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1、深圳弘汇生物医药有限公司Analyst 软件基本操作培训教程LC/MS/MS操作规程及维护一、3Q仪器开关机步骤（一）开机顺序：1打开机械泵上的电源开关。2机械泵继续工作至少15分钟。3打开仪器电源主开关。4等系统真空到达1-2 x 10-5 Torr 后才可以正常 操作仪器扫描。API-150/165 2-4 x 10-5. Q-Trap 检查 低/中/高 设定在 2/3/4 x 10-5。5、打开电脑开关，进入Windows 桌面，双击Analyst ，进入Analyst分析界面。（二）关机顺序1关掉仪器电源主开关停止真空泵系统。2机械泵继续工作至少15分钟。3关掉机械泵上的电源开关。4等
2、至少10分钟让仪器“自然”卸真空。5通过仪器后部真空管的接口卸掉全部真空。API-2000/3200 & Q-Trap经放气口卸真空。注意：以上操作程序适用于停机时间少于24-48小时的仪器或配置TW700分子泵的API4000在仪器安装或TW700分子泵更换后的首次开机操作。对于API3000及配置TV801分子泵的API4000在仪器安装或TV801 或V550plus / V551分子泵更换后的首次开机操作，必须首先进行相应的分子泵软启动操作程序。 二、PPG质量校准1手动质量校准1-1 开软件,连机,进入手动调谐状态,调用己有的质量校准方法1-2 进质量校准溶液 ,调离子源喷雾针位置1
3、-3 采集PPG标准品质谱数据1-4 质量校准数据计算1-5 手动调整分辨率1-6 质量校准2自动质量校准2-1 自动质量校准的设定2-2 自动优化结果三、针泵进样ESI源MS-MS 方法手动优化 1. 先确定母离子: Q1 单级质谱实验（Q1全扫描）2. Product Ion Scan（碎片离子扫描）3. 碎片离子扫描之CE单参数寻优4. Precursor Ion Scan（母离子扫描）5. Neutral Loss Experiment（中性丢失扫描） 四、针泵进样ESI源MRM定量方法手动优化1. 先确定母离子: Q1 单级质谱实验（Q1全扫描）2. 检查信号稳定性3确定子离子Pro
4、duct Ion Scan（碎片离子扫描）4优化MRM 定量分析质谱参数4-1 优化Q1参数使灵敏度最高及稳定性良好4-2 继续优化MRM离子对的CE 及 CXP五、针泵进样ESI源MRM定量方法参数自动优化1. 先确定母离子: Q1 单级质谱实验（Q1全扫描）2. 检查信号稳定性3. 定量参数自动优化3-1 MRM自动优化的设置3-2 MRM 参数自动优化的过程3-3 MRM 电压参数自动优化的例子六、带液相条件质谱采集方法和批文件的建立和使用1-1 调节离子源位置1-2.建立Acquisition Method采集方法1-3. 建立 Acquisition Batch采集批文件七、定量分析
5、方法的建立和数据分析1A: 用 Wizard导航器建立一个定量数据分析方法 (手动方式)1B: 用已建立的定量数据分析方法分析数据2 查看和编辑定量结果表2-1查看和编辑结果列表中的各列,如何取消Audit trail(稽核跟踪)原因设定2-2查看校准曲线。2-3查看峰积分及更新积分方法2-4查看统计表2-5建立及执行一个query (质控表)2-6建立及执行结果列表的分类。2-7建立及执行Metric plot (度量图表)及使用公式 八、质谱数据定性分析打开 TIC 数据文件,谱图及图块处理,使用图块工具栏图标使用图形信息窗口在色谱图的图块 中使用鼠标右键。在质谱图的图块 中使用鼠标右键。
6、对 Explore 工具栏其余键的使用。MRM 电压参数自动优化的例子注意：以上操作程序适用于停机时间少于24-48小时的仪器或配置TW700分子泵的API4000在仪器安装或TW700分子泵更换后的首次开机操作。对于API3000及配置TV801分子泵的API4000在仪器安装或TV801 或V550plus / V551分子泵更换后的首次开机操作，必须首先进行相应的分子泵软启动操作程序。 在能力与知识结构方面，要求学生应具有扎实的专业和日语语言基础，熟练掌握日语听、说、读、写、译的基本技能；了解日本社会及日本文化等方面的基本知识，熟悉日本国情，具有一定的日本人文知识及运用这些知识与日本人进
7、行交流的能力。第 7 页 共 8 页九、3Q仪器维护简明手册1、死机处理的9个步骤a. Analyst 软件中Hardware configure重新deactive,再activeb. 用CTRL-ALT-DEL,Windows任务管理器结束任务,关掉Analyst 软件,然后重新打开Analystc. 关掉Analyst 软件，Stop Service后重新打开Analyst软件d. 重新启动控制仪器的电脑,HPLC重新启动,再activee. Stop Service后进入Scu21.exe 中， clear GPIB Busf. Stop Service后进入Scu21.exe 中，
8、Reset System controllerg. 同时按下电源旁边的两个按扭reseth. 重新开关仪器总电源i. Stop Service后进入Scu21.exe 中，download firmware:M3XXX,M4XXX说明：一步不行，再使用下一步，不一定7步都需要做完2、仪器主要电路模块图3. 如何打开诊断软件: 路径：“C:Program FilesAnalyst Service DiagnosticsAnalystServiceDiagnostic.exe”或者查找AnalystServiceDiagnostic.exe 3.1 Stop service 3.2 运行Analy
9、stServiceDiagnostic.exe 3.3 Instrument APIXXXX Rolling On说明：打开诊断软件，请在工程师指导下进行。不得随意更改参更不得将参数的offline随意改为online 4. 离子源喷口与orifice的位置： 影响分子泵的寿命； 引起orifice堵塞、skimmer及Q0脏； 并不能增加灵敏度，反而使稳定性下降；喷雾口与ORIFICE位置的确定方法(API3000,API2000)4.1离子源位置先调偏4.2在Analyst中active带LC的Hardware Configuration4.3在Manual Tuning 中Temp设为0
10、 ,离子源不加热4.3 GAS2 流量设为0,加热辅助气不开4.4开HPLC, 在Analyst中设流量, run time 5 min 4.5 Start run4.6调离子源X,Y位置,使喷雾口与ORIFICE位置正确正确的喷雾口与ORIFICE的位置5. 维护计划6、机械泵维护：6.1. 每三个月更换机械泵油6.2. 不同公司的油不可混合使用:会损坏机械泵6.3. 更换不同公司的油时:必须用新油先冲洗一次Varian油的购买:VLeybold油的购买:WC7、堵的判断及处理方法：7.1进样管及spray tube堵塞： a. 用Syringe推：直线喷出没有堵塞 b. 若堵，取下用50水
11、/50甲醇超声 c. 超声仍无效,更换进样管及spray tube7.2 Orifice堵塞： 现象：灵敏度下降或真空度异常的好 处理方法： a. 50水/50甲醇清洗orifice外部 b. 不能解决问题时再清洗orifice内部8、空气过滤网的清洗：* 空气过滤网堵影响机器内部电路板的散热, * 严重时仪器停止数据采集每三个月，取出除尘，如有破损，更换新的过滤网API3000的过滤网PN：API4000的过滤网PN： 9、如何清洗Curtain Plate, Orifice, Skimmer和Q0： 清洗Curtain Plate: 用无尘纸加甲醇擦洗 清洗Orifice外部:拆卸Curt
12、ain Plate后,用无尘纸加50水/50甲醇擦洗 清洗Orifice内部,Skimmer和Q0 : a. 停API主机 b. 15分钟后,停机械泵c . 拆卸Curtain Plated. 拆开Interface,拆卸skimmere. 用200ul加样枪头,加50水/50甲醇擦洗Orifice内部f. 用无尘纸加甲醇擦洗Skimmer和Q010、 不定期做质量校正：仪器只有在质量正确的条件下才能保征分析结果可靠:用什么做校正: 1. 负离子 : PPG3000 10ul/min2. 正离子: 1/10 PPG 5ul/min (API3000)3. 1/50 PPG 5ul/min (API4000) 什么时候要做校正: 1. 每次重新开机2. 不关机时,每三个月校正时: 请注意CEM电压可能要增高11、PPG标准试剂准备12、如何延长分子泵的寿命a. 喷口离orifice位置尽可能远b. 样品尽可能干净c. 机械泵油经常更换d. 分子泵的散热尽量充分
