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1、生理学实验设计设计人：尚洁 王俊俊 娄吉祥 罗明伟 赵锐豪 指导老师：* 2012年05月05日 肾上腺素和去甲肾 上腺素对心脏和血 管的比较实验目的 观察肾上腺素和去甲 肾上腺素对心脏和血 管的作用，比较和分 析其作用机制实验原理激素部位综合受体产生作用肾上腺素心脏1三正效应血 管皮肤，胃 ，肾 皮肤 ， 肠，血 管平滑肌血管收缩骨骼肌， 肝大剂量血管收缩小剂量 2血管舒张去甲肾上 腺素心脏1三正效应（弱）血管全身血管血管收缩实验材料与试剂实验1 实验对象 家兔试剂 20%氨基甲酸乙脂，0.5%的肝素， 生理盐水， 5:100000肾上腺素， 1: 10000去甲肾上腺素 实验2 实验对象：
2、蟾蜍 试剂： 任氏液， 5:100000肾上腺素， 1:10000去甲肾上腺素实验仪器与设备 实验1哺乳动物手术器械一套 生物信号采集处理系统 张力换能器 兔手术台 动脉夹 动脉导管 铁支架 丝线 注射器 实验2蛙类手术器械一套 生物信号采集处理系统 铁支架 张力换能器 双凹夹 试管夹 蛙心插管 滴管 丝线实验方法实验1 动物的分组与处理： 取8只身体状况基本相同的家兔，随机等分为两组，一 组为在体实验组，另一组为在体对照组 指标的观察： 以动脉血压为指标，分析肾上腺素和去甲肾上腺素对 血管活动的调节实验2取8只身体状况基本相同的蟾蜍，随机等分为两组 ，一组为在体实验组，另一组为在体对照组实验
3、2取8只身体状况基本相同的蟾蜍，随机等分 为两组，一组为在体实验组，另一组为在体 对照组指标的观察： 以心率，心肌收缩力为指标，分析肾上腺素和去 甲肾上腺素对心脏活动的调节实验技术路线1，麻醉： 家兔称重后，耳缘静脉缓慢注射20 氨基甲酸 乙酯（ 戊巴比妥钠（ 乙酯（5 mlkg-1）进行麻醉。当动物 四肢松软， 呼吸变深变慢，角膜反射迟钝时，表明动 物已被麻醉， 即可停止注射。 2：动物的固定： 将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。实验技术路线3,手术操作 剪去颈前部兔毛，沿正中线切开皮肤5-7cm，用止血钳 纵向分离皮下组织于正中线分开颈部肌肉，暴露气管 。在气管下方穿一根线备用，在甲状软
4、骨下约1cm处 剪一倒“T”型切口，插入气管插管，用备用线结扎并固 定。在气管两侧找到并辨认迷走神经，交感神经，减 压神经（即家兔的主动脉神经）以及颈总神经。用玻 璃分针先仔细分离右侧减压神经，然后分离右侧迷走 神经，交感神经和颈总神经。分别在各神经、血管下 穿一根不同颜色的丝线备用。动脉插管分离左侧颈总动脉2-3cm(尽可能向头端游离)，远心端 穿线并结扎，近心端用动脉夹夹闭，在血管下穿线备 用。在耳缘静脉注射0.5肝素生理盐水2ml，并在动 脉导管尖端注入0.5%肝素生理盐水0.1ml。用眼科剪在 结扎线的近端动脉上剪一斜切口，向心脏方向插入已 准备好的动脉导管（注意管内不应有气泡），结扎
5、固 定。压力换能器与动物心脏应保持在同一水平。观察项目1，记录正常血压放开动脉夹，记录静息状态下家兔动脉血压曲线，观察正 常血压波动曲线。2，静脉注射小剂量肾上腺素耳缘静脉注射小剂量肾上腺素溶液，观察血压变化3，静脉注射大剂量肾上腺素待动脉血压曲线恢复正常后，耳缘静脉注射大剂量的肾上 腺素溶液观察血压的变化4，静脉注射去甲肾上腺素耳缘静脉注射去甲肾上腺素溶液0.20.3ml,观察血压变化实验仪器连接与调试及装置1，仪器装置 将动脉导管与压力换能器相连，通过三通开关用生理盐水 冲灌压力换能器和动脉导管。排尽压力换能器与动脉导管 中的气泡。然后关闭三通开关备用，若压力换能器没有定 标，要对压力换能
6、器定标。 2仪器连接 将压力换能器与生物信号采集系统相连，将刺激电极输入 端与刺激输出端相连，将刺激电极输出端与保护电极相连 3调零，压力定标和制压 实验前，一般已调整好测量系统，实验过程中，勿轻易改 动。实验21，备用线将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎(注意勿结扎住静脉窦 ).将心脏回复指原位1，取蟾蜍一只，用探针捣毁脑和脊髓，将其仰 卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤，然后将胸部剑突软骨下方的皮 肤剪出一个“V”字形切口，暴露出剑突。用镊子夹住剑突下端，在 肌肉层上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并把左 右两侧胸骨完全剪掉，眼科剪仔细剪开心包膜，暴露心脏。 2，仔细识别心房、心室
7、、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉 等。 3，结扎血管：在右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿 一根线备用。用玻璃分针将心尖向上翻至背面，以备用线将前后腔 静脉和左右肺静脉一起结扎(注意勿结扎住静脉窦).将心脏回复指原 位。蛙心插管在左主动脉下穿两根线。用一根线结扎左主动脉远心 端，另一线备用。提起左主动脉远端缚线，用眼科剪 在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一“V”形切口，将盛有 少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉 圆锥时，略向后退，在心室收缩时，沿心室后壁方向 下插，经主动脉瓣插入心室腔内（不可插入过深，以 免心室壁堵住插管下口）。若插管成功进入心室，管 内液体会随着心室
8、搏动而上下移动。用左主动脉近心 端的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的 小突起上。游离心脏提起插管，在接线远端分别剪断主动脉左右 分支；剪短左右肺动脉和前后腔静脉，将心 脏离体。用滴管吸进插管内的余血加入新鲜 任氏液反复冲洗数次，直至液体完全澄清。 保持灌流液面高度恒定（1-2cm），即可进 行试验。仪器连接用试管夹将制备好的离体蛙心固定于支架上，在心脏舒张 期用蛙心夹夹住心尖部，并连接到张力换能器上（勿将心 脏受到过度牵拉）。将张力换能器的输出线与生物信号采 集处理系统相连。观察项目1，描记正常蛙心收缩曲线幅度：代表心脏波动的强弱。疏密：代表心率。规律性：代表心脏波动的节律性。顶点水
9、平：代表心脏收缩的程度。基线：代表心脏舒张的程度。2，肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴5:100000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。 出现效应后，用新鲜任氏液换洗，直至心跳曲线恢复正常。3，去甲肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。实验预期结果实验1器官加入试剂预期现象心脏肾上腺素溶液0.5mi心脏活动加强，心率 加快 去甲肾上腺素溶液0.5mi心脏活动加强，心率 加快 肠系膜 动脉小剂量肾上腺素溶液0.1mi血管收缩去甲肾上腺素溶液 0.1mi血管收缩大剂量肾上腺素溶液0.5mi血管收缩去甲肾上腺素溶液 0.5mi血管收缩肝 动 脉小
10、剂量肾上腺素溶液0.1mi血管收缩去甲肾上腺素溶液 0.1mi血管收缩大剂量肾上腺素溶液0.5mi血管舒张去甲肾上腺素溶液 0.5mi血管收缩实验21，滴加肾上腺素溶液后，心率加快，心肌收缩力增强 2，滴加去甲肾上腺素溶液后，心率变慢实验分析1，静脉注射氨基甲酸乙酯溶液时，刚开始小兔子异常兴奋，为 使兔子快速镇静下来，注射前3ml时应迅速，但不可过速防止兔 子死亡，若兔子在注射时出现异常情况，应停止注射观察5分钟 后再做决定。 2，静脉注射时针不易扎入血管，静脉注射时应该从耳缘静脉远 心端开始进针，先进入静脉下端然后在任氏液中滴加1-2滴 1:10000去甲肾上腺素溶液，观察曲线的变化。 3，插蛙心插管时，稍有不慎，蛙心可能停止跳动而使实验失败 ，所以插蛙心插管要小心，先使蛙心插管进入动脉圆锥，在向 下进入左心室，实验中保持心脏处于任氏液环境中，还有如果 蛙心插管稍插入左心室，蛙心搏动就发生很大变化，那么将蛙 心稍插入左心室即可，但不过实验过程会变慢。 4，为什么用蟾蜍做肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏作用的影响的比较？ 答：最主要的原因是因为蟾蜍是两栖动物，体外条件下易维持其正常的生 理环境，从而使实验难度大大降低，更易获得成功。
