第十章胺类药物的分析【考点进阶详解】一、盐酸普鲁卡因及其制剂的分析★★★1.结构和性质盐酸普鲁卡因是对氨基苯甲酸与二乙氨基乙醇的酯Ｈ2NOONCH3CＨ3 ＨＣl①芳伯氨基：具有重氮化反应（定量）、重氮化-偶合反应（定性)；②脂胺氮原子：碱性；③酯键：水解得二乙氨基乙醇和对氨基苯甲酸（定性）；④苯环:紫外吸收(定量、定性)和红外吸收(定性）；⑤氯化物：定性2.鉴别(1）芳香第一胺反应(重氮化—偶合反应）芳香第一胺，在盐酸中与亚硝酸钠作用，生成重氮化盐,可与b—萘酚偶合，生成红色或猩红色沉淀２)水解反应盐酸普鲁卡因遇氢氧化钠即游离出普鲁卡因白色沉淀（热时为油状物），加热，酯键水解，产生挥发性的二乙氨基乙醇和对氨基苯甲酸钠前者使湿润的红色石蕊试纸变蓝；水溶液放冷加盐酸，生成对氨基苯甲酸白色沉淀，加入过量盐酸,生成其盐酸盐而溶解３)氯化物反应①沉淀反应：供试液加硝酸，再加硝酸银，生成白色沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解,再加硝酸，沉淀复析出②氧化还原反应:本品加等量的二氧化锰,混匀，加硫酸湿润,加热，发生氯气,使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色4）红外光谱法波数(cm-1） 振动类型归属３315，３200 nNH2 氨基２５85 n NH＋ 氨基16９2 n c=ｏ 羰基１6４5 n N-H 氨基1604，1520 nC＝C 苯环1271,1１70，111５ nC-Ｏ 酯基3.特殊杂质检查盐酸普鲁卡因的杂质检查项目有：酸度、溶液的澄清度、干燥失重、炽灼残渣、铁盐及重金属。
盐酸普鲁卡因注射液须检查水解产物对氨基苯甲酸(灭菌时产生)采用TＬC 法：薄层板为硅胶Ｈ－ＣMC—Na；展开剂为苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶４);显色剂：对二甲氨基苯甲醛.结果：供试品如显与对照品相应的杂质斑点，颜色不得更深限量计算:L％=［（0.03mg/ｍl)／(2．５ｍg/mｌ）] ×１0０％=1.2%4.含量测定盐酸普鲁卡因含有芳伯胺,故盐酸普鲁卡因及其注射液均采用亚硝酸钠滴定法测定含量,用永停法指示终点二、盐酸利多卡因的分析★★★1结构和性质盐酸利多卡因具有脂烃胺侧链,显弱碱性①脂烃胺侧链:弱碱性(非水溶液滴定、生物碱沉淀反应）；②芳酰胺：两侧甲基使之不活泼2.鉴别①制备衍生物测熔点：与三硝基苯酚反应，生成黄色沉淀（三硝基苯酚利多卡因）,洗涤,105℃干燥，熔点为22８℃~２3２℃(熔融同时分解）②与硫酸铜试液反应：在碳酸钠试液中与硫酸铜反应，生成蓝紫色化合物；加氯仿,有色物转溶于有机层显黄色③氯化物的反应:同盐酸普鲁卡因④红外光谱法：应与对照图谱一致3．含量测定采用非水溶液滴定法测定含量.(1）原理:盐酸利多卡因的脂烃胺侧链为弱碱性,有机弱碱在醋酸介质中碱性增强，用高氯酸滴定，结晶紫指示终点。
2)注意①盐酸盐用高氯酸滴定时产生氢卤酸，反应不能定量完成,故滴定前加入醋酸汞,使生成氯化高汞,排除干扰②滴定前加入醋酐,增强有机碱的碱性,滴定突跃敏锐三、对乙酰氨基酚及其制剂的分析★★★1结构和性质①羟基：三氯化铁反应（定性)；②乙酰氨基:水解，生成对氨基酚和醋酸，前者的芳伯胺基有重氮化（定量）和重氮化-偶合反应(定性）；③苯环：紫外吸收(定量和定性）和红外吸收（定性）鉴别①三氯化铁反应:酚羟基与三氯化铁生成蓝紫色②水解后的重氮化－偶合反应:在稀盐酸中加热水解，与亚硝酸钠生成重氮盐,再与b-萘酚偶合，生成红色偶氮染料.③红外光谱法:酰氨基、酚羟基和苯环的特征吸收3.特殊杂质检查①有关物质检查有关物质：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、偶氮苯、苯醌来源：未反应原料、中间体、副产物及分解产物检查方法:TＬC,对照品为对氯乙酰苯胺②对氨基酚来源：副产物及分解产物检查原理：对氨基酚在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位物检查方法：限量检查法4．含量测定采用可见—紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚的含量①原理：对乙酰氨基酚中的苯环，在0．4％氢氧化钠溶液中,于257nm 有最大吸收②方法:吸收系数法含量计算含量（％)＝ １00％525０ １0式中，A：为吸收度;Ｗ：为供试品的称样量，ｍｇ.③应用：对乙酰氨基酚的原料、普通片、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊剂颗粒剂及片剂的溶出度测定,均采用紫外分光光度法。
５ 对乙酰氨基酚制剂的分析（1)对氨基酚的检查对乙酰氨基酚咀嚼片、泡腾片、颗粒基滴剂等需检查对氨基酚方法:反相高效液相色谱法，ODS 为固定相；缓冲液—甲醇为流动相限度为01％.（２）溶出度的测定对乙酰氨基酚片、颗粒剂与胶囊需检查溶出度方法：以稀盐酸24mｌ 加水至1000mｌ为溶出介质,采用紫外-可见分光光度法,在257nm 的波长处测定，以吸收系数计算溶出量,经30mｉn（胶囊４5mｉn)时取样，测定，溶出量应为标示量的8０%3）高效液相色谱法用于泡腾片、滴剂及凝胶剂，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,０．0５mｏl／L 醋酸铵溶液-甲醇（８5：1５)为流动相；检测波长为25７ｎm，茶碱为内标四、肾上腺素及其制剂的分析★★★1．结构和性质①烃胺侧链：弱碱性(非水溶液滴定法）②手性碳原子：有旋光性③苯酚：有溴代反应(定性);三氯化铁反应（定性)④邻位酚羟基:易被氧化2鉴别肾上腺素①三氯化铁反应：其盐酸水溶液与三氯化铁显翠绿色;再加氨试液显紫色,最终成紫红色②氧化反应:其盐酸水溶液与过氧化氢试液共沸，显血红色（肾上腺素红）3．检查项目（1)肾上腺素除检查“干燥失重”、“炽灼残渣”外,还需检查“酸性溶液的澄清度与颜色”与“酮体"①酸性溶液的澄清度与颜色邻位酚羟基不稳定，与空气接触或受日光照射易氧化变质.氧化产物多显色,且在酸性溶液中的溶解度下降.方法：取供试品，加盐酸（9→20０)溶解并稀释成每1mｌ 中含２0mg 的溶液，应澄清无色；如显色，与同体积的对照液(黄色3号标准比色液或橙红色2 号标准比色液５mｌ,加水５ml）比较，不得更深.②酮体的检查来源：肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素均由其相应的酮体氢化制得，若氢化不完全，则引入酮体。
原理：酮体在310ｎm 有最大吸收，主成分无吸收；限制310nm 的吸收值达到限制酮体含量的目的方法:取供试品,用盐酸（9→2０00）配成每１mｌ 中含2．0mg 的溶液，在31０ｎm 测定,吸收度不得大于0.0５,酮体限量为０．０6％4.含量测定(１）肾上腺素非水溶液滴定法：肾上腺素的仲烃胺弱碱性.以冰醋酸作溶剂、结晶紫作指示剂、高氯酸作滴定剂，滴定结果用空白试验校正2)盐酸肾上腺素注射液高效液相色谱法：色谱柱为ODＳ;流动相为0．１4%庚烷磺酸钠-甲醇；检测波长为280nm；外标法计算含量.庚烷磺酸钠作为离子对试剂,和肾上腺素生成离子对，克服肾上腺素中碱性基团离解,改善峰形真题模拟与解析】一、A 型题（最佳选择题)1.芳香第一胺反应又称A重氮化反应B．与b-萘酚的偶合反应C.与亚硝酸钠的反应Ｄ．重氮化-偶合反应Ｅ．与芳香醛的反应答案［Ｄ]本题考点：重氮化-偶合反应的定义２．具有重氮化-偶合反应的药物是A．盐酸普鲁卡因 B.对乙酰氨基酚C.盐酸利多卡因 D.盐酸丁卡因E．肾上腺素答案[A]本题考点：上述药物仅有盐酸普鲁卡因具有芳伯氨基,所以能发生重氮化—偶合反应3．取某药物约50mg，加稀盐酸1ml,必要时加热溶解，放冷，加0。
1mol/L 亚硝酸钠溶液数滴，加碱性b—萘酚试液数滴，生成橙黄到猩红色的沉淀.该药物是Ａ.水杨酸Ｂ阿司匹林C.苯甲酸钠Ｄ．对氨基水杨酸钠E.盐酸丁卡因答案［D］本题考点:对氨基水杨酸钠具有芳伯氨基，因此能发生重氮化-偶合反应4．某药物加水溶解，加10％氢氧化钠溶液,生成白色沉淀，加热，变成油状物，继续加热产生可使红色石蕊试纸变蓝的气体,并油状物消失；放冷，加盐酸酸化，白色沉淀又析出，加过量的盐酸沉淀可溶解该药是Ａ.肾上腺素B.对乙酰氨基酚C.对氨基水杨酸钠D.盐酸利多卡因E．盐酸普鲁卡因答案［E］答案解析：此乃盐酸普鲁卡因的水解反应，盐酸普鲁卡因遇氢氧化钠即游离出普鲁卡因白色沉淀,加热，酯键水解，产生挥发性的二乙氨基乙醇能使湿润的红色石蕊试纸变蓝,水溶液放冷加盐酸后生成对氨基苯甲酸白色沉淀,加入过量盐酸，生成其盐酸盐而溶解5.《中国药典》（2０05 年版）规定盐酸普鲁卡因注射液应检查的特殊杂质是A.氯化物B．水解产物C．对氨基苯甲酸D.二乙氨基乙醇Ｅ．对氨基水杨酸答案[C]本题考点：盐酸普鲁卡因注射液须检查灭菌时产生的水解产物对氨基苯甲酸的含量６.亚硝酸钠滴定法中，加KBr 的作用是Ａ.添加Br－ Ｂ.生成ＮO+·Br－Ｃ.生成ＨBｒ D．生成Br２E.抑制反应进行答案[B］本题考点:亚硝酸钠滴定法中，加KBr 的作用是生成NＯ+·Br－，促使反应进行。
７盐酸普鲁卡因和盐酸利多卡因的共同鉴别反应是A．芳香第一胺反应Ｂ.苯环的取代反应C．氯化物反应D．与过氧化氢试液的反应E制备衍生物测定熔点答案[Ｃ］答案解析:两种药物共同的特点是均为盐酸盐，因此可以利用氯化物反应加以鉴别.8肾上腺素中酮体的检查方法：取肾上腺素适量,加盐酸溶液配成浓度为2．0ｍg/mｌ的溶液，于310nｍ 波长处测得的吸收度不得大于0．05，酮体在31０nm 的E1％1cm 为453,计算酮体的限量是Ａ．０６％ B0．060%C.０.5％ D．0．０5％Ｅ．0080％答案[Ｂ］答案解析：Ｌ=[(ＣV）/Ｓ] ×100%=［(A/E ×1/100 ×1０３×Ｖ)/ ２.0］ ×１０0%＝［(0.０5/453 ×１/１00 ×103×1)/20］ ×1００％=0.055％＝0.06%９．TＬC 法检查盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸时，显色定位杂质斑点采用Ａ氨气Ｂ．碘蒸气Cb－萘酚D.对二甲氨基苯甲醛E.硫酸铜溶液答案［D]本题考点:TＬC 法检查盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸杂质的条件.薄层板为硅胶Ｈ-CMC－Na，展开剂为苯－冰醋酸-丙酮—甲醇（1４∶1∶1∶4)，显色剂:对二甲氨基苯甲醛。
10.下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者Ａ.乙酰水杨酸 B．对氨基水杨酸钠C对乙酰氨基酚 D.普鲁卡因E．苯佐卡因答案[Ａ]本题考点：上述选项中仅有乙酰水杨酸不具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基，因此不能用亚硝酸钠滴定法测定含量其含量１1．对乙酰氨基酚的含量测定方法为:取本品约40ｍｇ，精密称定,置2５0mｌ 量瓶中，加０4％氢氧化钠溶液５0ml 溶解后,加水至刻度，摇匀,精密量取5ml，置10０ｍl 量瓶中，加０.４%氢氧化钠溶液10mｌ，加水至刻度，摇匀,照分光光度法,在257nm 的波长处测定吸收度,按C8Ｈ9NO２ 的吸收系数（E１％１CM)为71５ 计算,即得若样品称样量为m(g）,测得的吸收度为Ａ，则含量百分率的计算式为Ａ.(A／71５）×（250/５）×（1/m）×100%Ｂ.（A/71５）×(1０0/5)×2５0×(1／ｍ)×100％C。