷,精密称定再于700800炽灼至恒重,即得(0.1%)对数据进行处理，生成报告四、注意事项(1)限度检查应遵循平行操作原则 即供试管与对照管的实验条件应尽可能一致,包括实验用具的选择、试剂与试液的量取方法及加入顺序、反应时间的长短等2)比色、比浊前应使比色管内试剂充分混匀 比色方法是将两管同置于白色背景上,从侧面或自上而下观察;或将两管同置于黑色背景上,从上向下垂直观察所用比色管刻度高低差异不应超过2mm使用过的比色管应及时清洗,注意不能用毛刷刷洗,可用铬酸洗液浸泡3)检查份数 一般情况下可取1份供试品进行检查如结果不符合规定或在限度边缘时,对供试品和对照品各复检2份,方可判定四、注意事项(4)炽灼残渣炭化时应将坩埚斜置,先滴加少量硫酸(94.5%95.5%),使样品部分湿润,然后小火缓缓炭化,稍冷,再补加数滴硫酸,继续小火炭化至硫酸蒸气完全除尽。
切不可直接加热坩埚底部使检品全部受热引起泡腾,所用的硫酸应做空白试验当取出经高温灼烧的坩埚时,应先将坩埚钳预热取出的坩埚应稍冷后再置于干燥器的中间,切勿靠壁放置5)重金属 在pH为33.5时PbS沉淀较完全。