第十五章流式细胞仪一、名词解释1 .流式细胞仪：FCM 是以激光为光源，集流体力学、电子物理技术、光电测量 技术、计算机技术、细胞荧光化学技术和单克隆抗体技术等为一体的型高科技 仪器2 .流式细胞术：应用 FCM 对于处在快速直线流淌状态中的生物颗粒进展快速的、 多参数的定量分析和分选的技术称为流式细胞术， 它是在单细胞水平上，对于这些生物颗粒进展多参数、快速的定量分析和分选的技术 u,现已成为现代医学争论最先进的技术之一3 .测量区：鞘液流和样品流在喷嘴四周组成一个圆柱流束，自喷嘴的圆形孔喷 出，与水平方向的激光束垂直相交，相交点称为测量区4 .样品流：将特异荧光染料染色的单细胞悬液放入样品管， 在气体压力作用下， 悬浮在样品管中的单细胞经管道进入 FCM 的流淌室，沿流淌室的轴心向下形成 样品流5 .鞘液流：鞘液流是一种稳定流淌的液体，操作人员无法任凭转变其流淌的速 度，样品流在鞘液流的围绕下形成流体动力学聚焦，使样品流不会脱离液流的轴 线方向，并且保证每个细胞通过激光照耀区的时间相等， 息从而得到准确的细胞信6 .延迟时间：从细胞通过测量区到水滴形成的时间大约为几十毫秒，这个时间 成为延迟时间。
7 .分选收获率：它指被分出的细胞占原来溶液中该细胞的百分比8 .分选速度：它指每秒可提取所选细胞的个数，目前一般 FCM 的分选速度为 300 个/秒，高性能的 FCM 最高分选速度可达每秒上万个细胞9 .分选纯度：它指 FCM 分选的目的细胞占分选细胞百分比，一般可达 99%左右10 .长通滤光片：长通滤光片使特定波长以上的光通过，特定波长以下的光不能 通过11 .短通滤光片：特定波长以下的光通过，特定波长以上的光被吸取或返回12 .带通滤光片：带通滤光片允许确定波长范围的光通过 滤光片上有两个数值， 一个为允许通过波长的中心值，另一个为允许通过光波段的范围二、选择题【A 型题】在五个选项中选出一个最正确答案1 .流式细胞仪中的鞘液和样品流在喷嘴四周组成一个圆形流束，自喷嘴的圆形 孔喷出，与水平方向的激光束垂直相交，相交点称为〔 B〕A.敏感区B.测量区C.激光区D.计算区E.观看区2 .流式细胞仪使用的染色细胞受激光照耀后发出荧光，同时产生〔 B〕 A.电离照耀B.光散射C.电磁辐射D.光反射E.光电子3 .流式细胞仪中的光电倍增管接收〔B〕 A.散射光B.荧光C.激光D.射线E.反光4 .流式细胞仪中的光电二极管接收〔A A.散射光B.荧光C 激光D.射线E 反光5 .通过测量区的液柱断裂成一连串均匀液滴的缘由是在〔 C〕 A.在流淌室上加上了频率为 30kHz 的信号B.在测量区上加上了频率为 30kHz 的信号C.在压电晶体上加上了频率为 30kHz 的信号D.在光电倍增管上加上了频率为 30kHz 的信号E.在光电二极管上加上了频率为 30kHz 的信号6 .将悬浮分散的单细胞悬液，经特异荧光染料染色后，放入样品管，悬浮在样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流淌室， 动力来自于〔C〕 A.激光B.压电晶体C.气体压力D.荧光E.散射光7 .流淌室轴至外壁的鞘液向下流淌，形成包绕细胞悬液的是〔A〕A.鞘液流8 .细胞流C.散射光D.荧光E.测量区8 .各类细胞的特性信息在测量区被测定的时间为〔A〕 A.在细胞形成液滴以前B.在细胞形成液滴以后 C.在细胞形成液滴过程中D.在细胞形成液滴前后 E.在细胞形成液滴一小时9 .样品流在鞘流的围绕下形成流体动力学聚焦，使样品流不会脱离液流的轴线 方向，并且保证每个细胞通过〔C〕A.荧光照耀区B.散射光照耀区C.激光照耀区D. X 光照耀区E.太阳光照耀区10.前向角散射可以检测〔B〕 A.细胞膜厚薄B.被测细胞的大小C.细胞质多少D.核膜的折射率11 .在对细胞膜外表抗原的荧光检测时通常使用〔C〕E. DNA 含量A. 线性放大器B. 指数放大器C.对数放大器D.整数放大器E.函数放大器12 .一般对 DNA 倍体测量时承受〔A〕 A.荧光信号的面积B.散射光信号的面积C.前向角散射信号面积和宽度D.散射光信号的宽度E.荧光信号的宽度13 .荧光信号的宽度常用来区分〔D〕 A.淋巴细胞B.红细胞C.白细胞D.双联体细胞E.单倍体细胞14 .光谱重叠校正的最有效方法是使用〔E〕 A.放大电路B.荧光电路C.散射光电路D.衰减电路E.双激光立体光路15 .假设每秒钟产生 4 万个水滴，每秒钟流出的细胞时 1000 个，则平均每 40 个水 滴中有〔D〕A.三个水滴是有细胞的B.二个水滴是有细胞的C.四个水滴是有细胞的D. 一个水滴是有细胞的E.五个水滴是有细胞的16.流式细胞术对 HIV 感染者或 AIDS 发病者进展区分是通过〔C〕 A.测 DNA 凋亡峰B.胞质抗原含量测定 C.动态监测 T 细胞亚群D.测凋亡调整蛋白17 .下落的水滴通过一对平行板电极形成的静电场时，带正电荷的水滴向〔A〕E. DNA 倍体含量测定A. 带负电的电极板偏转B. 带正电的电极板偏转C.不偏转D.前向角偏转E.侧向角偏转18 .鉴别良、恶性月中瘤的特异指标为〔E〕 A.非特异性酯酶含量测定B. 胞质抗原含量测定C. DNA 含量测定D. 过氧化物酶含量测定E. DNA 倍体含量测定19 .衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标是〔A〕 A.灵敏度的凹凸B.荧光强度C.散射光大小D.周密度大小E.准确度的凹凸20 .区分率是衡量仪器测量精度的指标，通常用〔D〕 A.误差值表示B.标准差值表小C.灵敏度值表示D.变异系数表示E.周密度值表示21 .与前向角散射亲热相关的是〔B〕 A.细胞直径B.细胞直径的平方C.细胞核的外形D.血小板数量E.病毒性质22 .流式细胞仪测定的标本，不管是外周血细胞还是培育细胞，首先要保证是〔E〕 A.单倍体细胞悬液B.双倍体细胞悬液C.活细胞悬液D.白细胞悬液E.单细胞悬液23 .光路与流路校正的主要目的是确保〔C〕 A.激光光路稳定B.样品流稳定C.激光光路与样品流处于正交状态 D.荧光光路与样品流处于正交状态 E.散射光光路与样品流处于正交状态24 .为保证样品检测时仪器处于最正确工作状态， PMT 校准承受〔B〕 A.样品B.质控品C.鞘液D.生理盐水E.缓冲液25 .为保证仪器在计数时的准确性，流式细胞仪应建立确定计数〔 E〕 A.样品B.细胞C.鞘液D.细菌E.标准品26 .样品和鞘液管道应用漂白粉液清洗的间隔时间为〔D〕 A.每月B. 每天C. 每季度D. 每周E.每年27 .FCM 显示激光器开启错误，引起故障的可能缘由是〔B〕 A.激光器关闭B.激光器门翻开C.流式细胞仪连接错误D.清洗液少了E.数据太大，难以处理28 .FCM 显示清洗液高度警示，引起故障的可能缘由是〔 EA.激光器关闭B.激光器门翻开C.流式细胞仪连接错误D.清洗液少了E.清洗液传感器失灵29 .FCM 显示数据处理速率错误，引起故障的可能缘由是〔 A〕 A.数据太大，难以处理B.激光器门翻开C.流式细胞仪连接错误D.清洗液少了E.清洗液传感器失灵【X 型题】每题的备选答案有两个或以上正确答案。
1 .流式细胞仪综合了〔 ABCE A.激光技术B.电子技术C.流体力学D.生物化学E.计算机技术2 .流式细胞仪广泛应用于〔ACE〕 A.细胞生物学3. FCM 在细胞生物学争论中，应用频繁的领域是〔ABCDB.物理学C.免疫学D.电子学E.血液学A. 细胞周期B. DNA 倍体C. 细胞外表受体D.细胞外表抗原E.病毒外表抗体4.生物学颗粒的内容包括〔ABCDEA. DNAB. RNA C.蛋白质D.染色体E.细菌5 .染色的细胞受激光照耀后发出荧光，同时产生光散射这些信号分别被〔AD〕 接收A.光电倍增管荧光检测器B.细胞检测器C. 激光检测器D. 光电倍增管散射光检测器E. DNA 检测器6 .计算机通过储存、计算、分析流式细胞检测到的数字化信息，就可得到〔BCDE 方面的信息A. 离子的多少B. 细胞的大小C.核酸含量D.酶的性质E.抗原的性质7 .流式细胞仪的构造可分为〔ABCDEA.流淌室及液流驱动系统8 .激光光源及光束成形系统C.光学系统D.信号检测与分析系统E.细胞分选系统8 .流淌室的类型有〔ACE〕 A.在室内检测的流淌室B.激发型流淌室C.在空气中检测的流淌室D.荧光流淌室E.显微检测流淌室9 .属于 FCM 光学系统的是〔ABCA.透镜B.滤光片C.小孔D.流淌室E.分选系统10 .FCM 光学系统主要分为〔ABE〕 A.长通滤片B.短通滤片C.高通滤片D.低通滤片E.带通滤片11 .当细胞携带荧光光素标记物，通过激光照耀区时，细胞内不同物质分别产生A. 激光信号B.散射光信号C.荧光信号D.离子信号E.反射信号12 .散射光分为〔BD〕 A.后向角散射B. 前向角散射C.反向角散射D.侧向角散射E.正向角散射13 .目前承受前向角散射和侧向角散射这两个参数组合，可区分裂解红细胞处理中的〔ABD〕A.淋巴细胞群体B.单核细胞群体C.血小板群体D.粒细胞群体E.红细胞群体14 .目前承受前向角散射和侧向角散射这两个参数组合，可区分未进展裂解红细全血样品中的〔CEA.淋巴细胞群体B.单核细胞群体C 血小板群体D.粒细胞群体E 红细胞群体15 .线性放大测量适合于检测〔CDE A.细胞膜外表抗原的分布B.单核细胞含量C 总蛋白质含量〔BQ后外周血胞处理的D.RNA 含量E.DNA 含量16 属于细胞分选器组成内容的是〔BCDE A.细胞分布B 水滴形成C.分选规律电路D.水滴充电E 水滴偏转17.影响延迟时间的因素为〔ABCDA.平均延迟时间的不准确性B.喷射液流的变化C 水滴分别点的变化D.细胞本身对水滴形成条件的影响E 水滴的性质18 .流式细胞仪在免疫学中的应用包括〔ABCD〕 A.淋巴细胞功能分析B.淋巴细胞及其亚群分析C 化疗药物对月中瘤细胞的凋亡机制D.月中瘤细胞的免疫检测E 免疫分型19 .分选指标主要包括〔ABCE A.分选速度B.分选灵敏度C.分选纯度D.分选周密度E.分选收获率20 .保证荧光信号产生的格外关键的技术是〔ABDE〕 A.荧光染料的选择B.标记染色方法C 鞘液的选择D.细胞的选择E 细胞的分别21 .FCM 室内应留意〔ABCD A.配空调B 避光C 防尘D.除湿E 不用除湿 三、简答题 1.简述流式细胞仪生物学颗粒分析原理。
经特异荧光染料染色后的单细胞悬液放入样品管， 在气体压力作用下，悬液 在样品管中的单细胞经管道进入 FCM 的流淌室，沿流淌室的轴心向下流淌形成 样品流流淌室轴心至外壁的鞘液也向下流淌， 形成包绕细胞悬液的鞘液流，鞘 液和样品流的喷嘴四周组成一个圆柱流束， 与水平方向的激光束垂直相交染色 的。