白色念珠菌,简介,,白色念珠菌的典型特征 显微镜下特征 白色念珠菌菌落形态 鉴定依据 检查步骤 白色念珠菌与酵母菌的鉴别,白色念珠菌的典型特征,白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形,直径为3~6µm,革兰染色为阳性,但菌体着色不均匀,以出牙方式繁殖,在适宜的培养基上出芽生孢子及假菌丝生长,在假菌丝间其末端形成厚膜孢子 白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶,可分解NGL,使对-硝基苯酚游离,在碱性条件下显色2019/11/10,,显微镜下特征,2019/11/10,2019/11/10,白色假丝酵母菌的镜下形态(假菌丝),2019/11/10,白色假丝酵母菌的镜下形态(厚膜孢子),2019/11/10,白色假丝酵母菌的镜下形态(芽管),2019/11/10,白色假丝酵母在血平板的镜下形态(芽管),,白色念珠菌菌落形态,2019/11/10,,念珠菌在显色培养基上的菌落颜色,2019/11/10,2019/11/10,白色假丝酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态,,2019/11/10,鉴定依据,1、菌落特征 2、显色培养基反应 3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成典型的厚膜孢子 4、芽管形成 有孢子长出短小芽管 5、生化试验 6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。
检查步骤,增菌 分离培养 初步判断 芽管试验 结果判断,,2019/11/10,增菌,白色念珠菌(Candida albicans) 取供试液10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2)直接或处理后接种至适量(不少于100ml)的沙氏葡萄糖肉汤培养基中,培养48~72 小时分离培养,取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上,培养24~48 小时(必要时延长至72 小时)初步判断,未检出,,无菌生长 与其菌落形态特征不符的,,与其菌落形态特征相符或疑似,挑选2~3个菌落,念珠菌显色培养基平板,无绿色或翠绿色的菌落生长,菌落为绿色或翠绿色,,未检出,,1%吐温80-玉米琼脂培养基,培养物进行染色,镜检及芽管试验,,,,挑选2~3个菌落,24~48h,24~48h,,,,2019/11/10,芽管试验,挑取1%吐温80-玉米琼脂培养基上的培养物,接种于加有一滴血清的载玻片上,盖上盖玻片,置湿润的平皿内,置35~37℃、1~3 小时,置显微镜下观察,可见到由孢子长出短小芽管 若上述疑似菌为非革兰阳性菌,显微镜未见厚膜孢子、假菌丝、芽管,判供试品未检出白色念珠菌2019/11/10,结果判断,供试品检出控制菌或其他致病菌时,按一次检出结果为准,不再复试。
2019/11/10,沙氏葡萄糖液体培养基,用途:用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测、真菌的培养 葡萄糖 40g 水 1000ml 蛋白胨 10g 除葡萄糖外取上述成分,混合,微温溶解,滤过加入葡萄糖,溶解,分装,灭菌2019/11/10,沙氏葡萄糖琼脂培养基,用途:用于真菌的分离培养 葡萄糖 40g 琼脂 15~18g 蛋白胨 10g 水 1000ml 除琼脂和葡萄糖外混合,微温溶解,滤过加入琼脂和葡萄糖,溶解,分装,灭菌原理: 蛋白胨提供氮源,维生素,生长因子;葡萄糖提供碳源;琼脂是凝固剂沙氏葡萄糖琼脂培养基,,2019/11/10,念珠菌显色培养基(CHROMagar),蛋白胨 10.2g 琼脂 15g 氯霉素 0.5g 灭菌水 1000ml 色素 22.0g 除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值至6.3±0.2滤过,加入琼脂,加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注平皿念珠菌显色培养基(CHROMagar),念珠菌显色培养基根据酶底物法,白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶,可分解NGL,使对-硝基苯酚游离,在碱性条件下显色2019/11/10,1%吐温80-玉米琼脂培养基,黄色玉米粉 40g 琼脂 10~15g 聚山梨酯80 10ml 水 1000ml 取玉米粉、吐温80 及蒸馏水500ml, 混合,65℃加热30 分钟,混匀,用纱布滤过,补足原水量。
取琼脂,水500ml, 混合,加热溶解将以上两种溶液混合,摇匀,分装,灭菌2019/11/10,白色念珠菌与酵母菌的鉴别,1、酵母菌在显色培养基上不显色,为乳白色 2、酵母菌无假菌丝和厚膜孢子 3、酵母菌可发酵蔗糖不能发酵麦芽糖 以上实验结果和特征可与念珠菌进行鉴别2019/11/10,酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态,常见念珠菌及酵母菌生化试验结果,2019/11/10,,谢谢大家!,。