链球菌属•分布:自然界、人和动物肠道、健康人鼻咽部•所致疾病:致病链球菌引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病生物学性状•形态染色•培养特点•生化反应•抗原构造•分类•抵抗力形态染色•革兰阳性球菌,链状排列,无鞭毛,无芽孢,可形成荚膜 在液体培养基中易形成长链 致病性强的菌株多为长链 在脓汁标本中多为短链链球菌电镜图链球菌革兰染色培养特点--生长条件•营养要求高,在含血液、血清培养基上生长良好•需氧、兼性厌氧•D群链球菌可在10℃、45 ℃生长培养特点--生长现象•液体培养基:呈沉淀生长现象•血平板:灰白色、细小、圆形、光滑的、有不同溶血现象的菌落分类分类菌落特征菌落特征甲型(甲型(α)溶血性链)溶血性链球菌球菌灰色、针尖状菌落、周围有草绿灰色、针尖状菌落、周围有草绿色溶血环(色溶血环( α溶血)溶血)乙型(乙型(β)溶血性链)溶血性链球菌球菌灰白色、细小菌落、周围有宽大灰白色、细小菌落、周围有宽大透明溶血环(透明溶血环( β溶血溶血 ))丙型(丙型(γ)链球菌)链球菌灰白色小菌落、无溶血环灰白色小菌落、无溶血环链球菌在血平板上菌落特征甲链乙链丙链分类--根据溶血现象分类•甲型链球菌:属条件致病菌•乙型溶血性链球菌:致病力强•丙型链球菌:无致病力分类--根据抗原构造分类•群特异性抗原(C抗原):细胞壁多糖抗原,可将链球菌分为20群(A、B、C、D、E、D、E等),引起人类感染的链球菌90%为A群。
•型特异性抗原(表面抗原):细胞壁蛋白抗原,有M、T、R、S四种,根据M抗原不同,可将A群分为100型生化反应•触酶试验(-)•A群链球菌:杆菌肽敏感试验(+)•B群链球菌:CAMP试验(+)、马尿酸钠水解试验(+)•D群链球菌:胆汁七叶苷试验(+)肺炎链球菌生物学特性•形态染色:革兰阳性球菌,矛尖状,成双排列,在人和动物体内形成荚膜•血平板上菌落特征:菌落细小、周围有草绿色溶血环,48小时后,由于菌落自溶,呈现“脐窝状”•生化反应:Optochin敏感试验(+) 胆汁溶菌试验(+) 菊糖分解试验(+)•动物试验:小白鼠毒力试验(+)临床意义--A群链球菌致病物质:•致热外毒素:致热、细胞毒作用、使皮肤产生红疹、抗原性强•溶血素:溶解红细胞、破坏血小板和白细胞,分为溶血素O和溶血素S两种•侵袭性酶:透明质酸酶、链激酶、链道酶,有利于细菌在体内扩散•M蛋白:具有抗吞噬作用;与肾小球基底膜有共同抗原成分,与超敏反应有关链球菌溶素O•对氧敏感、•抗原性强,刺激机体产生抗O抗体,•抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所致超敏反应性疾病的辅助诊断临床意义--A群链球菌•所致疾病•化脓性感染:扁桃体炎、丹毒、蜂窝织炎、淋巴管炎、败血症等•猩红热•风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎临床意义--其他链球菌•B群链球菌:条件致病菌,是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌•肺炎链球菌:引起大叶性肺炎等疾病•甲型链球菌:条件致病菌,在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。
•变异链球菌:与龋齿有密切关系链球菌常规检验标本采集•根据临床标本不同采集不同标本细菌鉴定的基本程序标本标本直接涂片直接涂片革兰染色镜检革兰染色镜检分离培养分离培养取可疑菌落取可疑菌落鉴定试验和药敏试验鉴定试验和药敏试验结果报告结果报告脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色观察菌落及溶血现象触酶试验(-)Optochin敏感试验 肺炎链球菌草绿色链球菌杆菌肽 胆汁七叶苷 A群链球菌 D群链球菌肠球菌6.5%NaCl血清学 分类检验方法—直接镜检•方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检•初步报告: “查见革兰阳性球菌” “查见革兰阳性矛尖状双球菌,有荚膜,疑似肺炎链球菌” 荚膜肿胀试验可确诊, “找到肺炎链球菌”检验方法—分离培养•脓、痰、脑脊液标本-→接种血平板,进行分离培养•菌落特征: 甲型链球菌:针尖样菌落、周围有草绿色溶血环; 乙型链球菌:灰白色小菌落、周围有透明溶血环; 丙型链球菌:灰白色菌落、无溶血环 肺炎链球菌:灰白色扁瓶小菌落、周围有草绿色溶血环,培养较久形成脐窝样菌落检验方法—增菌培养•增菌培养基:葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤•血液与培养基比例:1:10,即5ml标本,50ml增菌液。
•拮抗剂:硫酸镁(拮抗多种抗生素)、对氨基苯甲酸(拮抗磺胺)等•培养时间: 常规培养:18~24小时至1周; 亚急性细菌性心内膜炎:观察7天至1月链球菌鉴定•细菌形态及染色性•菌落特征•鉴定试验 杆菌肽敏感试验 CAMP试验 胆汁七叶苷试验 Optochin敏感试验 血清学分群快速胶乳凝集试验肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别菌菌名名形态形态菌落菌落胆汁胆汁溶菌溶菌Optochin菊糖菊糖分解分解小白小白鼠鼠 毒毒力力肺肺链链矛尖状、成双矛尖状、成双排列、有荚膜排列、有荚膜脐窝状、草绿脐窝状、草绿色溶血环色溶血环+++/--+甲甲链链圆形、短链、圆形、短链、无荚膜无荚膜针尖状、草绿针尖状、草绿色溶血环色溶血环--------乙型溶血性链球菌的鉴定•β-溶血环•包括A、B、C、D、F、G群•C群可采用血清学鉴定•其它群采用生化反应或其他鉴定试验非β-溶血性链球菌鉴定 包括•肺炎链球菌•牛链球菌•无乳链球菌•草绿色链球菌•营养变异链球菌草绿色链球菌鉴定α溶血或不溶血,胆汁七叶苷阴性,包括•变异链球菌群•唾液链球菌群•血液链球菌群•咽峡炎链球菌群鉴定依据•A群链球菌--杆菌肽敏感试验(+)•B 群链球菌--CAMP试验(+)、马尿酸钠水解试验(+)•D群链球菌--胆汁七叶苷(+)、6.5%氯化钠生长(-)•肺炎链球菌--Optochin敏感试验(+)、胆汁溶菌试验(+)、形态和菌落特征典型•甲型链球菌-- Optochin敏感试验(-)、胆汁溶菌试验(-)肠球菌•革兰阳性球菌,短链排列•营养要求高•在10℃、45℃、pH9.6条件下均可生长•血平板上溶血现象不定•触酶试验(-)•胆汁七叶苷试验(+)•6.5%NaCl生长试验(+)•PYR试验(+)•血清学分类属D群肠球菌临床意义•引起的医院感染仅次于葡萄球菌•肠球菌感染以粪肠球菌为主•以尿路感染多见•有不同程度耐药肺炎链球菌电镜图肺炎链球菌光镜图肺炎链球菌Gram’s染色镜检图。