《药物分析课件 第04章 药物定量分析与分析方法验证》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药物分析课件 第04章 药物定量分析与分析方法验证（79页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 第四章 第四章 药物的含量测定方法与验证药物的含量测定方法与验证药物分析课件 上一内容 下一内容 回主目录O返回基本要求掌握：药物含量的容量、光谱和色谱分析法 ，滴定度与含量计算，色谱系统适用性试验 的内容、要求及相关计算，样品分析的前处 理方法，药物分析方法的验证与内容。 熟悉: 各类分析法的基本原理与条件选择， 样品分析前处理方法的适用范围，不同分析 方法对验证内容的基本要求。 了解：滴定液的配制与标定，分析仪器的校 正和检定。 上一内容 下一内容 回主目录O返回基本内容一、定量分析法的分类与特点二、样品分析的前处理方法三、药品质量标准分析方法验证练习与思考 上一内容 下一内容 回主目录
2、O返回第一节第一节 定量分析方法分类与特点定量分析方法分类与特点一、容量分析法 （一）容量分析法的特点几个概念：容量分析法、滴定终点、滴定误差操作简单、快速；比较准确（相对误差0.2%）；仪器普通易得常用于测定高含量或中含量组分，原料药含量测定首选 上一内容 下一内容 回主目录O返回（二）容量分析法的计算问题 2.滴定度的计算 aA（待测物） + bB（滴定液） cC + dDa bT/M 1cT = ca/bM c：滴定液浓度 (mol/L)M：被测物分子量1.滴定度（T）：每1ml规定浓度的滴定液相当于被测物质的质量(mg) 上一内容 下一内容 回主目录O返回用溴酸钾法测定异烟肼M(C6H
3、7N3O) 137.14的含量时，溴酸钾滴定液的摩尔浓度为0.02mol/L（以KBrO3为单元），化 学反应式如下：3C6H7N3O2KBrO33C6H5NO2+3N2+KBr+3H2O 上一内容 下一内容 回主目录O返回3.百分含量的计算 W：供试品取样量 设至终点时，消耗滴定液体积为V ml则药物理论质量为VT浓度校正因数（1）直接滴定法 上一内容 下一内容 回主目录O返回（2）间接滴定法 1）生成物滴定法药物 + A B 滴定滴定剂2）剩余滴定法（回滴法）药物 + A（定、过量） 剩余的 A + B （回滴）V 空白试验 V0W司可巴比妥钠=0.1022g， cBr2=0.05mol/
4、L， cNa2S2O30.1mol/L； V1=15.73ml，V0=23.21ml； MC12H17N2NaO3=260.27，FNa2S2O31.038。 司可巴比妥钠的含量测定1.计算滴定度；2.计算百分含量。 上一内容 下一内容 回主目录O返回 上一内容 下一内容 回主目录O返回光谱分析法 紫外可见分光光度法 UVVis 原子吸收分光光 度法 AAS 荧光分析法 二、光谱分析法 上一内容 下一内容 回主目录O返回（一）紫外-可见分光光度法 灵敏度高，可达10-4g/ml 10-7g/ml 1. 特点 准确度高，RSD（%）为2% 5%仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用广泛 2. 朗伯
5、-比耳定律 A = ECL吸收系数：摩尔吸收系数 研究分子结构百分吸收系数 含量测定吸收光谱范围：紫外：200400nm可见：400760nm 上一内容 下一内容 回主目录O返回3.仪器的校正和检定 吸收度准确性的检定：重铬酸钾的硫酸溶液，规定波长处测定 ，应符合P91表1中规定 波长的校正：汞灯中的几根较强的谱线或用仪器自身所带的氘灯的特定谱线为参照进行校正杂散光的检查：一定浓度的碘化钠和亚硝酸钠溶液，规定波长处测定透光率，应符合P91表2 中规定 上一内容 下一内容 回主目录O返回4. 对溶剂的要求: 含杂原子的有机溶剂通常具有很强的末端吸收它们的使用范围均不能小于截止使用波长 石英吸收池
6、、空气为空白(nm) 溶剂 + 吸收池A 220240 0.40 241250 0.20 251300 0.10 300以上 0.05 上一内容 下一内容 回主目录O返回5. 测定方法确定波长要求供试品溶液的A应在0.30.7 狭缝调整 上一内容 下一内容 回主目录O返回供试品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度供试品溶液的浓度对照品溶液的浓度5. 测定方法1）对照品比较法：条件：A. 待测物与对照品在相同条件下测定B. 待测物与对照品浓度相近 上一内容 下一内容 回主目录O返回制剂 ：原料药：稀释倍数取样量平均片重片粉量 上一内容 下一内容 回主目录O返回2）吸收系数法（绝对法）吸光度百分吸收系数
7、液层厚度， cm，如无特 别注明， L=1cm可在手册或文献中查到 上一内容 下一内容 回主目录O返回盐酸氯丙嗪（规格1ml:10mg，E1%1cm915)的含 量测定：精密量取本品5ml，置200ml量瓶中， 用盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀； 精密量取2ml，置100ml量瓶中，用盐酸溶液（ 91000）稀释至刻度，摇匀，在254nm波长 处测定吸光度为0.469。计算其百分含量。 上一内容 下一内容 回主目录O返回3）计算分光光度法：多种，具体按每种药物规定的方法进行 如：VA的三点校正法4）比色法加入显色剂后，按照对照品比较法测定。影响显色因素很多，故需注意平行操作。空白溶剂：
8、溶剂+显色剂，同法处理 上一内容 下一内容 回主目录O返回三、色谱分析法 特点：高灵敏度、 高效能、高速度、应用广泛按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱分类按分离方法：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC 根据混合物中各组分的色谱行为差异，先行分离后再在线或离线对各组分逐一进行分析的方法，是分离分析混合物的最有力手段。 上一内容 下一内容 回主目录O返回1. 对仪器一般要求 固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变其他均可适当改变色谱图20分钟内记录完毕2. 系统适用性试验 色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2分离度：R = 2（tR2 tR1)/(W1 + W
9、2); 应大于1.5重复性：对照液连续进样5次，峰面积RSD2.0拖尾因子：T = W0.05h/2 应在0.9 5 1.05 流出方向（一）HPLC法 上一内容 下一内容 回主目录O返回（1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量对照品+内标物对照溶液，进样，测定，计算校正因子 3. 在含量测定中的应用供试品+内标供试品溶液，进样，测定供试品和内标物质的峰面积或峰高，计算含量 上一内容 下一内容 回主目录O返回（2）外标法测定供试品主成分含量供试品供试品溶液对照品对照品溶液进样，测定，计算含量 缺点：不易准确控 制进样量，宜用定 量环进样 上一内容 下一内容 回主目录O返回1. 对GC仪器一
10、般要求 载 气：氮气色谱柱：填充柱或毛细管柱填充柱：内径24mm，长110m，内装吸附剂 高分子多孔小球或涂渍固定液的载体毛细管柱：内径0.20.5mm，长10100m，一般为空心柱，内壁或载体经涂渍或交联固定液 检测器：氢火焰离子化检测器 色谱图：30分钟内记录完毕（二）GC法色谱适用性实验、 测定法：同HPLC 上一内容 下一内容 回主目录O返回第二节 样品分析的前处理方法 第一节 定量分析样品的前处理方法一、概述 1.结构特征与分析方法之间的关系(2)含金属有机药物 (1)含卤素有机药物 R-X （F，Cl, Br, I ）卤素与脂肪链相连 R-X 结合较不牢固，不需有机破坏含金属有机药
11、物 R-O-Me，有机酸或酚的金属盐/配位化合物；结合不牢固，可直接测定 有机金属药物 R-Me ，结合牢固，适当处理后测定 卤素与芳环相连 Ar-X 结合牢固， 需/不需有机破坏泛影酸三氯叔丁醇富马酸亚铁硬脂酸镁醋酸苯汞 上一内容 下一内容 回主目录O返回2. 药物分析中常用的分析方法经有机破坏的分析方法不经有机破坏的分析方法 上一内容 下一内容 回主目录O返回二、不经有机破坏的分析方法终点： 邻二氮菲(+Fe3+)溶于热稀矿酸Fe2+铈量法Ce4+Fe3+指示剂:邻二氮菲 (+Fe2+) 红色淡蓝色（一）直接测定法例如：富马酸亚铁的含量测定 上一内容 下一内容 回主目录O返回（二）经水解后
12、测定法 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH (CH3)2CO +3NaCl + HCOONa +2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 Mg(C17H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2C17H35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O 1. 碱水解后测定法适用于X与脂肪链相连的卤代烷烃例如：三氯叔丁醇的含量测定 2. 酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定 上一内容 下一内容 回主目录O返回（三）经还原分解后测定法 指示剂：曙红钠终点：黄红适用于Ar-I的药物例
13、如：泛影酸的含量测定 上一内容 下一内容 回主目录O返回三、经有机破坏的分析方法凯氏定氮法金属原子、卤素等与C结合牢固者，必须有机破坏药物分析中常用的有机破坏的方法有 干法破坏湿法破坏 (一)湿法破坏H2SO4-HNO3法H2SO4-HClO4法H2SO4-硫酸盐法H2SO4-H2O2,HNO3-KMnO4法等 上一内容 下一内容 回主目录O返回（二）干法破坏 2.氧瓶燃烧法适用于含卤素、S、P等有机药物分析的前处理，也 用于某些药物中Se及砷盐的检查1. 高温炽灼法 加无水Na2CO3、硝酸镁、氢氧化钙或ZnO以助灰化 上一内容 下一内容 回主目录O返回1） 仪器装置 500ml, 1000
14、ml, 2000ml, 磨口、硬质玻璃锥形瓶 2）称样 固体样；液体样；软膏类样品要求3） 燃烧分解操作法 4） 吸收液的选择 用于X、S、Se等的鉴别、检查、含量测定时多数是H2O或H2O-NaOH；少数为H2O-NaOH-H2O2. 上一内容 下一内容 回主目录O返回应用示例：碘苯酯的测定返 回 上一内容 下一内容 回主目录O返回第三节 药品质量标准分析方法验证均需对分析方法进行验证验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、 定量限、线性、范围和耐用性目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。起草药品质量标准 生产工艺变更制剂组分改变 原分析方法修订 上一内容 下一内容 回主目录O返回一、准确度是指用该方法测定结果与真实值接近的程度， 用回收率表示（一）含量测定方法的准确度1. 原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测 定；或与已知准确度的另
