组织学与胚胎学学与胚胎学第一章第一章 组织学学绪论 一一 、研、研讨内容和意内容和意义组织学学: : 是研是研讨机体微机体微细构造和相关功能构造和相关功能的科学研研讨内容内容: :细胞、胞、组织、器官和系、器官和系统几部几部分分, , 又称又称显微解剖学微解剖学 细胞〔胞〔cellcell－－C C〕〕组织〔〔tissuetissue〕〕器官〔器官〔organorgan〕〕系系统〔〔systemsystem〕〕 1. 1. 细胞胞 C C膜、膜、C C质、、C C核核 是人体构造和功能的最小是人体构造和功能的最小单位位 光学光学显微微镜〔〔light microscopelight microscope－－LMLM〕即可察看到〕即可察看到 细胞膜胞膜细胞核胞核细胞胞质卵卵细胞胞 神神经C－神－神经元元 神神经节C、神、神经胶胶质C (1) (1)透射透射电镜〔〔EMEM〕〕: :察看察看C C内部更内部更细微微的构造的构造, , 即超微构造即超微构造 (2) 扫描描电镜察看察看组织C的外表立体构造的外表立体构造 2. 组织: 构造一构造一样或或类似的似的C群及群及 C外基外基质构成。
构成 四大根本四大根本组织：：上皮上皮组织结缔组织肌肌组织神神经组织 3. 器官器官: 不同的不同的组织按一定的比按一定的比例、数量及方式例、数量及方式组合成器官合成器官系系统: 假假设干功能相关的器官构干功能相关的器官构成系成系统 细胞胞组织器官器官系系统｝｝｝｝组织学各学各论组织学学总论 苏木精木精-伊伊红染色法染色法苏木精：碱性染料，使木精：碱性染料，使C核内的染色核内的染色质及及C质内的核糖体染成紫内的核糖体染成紫蓝色伊伊红：酸性染料，：酸性染料，C质和和C外基外基质中的中的成分染成成分染成红色最常用的最常用的最常用的最常用的组织组织切片染色法－切片染色法－切片染色法－切片染色法－HEHE染色染色染色染色 嗜碱性嗜碱性:对于碱性染料于碱性染料亲和力和力强的性的性质可被苏木精染成紫木精染成紫蓝色 嗜酸性嗜酸性:对于酸性染料于酸性染料亲和力和力强的性的性质可被伊红染成染成红色中性中性: 对于两种染料于两种染料亲和力都不和力都不强的性的性质, HE染色着色淡染色着色淡组织构造的嗜色性构造的嗜色性 C超微构造方式超微构造方式图图 • 电镜: “两暗两暗夹一明〞一明〞C膜膜:• 单位膜位膜 细胞膜胞膜 1. 光学光学显微微镜(光光镜)的的发明明Light microscope 〔〔LM)2. 细胞学胞学说的提出和的提出和组织学的建立学的建立 3. 电子子显微微镜(电镜)的的发明和超微明和超微 构造的构造的发现 Electron microscope〔〔EM〕〕4. 当代当代组织学学二二二二. . 组织组织学的开展学的开展学的开展学的开展简简史和史和史和史和当代当代当代当代组织组织学学学学 1. 对组织学内容的学内容的审视角度角度2. 留意形状与功能的一致留意形状与功能的一致3. 留意培育察看与空留意培育察看与空间思想思想 的才干的才干三三三三. . . .组织组织学的学学的学学的学学的学习习方法方法方法方法 (一一) 光光镜技技术 1. 石蜡切片石蜡切片术 ①①取材和固定取材和固定; ②②脱水和包埋脱水和包埋; ③③切片和染色切片和染色; ④④封片。
封片 四四四四. . . .组织组织学技学技学技学技术简术简介介介介 其他切片技其他切片技术: 火棉胶包埋火棉胶包埋, 冰冰冻 切片切片,涂片涂片,铺片片,磨片其他染色法其他染色法: 硝酸硝酸银→神神经细胞胞(黑黑) 1. 透射透射电镜 电子密度高子密度高: 当当电子束投射到密子束投射到密 度大吸附重金属多的构造度大吸附重金属多的构造时, 电 子被散射的多子被散射的多, 因此因此, 射落到射落到荧 光屏上的光屏上的电子少而呈暗像子少而呈暗像, 电镜 照片呈黑或深灰色照片呈黑或深灰色, 称称为电子密子密 度高反之称度高反之称为电子密度低子密度低 (二二二二) )电镜电镜技技技技术术 2. 扫描描电镜察看察看组织C的外表立体构造的外表立体构造 组织化学化学术: 为运用化学、物理、生物运用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技化学、免疫学或分子生物学原理和技术, 与与组织学技学技术相相结合而合而产生的技生的技术, 能在能在组织切片定性、定位、定量切片定性、定位、定量地地显示某种物示某种物质的存在与否以及分布的存在与否以及分布形状。
形状细胞化学胞化学术:前述技前述技术用于游离用于游离细胞胞样品那么称品那么称为～～(cytochemistry) (三三三三) )组织组织化学化学化学化学术术 1. 普通普通组织化学化学术 根本原理是在切片上添加某种根本原理是在切片上添加某种试剂, 和和组织 中待中待测反响物反响物发生反响生反响, 其其终产物或物或为有色有色 沉淀沉淀, 以用光以用光镜察看察看, 或或为重金属沉淀以用重金属沉淀以用电 镜察看 (1) 糖糖类:PAS反响反响, pariodic acid Schiff reaction (2) 脂脂类: 油油红、尼、尼罗蓝及及苏丹丹类染料染料 (3) 核酸核酸: 福而根反响福而根反响→DNA; 甲基甲基绿- 派假派假设宁反响宁反响→DNA绿色色,RNA红色 (4) 酶类酶类: 酶组织化学术经过显示酶的酶组织化学术经过显示酶的 催化活性以表示酶的存在催化活性以表示酶的存在2. 免疫组织化学术免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检检 测组织中肽和蛋白质的技术。
肽和蛋白测组织中肽和蛋白质的技术肽和蛋白质均具有抗原性质均具有抗原性, 当把人或动物的某种蛋当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物白质作为抗原注入另一种动物, 其体内那其体内那么会产生针对该抗原的特异性抗体将么会产生针对该抗原的特异性抗体将抗体从动物血清中提出后抗体从动物血清中提出后, 与标志物相结与标志物相结合合, 即成为标志抗体即成为标志抗体 用标志抗体与组织切片孵育用标志抗体与组织切片孵育, 抗体抗体 那么与组织中相应抗原特异性结合那么与组织中相应抗原特异性结合在在 显微镜下经过察看标志物而获知肽显微镜下经过察看标志物而获知肽 或蛋白质的分布部位常用的标志或蛋白质的分布部位常用的标志 物有荧光素物有荧光素, 辣根过氧化物酶、胶辣根过氧化物酶、胶 体金3. 原位杂交技术即核酸分子杂交组原位杂交技术即核酸分子杂交组 织化学术织化学术 其原理为用带有标志物的知碱基序其原理为用带有标志物的知碱基序列的核酸探针，与细胞内待测的核列的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原那么进展特异性酸按碱基配对的原那么进展特异性原位结合，即杂交然后，经过对原位结合，即杂交然后，经过对标志物的显示和检测而获得待测核标志物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。
常用的标志物酸的有无及相对量常用的标志物有放射性核素〔有放射性核素〔35S35S，，32P32P，，3H3H等〕等〕和地高辛和地高辛 (四四) 放射自放射自显影技影技术(五五) 图象分析象分析术(六六) 细胞培育胞培育术和和组织 工程工程 。