超敏反应（检测篇）,1,I型超敏反应的免疫学检验,体内试验 皮肤试验（皮内、挑刺） 肥大细胞活性+IgE（肥大细胞结合的）激发试验 支气管激发试验 器官反应性+肥大细胞活性+ IgE体外试验 IgE测定（总IgE、特异性IgE）、吸入物变应原过筛试验 、相关细胞及其它因素测定 没有一种单一的试验能保证其结果的准确，体内和体外试验互为补充，以得到准确的特异性诊断2,皮肤试验,皮内试验（intracutaneous test） 是我国目前应用最广泛的一种试验方法 将试验用变应原提取液和对照液各0.02ml分别用皮试针头注入皮内，使局部形成直径23mm的圆形皮丘反应须观察1520分钟，根据风团、红晕大小判定结果3,皮内试验的分级标准 分级 风团直径 红晕直径 5 5 + 510 1020 + 1015 2030 + 1520 3040 + 20以上 40以上 风团的直径是分级的主要依据，红晕大小仅做参考；风团若有伪足，其结果判定可向上调一级，但最多为（+）级4,皮肤点刺试验 将变应原和对照液分别滴于试验部位皮肤（前臂掌侧）用点刺针垂直刺入皮肤表层，以刺破皮肤而不出血为度15分钟后观察结果安全、易于操作、临床相关性好，推荐为最佳皮肤试验方法阳性反应：红斑,5,皮肤试验应用：寻找变应原预防药物或疫苗过敏评价：属于活体内试验 能反映机体各种因素综合作用的实际免疫状况 操作简便，结果可信度大注意：若已知对某种物质高度过敏，则不宜再做皮试；身体虚弱、哮喘发作期及不合作的儿童也不宜做皮试。
皮试时应配备常规的抢救药品和设施6,支气管激发试验,非特异性激发试验：测定气道反应性 试验前测定FEV-1和肺活量，吸入非特异刺激物（组胺或甲基胆碱）1520min后复查FEV-1 阳性结果判定：明显的自觉症壮（胸部紧迫感和喘息等）；肺部闻及哮鸣音；FEV-1下降20%以上变应原激发试验 方法同上，吸入浓度倍增的变应原溶液,7,应用 了解支气管的反应性 确定支气管哮喘的变应原 检验新制剂的抗原性 评价平喘药疗效 观察脱敏治疗的效果本法的缺点是每次只能测试一种抗原，要求有一定专门设备和技术，并需取得病人的配合8,评价激发试验是最可靠的特异性诊断方法，但有一定危险性特异性高，与患者病史、症状和RAST相关性强每次只能测试一种抗原，需专门的设备和技术试验前需停用茶碱类、-受体激动剂、抗组胺药和皮质激素,9,血清IgE的检测,总IgE测定方法：双抗体夹心法、放射免疫吸附剂试验（RIST）、ELISA、化学发光法等影响总IgE水平的因素：年龄、性别、种族、寄生虫感染等总IgE水平高不一定是过敏过敏者总IgE水平不一定高,10,特异性IgE测定 特异性IgE（Specific IgE,sIgE）是指能与某种变应原特异性结合的IgE 需用纯化的变应原去检测相应的IgE抗体，是体外确定变应原的重要方法。
11,方法放射性变应原吸附试验（radioallegosorbent test，RAST） 酶联免疫测定法 CAP变应原检测系统（CAP system）,12,RAST： 载体-过敏原+待检血清 Ag-IgE 同位素标记的抗人IgE 固相放射性计数与标本IgE含量成正比 特异性强、敏感性高、影响因素少、对患者安全、与皮试和支气管激发试验的符合率高、有助于寻找过敏原ELISA：原理同RAST，标记物改为酶标记的抗人IgE国内应用较多13,CAP system瑞典Pharmacia公司推出的一种根据RAST原理设计的新型全自动检测血清特异性IgE的荧光固相免疫检测系统 CAP是一个很小的塑料帽状物，内置纤维素粒（具有多孔性、弹性和亲水性 ）单价变应原CAP：只结合一种变应原多价变应原CAP：同时结合几种变应原,14,变应原CAP+待测血清和IgE标准品 -半乳糖苷酶标记的抗人IgE 4-甲基伞形酮-半乳糖苷 荧光分光光度计读取吸光 值 荧光强度与sIgE呈线形关系 整个检测步骤，简便、快速，敏感性高，可信性强15,吸入物变应原过筛试验（Phadiatop）,Phadiatop是根据变应原吸附原理，将空气中95%以上的气传变应原吸附到1个CAP上，患者血清中只要有针对这些变应原其中之一的sIgE，即可呈阳性反应。
试验方法同CAP system Phadiatop的结果可视为多种sIgE的总和，是一种很好的过筛试验Phadiatop阳性只能说明过敏，但对何种变应原过敏仍需进一步检查16,鼻腔分泌物嗜酸粒细胞涂片,17,嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ECP）的测定,方法同CAP system测定sIgE，不同的是CAP中包被的不是变应原，而是抗ECP抗体 ECP反映了嗜酸粒细胞激活的程度及其分泌毒性蛋白的能力，可作为监测气道炎症、指导哮喘抗炎治疗的指标,18,嗜碱粒细胞脱颗粒试验,外周血嗜碱粒细胞 试验管 （加变应原） 对照管（不加变应原） 阿利新蓝染色 、计数 嗜碱粒细胞数减少30%以上为阳性 寻找过敏原及判断脱敏治疗的疗效,19,20,型超敏反应的免疫学检验,型超敏反应的免疫学检验,循环免疫复合物的检测 组织固定免疫复合物的检测 免疫复合物检测的意义及应用,21,循环免疫复合物的检测,循环免疫复合物是指存在于血液中的IC 抗原特异性检测技术：检测已知抗原与相应抗体形成的IC难以常规应用非抗原特异性检测技术：检测血清中IC的总量，并不考虑形成IC的抗原性质,22,循环免疫复合物的检测,物理测定法（PEG比浊法 ）补体相关测定法（C1q固相法 ）抗球蛋白测定法（mRF固相抑制试验 ）细胞技术测定法（Raji细胞试验 ）,23,24,PEG比浊法,PEG法简便易行，敏感度20mg/LHAHG。
但不能反映小分子IC的情况，结果易受多种大分子蛋白质的干扰及温度影响，故特异性和重复性较差；低密度脂蛋白高球蛋白血症和标本反复冻融也可引起浊度增加，应予注意25,C1q固相法,26,C1q固相法敏感性高，达0.1 mg/LHAHG，重复性好C1q制品不易精制，且纯品不稳定尚需注意的是，待检血清需先5630min处理，以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q，空出补体结合点27,mRF固相抑制试验,固相mRF + 血清标本 同位素标记的热聚合IgG 固相中放射性与CIC的含量呈负相关本法敏感性较高，但mRF来源困难，操作费时，难于常规应用,28,Raji细胞试验,固相Raji细胞 + 标本 离心沉淀荧光标记抗人IgG或同位素标记抗人IgG 测沉淀细胞的放射活性方法简单、敏感性高、特异性强，但易受血清游离IgG影响，且Raji细胞 培养较困难29,型超敏反应的免疫学检验,结核菌素皮肤试验：了解个体细胞免疫功能状况斑贴试验：用于寻找引起接触性皮炎的过敏原,30,。