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1、艾滋病实验室的生物安全防范郭先锋山西医科大学第二医院检验科人类免疫缺陷病毒n人类免疫缺陷病毒（HIV）是获得性免疫缺陷 综合症（AIDS）的病原体。艾滋病即AIDS的 音译。nHIV是1983年法国巴斯德研究所Montagnier等 首次从一例慢性淋巴腺病的男性同性恋爱病人 血液中分离到的一株新逆转录病毒，称为淋巴 腺病相关病毒（LAV），1986年国际病毒分类 委员会将其命名为人类免疫缺陷病毒。艾滋病n艾滋病是获得性格免疫缺陷综合征（AIDS） 的简称，是由HIV引起的慢性传染病。HIV主 要侵犯破坏CD4+T淋巴细胞，导致机体细胞 免疫功能受损乃至缺陷，最终并发各种严重 机会性感染和肿瘤。
2、艾滋病特点n传播速度快n发病缓慢n病死率高HIV的分型nHIV-1：包括我国在内，是全球流行的主 要病毒株。nHIV-2：主要局限于西部非洲和西欧，北 美也有少量报告，传染性和致病性低。两型病毒的核甘酸序列同源性约40%- 60%。艾滋病的实验室检查一般检查n白细胞、血红蛋白、及血小板均可有不同 程度的减少。尿蛋白常阳性。艾滋病的实验室检查免疫学检查nT细胞总数降低， CD4+T淋巴细胞减少。 免疫球蛋白、B微球蛋白可升高。艾滋病的实验室检查血生化检查n可有血清转氨酶升高及肾功能异常艾滋病的实验室检查病毒及特异性抗原和（或）抗体的检测n分离病毒n抗体检测n抗原检测n核酸检测n蛋白芯片技术HIV
3、传染源与传播途径n传染源：HIV无症状携带者和艾滋病患者n传播途径：1.性接触传播2.经血液和血制品传播3.母婴传播4.其他 如职业暴露艾滋病的易感人群n人群普遍易感，15-49岁发病者占80%。儿 童和妇女感染率逐年上升。n高危人群：男性同性恋、静脉药物依赖者 、性乱者、多次接受输血和血制品者。n主要人群：青年成为艾滋病感染的主要人 群 。自2006年开始，每年报告HIV/AIDS中， 2029岁年龄组比例持续增加，约占当年 报告数 1/3，成为艾滋病病毒感染的主要 人群。 我省艾滋病疫情及流行特点n我省1995年发现第一例艾滋病感染者,截至到 2009年底，我省共累计报告HIV/AIDS3
4、422例, 其中艾滋病病人1572例,死亡888例.n2009年,我省共报告HIV/AIDS602例， 其中新 报告513例，既往订正89例。n2009年报告艾滋病病人167例，其中首次报告 101例，66例由既往HIV转为艾滋病病人。n2009年报告死亡109例。n分布在我省11个市114个县区，占全省119个县 区的95.80%。我省艾滋病流行特点疫情呈缓慢上升趋势，综合防治效果开 始显现 从2000年到2004年疫情呈快速上升趋 势，年平均增幅达164%；2005年以后 ，疫情上升趋势放缓，年平均增幅为 12%，综合防治效果开始显现。尽管疫 情增幅有所减缓，但由于新增感染数逐 年增加，基
5、数持续加大，危害仍在持续 加重。生物安全防范的内容n范围n规范性引用文件nHIV的生物危害nHIV相关检测的生物安全级别n生物安全保证措施n污染物的处理n意外事故处理n职业暴露后预防范围n艾滋病实验室安全防护n职业暴露预防规范性引用文件n医务人员艾滋病职业暴露防护工作指 导原则（试行）n实验室生物安全通用要求n微生物和生物医学实验室生物安全通 用准则n消毒技术规范（2002年版）HIV的生物危害nHIV 人类免疫缺陷病毒属于第二类病原微 生物，是高致病性病原微生物目的n加强病原微生物实验室生物安全管理中心点n保护实验室人员和公众的健康，我们任 何的疏忽都可能造成病原的传播主要的管理要点n建立实
6、验室生物安全委员会n实验室生物安全手册和评审n体系运作（质量管理体系和SOP文件）分工明确责任到人措施到位 HIV相关检测的生物安全级别nHIV抗体检测（包括筛查和确证实验） 、抗原检测和相关免疫学检测应在 级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾 滋病检测实验室中进行。HIV相关检测的生物安全级别nHIV分离培养、浓缩、中合实验、细胞 培养及研究工作及其他需要应用活病毒 的研究工作应在BLS-3中进行。HIV相关检测的生物安全级别nHIV核酸提取和检测均应在符合BSL-2要求 的艾滋病实验室中进行。HIV相关检测的生物安全级别nHIV病毒株应保存在符合BSL-3要求的艾滋 病实验室；HIV阳性
7、样品，包括全血、血 清、血浆、和其他组织(液)、核酸提取物 应保存在符合BSL-2要求的艾滋病实验室 。生物安全保证措施n建立安全制度n培训和管理n个人保健和防护制度n安全操作n使用利器注意事项建立安全制度n实验室的安全工作制度或安全标准操作 程序（S-SOP）n意外事故的处理预案，主要是生物安全 意外事故。n信息安全及保密制度培训和管理n实验室应进行安全培训并强化普遍性防护原则 的安全意识。n必须对新上岗人员进行安全教育和培训。n必须对新调入人员、外来合作、进修和学习的 人员进行生物安全培训。n生物安全培训和监督应该有客观详实的记录。n要根据人员特点、工作种类、所涉及的生物材 料合理安排工作
8、区域，定期对实验室环境进行 安全检查。个人保健和防护制度n遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适 合于工作的情况，应暂停工作。n皮肤的微小创口，搽伤，皲裂等，应用 防水敷料严密覆盖。 n应为每一位在艾滋病实验室工作的人员 提供充足的防护服，一次性乳胶手套， 口罩，帽子，和覆盖足背的工作鞋。 n实验室应该设置急冲洗眼睛装置。个人保健和防护制度n工作人员上岗前必须进行艾滋病抗体和 乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒等肝炎病 毒标志物检测，应接种乙肝疫苗。应每 年对工作人员采血检测艾滋病抗体，血 清应长期保留。个人保健和防护制度n 工作人员进实验室之前应摘除首饰，修剪长的 带刺的指甲，以免刺破手套。n 严禁在实
9、验室内进食，饮水，吸烟，和化妆。 n工作人员在试验操作时应穿合适防护服，戴手 套和口罩，穿实验室专用的工作鞋。如接触物 的传染性大，应戴双层手套；含有艾滋病的液 体有可能喷溅时，应戴防护眼镜穿防水围裙。个人保健和防护制度n工作人员在操作过程中，如发现防护服被污染 应立即更换，如手套破损，应立即丢弃，洗手 并换上新手套。不能用戴手套的手触摸暴露的 皮肤，口唇，眼镜，耳朵和头发等。不要将手 套清洗或消毒后再次使用。n试验操作必须使用移液器来操作试验的所有液 体。n工作结束，工作人员先脱去手套，再脱去防护 服，用肥皂和流动水洗手。 安全操作n 试剂及样品的管理应该严格按要求妥善保存血清及其他体 液样
10、品，应按有关规定设立专门储存阳 性血清，指控品的血清库，对存放试剂 的区域专人管理。安全操作实验室的清洁和消毒工作n工作完毕后对工作台面消毒，推荐用0.1- 0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洁 后要干燥20分钟以上。操作过程中如有 样品，检测试剂外溅，应该及时消毒。 如有大量高浓度的传染性液体溅出，在 清洁之前应该先用1%的次氯酸钠溶液浸 泡，然后戴上手套擦净。安全操作样品的采集和处理n抽取静脉血液时注意安全，戴手套，谨慎操作 ，防止血液污染双手。应小心防止被针头和其 他利器刺伤。n离心样本时要密闭，防止离心时液体溢出。打 开样品容器时要小心，防止内容物泼溅。要核 对样品与送检单，检查样品
11、管有无破损和溢漏 。如发现溢漏应该立即将尚存留的样品移出， 对样品管和盛器进行消毒。安全操作样品的带入、带出和操作n不得将非实验室物品带入实验室n包装有测试样品的包裹应在实验室的安 全柜内打开，不能在收发地点或仓库等 地点打开，同时，打开包裹的人员应受 过处理感染源方面的训练并穿戴合适的 防护服；实验室应具有处理感染源的设 备并准备好可消毒的容器安全操作样品的带入、带出和操作n打开样品容器时要小心，防止内容物泼溅。 要核对样品与送检单，检查样品管有无破损 和溢漏。如发现溢漏应该立即将尚存留的样 品移出，对样品管和盛器进行消毒，同时要 按照程序报告有关负责人。安全操作样品的带入、带出和操作n要检
12、查样品的状况，记录有无严重溶血、 微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。 如果污染过于严重或者认为不能接受，则 将样品用安全方式废弃，同时将情况通知 送样人。安全操作样品的带入、带出和操作n常规处理血液、体液样本可在工作台上进行 ，如样品有可能溅出，则应戴手套、口罩和 防护眼镜，在生物安全柜中操作。n将样品转送到其他实验室时，应防止对工作 人员、患者或环境造成污染。n将污染或可能污染的材料在带出实验室前应 进行消毒。用后的包裹应进行消毒。安全操作使用利器的注意事项n应尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻 璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用 ，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或 划伤，并应对用过的
13、物品进行消毒。n应使用安全针具采血，如蝶形真空针，自 毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤 的危险性。安全操作使用利器的注意事项n应将用过的锐器直接放入耐穿，防渗漏的 利器盒，用过的针头应直接放入坚固的容 器内，消毒后废弃n禁止将使用后的一次性针头重新套上针头 套。禁止用手直接接触使用过的针头、刀 片等利器。污染物的处理n艾滋病实验室产生的所有废物，包括不 再需要的样品、培养物和其它物品，均 应视为感染性废物，应置于专用的密闭 防漏容器中，安全运送到消毒室，经高 压消毒后再进行处理和废弃。污染物的处理艾滋病实验室常用的消毒方法n物理消毒方法n化学消毒方法n艾滋病检测实验室物品常用的消毒方法污染
14、物的处理艾滋病实验室常用的消毒方法 物理消毒方法n高压蒸汽消毒n干燥空气烘箱消毒污染物的处理艾滋病实验室常用的消毒方法 化学消毒方法n含氯消毒剂n75%的酒精n2%的戊二醛污染物的处理艾滋病实验室常用的消毒方法 艾滋病检测实验室物品常用的消毒方法n废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠。n生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙 醇n溢出物： 5000mg/L次氯酸钠。n污染的台面和器具： 2000mg/L次氯酸钠。 也可以用过氧化化氢或过氧乙酸。器械可 用2%的戊二醛消毒。意外事故的处理n报告n应急预案启动n危险度评估n感染性物质事故预防控制措施n封闭场所n开展流调n医学检查n医学观察n医学消毒n
15、隔离扑杀n2小时内报告举例意外事故的处理n皮肤针刺伤或切割伤，应立即用肥皂和大 量流水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液， 用75%的乙醇或其他消毒剂消毒伤口。n皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染的部位， 并适当的消毒皮肤n粘膜污染：用大量的流水或生理盐水冲洗 污染部位举例意外事故的处理n衣物污染：尽快脱掉衣物进行消毒处理n污染物泼溅：小范围应立即进行消毒处理和 清洗。大范围泼溅事故时应立即通知实验室 主管领导和安全负责人到达事故现场，查清 情况，确定消毒程序。职业暴露n概念职业暴露指医务人员从事诊疗护理检验等 工作过程中意外被艾滋病病毒感染者或者 艾滋病病人的血液、体液污染了皮肤或者 粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、体 液污染了的针头及其他锐器刺破皮肤，有 可能被艾滋病病毒感染的情况。职业暴露后预防四条原则n及时处理原则n报告原则n保密原则n知情同意原则职业暴露艾滋病职业暴露后预防（PEP）n局部急救处理n对暴露感染的危险进行评估：包括对暴 露的评估和对暴露源的评估n确定是否需要药物预防及其方案时刻牢记n规范的实验室操作技术是实验室生物安 全的基础。
