AKTApurifier层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解 AKTA系列层析系统的功能和根本操作，特编写 此操作入门假设需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书一系统组件及系统功能介绍1系统组件⑴泵Pump系统泵：(systempump)双泵(A、B泵)，缓冲液及大体积样品输送2) 阀 Valve三通阀：(SV-903)两个 .「尸「"i-..分别位于两个系统泵前，用于缓冲液输送管道 (A1/A2,B1/B2)切换七通阀：(INV-907)两个1. 上样阀(samplevalve)，用于上样环切换(load/inject) 和系统泵清洗时废液管(waste)切换； 二一」2. 流向切换阀(flowdirectionvalve) ,用于层析柱流向切换 (downflow/upflow)八通阀：1.出口阀(outletvalve),选择收集出口⑶收集器Fraction分段收集4)其它组件梯度混合器(mixer)、柱前过滤器(onlinefilter) 、紫外检测仪(UV-900)、pH电导仪(pH/C-900内含温度计)等2系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。
1)缓冲液pH及梯度配制(a) 梯度制备(Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度b) 白动缓冲液pH及梯度制备(BufferPrep)根据所用缓冲液配方，分别将 A1、A2、B1、B2放入相应的溶液，由A泵及其三 通阀调配缓冲pH,由B泵及其三通阀调配梯度⑵上样上样阀上样：将样品经进样阀 3号口注入储存在样品环(Sampleloop)内，再由 阀门切换将样品带入层析柱；欢送阅读系统泵上样：由三通阀选择进样管道，由系统泵将样品泵入层析柱4)收集收集器收集：设置收集体积(Fracsize),可白动按条件收集出口阀收集：按需要选择不同出口管收集二开机程序1开启电脑；2 翻开 AKTApurifier 电源；3 启动UNICOR嗽件，输入用户名(Username)和密码(Password),默认用户 (default) 密码为default，待AKTA白检结束后，在systemcontrol窗口中显示 系统准备就绪(Instrumentsareready)S Li — I jr三UUNICORN件简介„ - * I IUnicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main:1.系统关闭(QuitProgram)和退出、登陆(Logon/off);2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志 等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4. 方法组编辑(MethodQueues),将几个方法组合在一起，依次运行。
MethodEditor:1.方法编辑；2. 缓冲液配方设置(如配方修改或新增配方等)SystemControl:1.系统控制，可以手动控制(Manual)或运行方法(RunMethod);2. 系统设置，包括 Alarms/Special/Monitors/Curves ;3. 运行监测，有四个窗口：、八—£"与 /—7 _ \ 11Rundata/Curves/Flowscheme/LogbookEvaluation:结果处理，如积分(intergrate)、移动(shift)、计算 (Subtract/Add/Multiply/Divide) 、平滑(Smooth)、截取 (CutCurve)、绘制(CreatCurve)、打印(Print)等在每个窗口中均有专家建议(Adviser)和帮助信息(Help)四系统控制(SystemContral)1手动操作(Manual)1.1手动操作命令简介(1)Pump 泵Flow:设定系统泵流速Gradient:梯度设定BufferPrep_pH:使用缓冲液配制功能时，设定 pH值SampleFlow:设定样品泵流速PumpWashpurfier:系统泵清洗(2) Flowpath 流路PumpAInlet:A泵入口三通阀切换PumpBInlet:B泵入口三通阀切换InjectionValve: 上样阀切换OutletValve:收集出口阀切换InjectionMark: 插入记号(3) Alarm&Mon 报警、检测WaveLength:选择监测波长(1-3个)AutoZeroUV:紫外吸收校零AveragingTime:计算紫外吸收平均值的间隔时间SetCondScale0%:输入0%B寸的电导 'i i .1 | ' I |SetCondScale100% 输入 100%B寸的电导Alarm:设置压力、紫外、电导、pH等报警限Watch:监测参数设置，配合方法编辑中的 watch功能 'i ■-(4) Frac 收集：Peak_Frac_Parameters:计峰收集参数设定FracCollect_900:分布收集每管体积Frac_Stop_900:停止分别收集FeedTube:换管收集Peak_Fraction:计峰收集每管体积Peak_FracStop:停止计峰收集OutletFraction: 出口阀每风分段收集每段体积等设置ResetFracNumber:将当前分布收集的管号计为第一管(5) Others 了其它 -Block:调用程序块(只在方法运行时可用)Next_breakpoint:跳到下一程序块(只在方法运行时可用)BufferPrepRecipe:选择缓冲液配方Set_Mark:插入提示语End_Timer:设定结束运行时间Recordon/o任手动运行时开始或结束数据记录1.2手动操作例如(1)梯度洗脱设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。
各命令无先后次序要求⑵白动配制缓冲pH及梯度必须最先设定缓冲液配方，然后设定其它参数如流速、 pK梯度等⑶记录图谱欢送阅读运行“Recordon〞命令，开始记录图谱，停止记录那么运行“ Recordoff 〞命令1.3 运行监测(Monitoringarun)在系统运行过程中，系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态，共有四个窗口，显示不同内容，可同时翻开：Rundata:运行参数Curves:数据曲线Flowscheme :系统流路图Logbook:运行记录2方法运行(RunMethod)启动方式r--^_ I . I |方法一：从主菜单(main)窗口方法(method)栏中，双击所选方法补方法二：从系统(systemcontrol) 窗口中，依次点击File、Run,选择运行方 法方法三：从系统(systemcontrol)窗口中，点击运行(Run)键，选择运行方法 五方法编辑1按照模板编辑新方法(1) 点击方法编辑窗口中File>New,或点击工具栏中〞 NewMethod按钮，翻开新 方法编辑窗口 ；(2) 在“Forsystem〞栏中选择运行方法的系统，选择“NoTemplate〞那么可白行编辑方法；(3) 在“Technique〞栏中选择层析技术，可选内容有：AnionExchange:阴离子交换 / 7 \ 'j ICationExchange :阳离子交换 RPC反相层析 HIC:疏水层析SizeExclusion:分子排阻(凝胶层析)Affinity: 亲和层析Any :通用模板(4) 在“Template〞栏中选择模板类别，以离子交换及凝胶过滤为例，有如下选择IEXTemplates (离子交换模板)：CIP (在位清洗)ManualInjectionFPBufferPrepManualInjectionFPSegmentedManualInjectionVBufferPrepManualInjectionVSegmentedGFTemplates (凝胶过滤模板)：ManualInjectionFPIsocraticManualInjectionVIsocratic模板解释：ManualInjection:样品由手工(用注射器等)储存在样品环 中，再由进样阀将样品注入层析柱F:用收集器(Fraction-900 )分布收集P:使用计峰收集(PeakFraction)功能V:用出口阀(OutletValve) 分段收集BufferPrep:使用白动缓冲液配置Segmented:不用白动缓冲液配置，可使用梯度Isocratic: 单一流动相(5) 在“Forcolumn〞栏中，选择所用层析柱型号，假设在列单中没有，那么选择 “Any〞(6) 点击“ OK键(7) 假设各参数符合要求，那么选择“ File>Save〞，即可完成新方法编辑。
2方法编辑假设按模板编辑的方法不能满足要求，或对已使用过的方法进行调整，可在“MethodEdit 〞窗口中对方法进行编辑编辑可分两类：1运行参数编辑；2程序 编辑1)运行参数编辑(Runsetup)'― I \ 1在菜单中选择“ View>Runsetup〞，那么进入运行参数编辑窗口，各编辑窗口的内 ■Variables:控制程序可变参数编辑Scouting:筛选条件设定Question:开始运行的提问内容设定Notes:输入实验记录或提示Gradient:显示梯度曲线BufferPrep:开启或关闭白动缓冲液配置功能及选择缓冲液配方Column :显示层析柱参数ReferenceCurves:输入对照曲线EvaluationProcedures: 数据处理步骤Methodinformation:方法信息，含运行体积、时间等Resultname:结果保存文件名格式、路径设定Startprotocol: 开始运行方案选择⑵程序编辑(Textinstruction )欢送阅读在菜单中选择“ View>Textinstruction 〞那么进入程序编辑窗口方法控制程序由数个程序块(Block)组成，程序块那么由操作命令(instruction) 及可变参数(Var.)组成。
所以，根据需要，可分别增加或删除可变参数、操作命 令、程序块等六数据处理(Evaluation)1数据浏览Evaluation 窗口中可查看层析结果(Chromatogram_Layout)和程序档案 (Documentation)等2数据加工最常用有曲线的积分、移动、计算(加减乘除)等：\ -% | Li. I2.1 积分(integrate) " ,「「芦(1) 选择 Integrate>Peakintegrate 或点击 Peakintegrate 按钮，翻开积分窗I(2) 在积分窗口中选择曲线、基线和积分表后，点 OK®即可；(3) 如果想优化积分结果，那么可在积分窗口中选择基线设定、积分范围和参数2.2 移动(Shift)多条曲线重叠比拟时，可用移动功能，使每条曲线错开适当距离，便于分析移动可以左右移动，也可上下移动2.3 相除计算(Divide) ■. 1'■ ■--将两条UV曲线相除，可判定吸收峰的纯度：如果一个峰的组分是单一的，那么整 个峰的相除结果应是恒定值根据峰的相除值，还可。