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1、第二章 菌种的扩大培养 定义：菌种的扩大培养就是把保藏的 菌种，即砂土管，冷冻干燥管中处于 休眠状态的生产菌种接入试管斜面活 化，再经过扁瓶或药瓶和种子罐，逐 级扩大培养后达到一定的数量和质量 的纯种培养过程。这些纯种的培养物 称为种子。 种子必须具备的条件菌种细胞的生长活力强，接种后在发酵罐中能迅速生长 生理性状稳定 菌体总量和浓度能满足大容量发酵罐的要求 无杂菌污染（不带杂菌） 生产能力稳定 种 子 制 备 过 程实验室种子制备阶段：琼脂 斜面至固体培养基扩大培养 （如茄子瓶斜面培养等或液 体摇瓶培养 生产车间种子制备阶段：种 子罐扩大培养 实验室种子制备 在砂土管或冷冻干燥管内保藏的菌种
2、以无菌的方式接至适合的斜面培养基上，培养成熟后挑选正常的菌落 再接一次试管斜面并至摇瓶。 生产车间种子制备 实验室制备的孢子斜面或摇瓶种子移接到种子罐 进行扩大培养 种子罐培养一方面使菌种获得足够的数量，另一 方面种子罐中的培养基更接近发酵罐培养的醪液 成分和培养条件，譬如通无菌空气，搅拌形式等 等，以使菌体适应发 酵环境 种子罐级数的确定 种子罐的级数是指制备种子需逐级扩大培养 的次数 对于生长快的细胞，种子用量的比例少，即 需要的接种量少，所以相应的种子罐也少 接种种龄和接种量 接种龄 种子罐中培养的菌体从开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间 接种量 接种量指的是移入的种子悬浮液体积和接种后培养液体的体 积的比例 种子质量的判断 种子质量的控制措施 菌种稳定性的检查 将保藏菌株溶于无菌的生理盐水中，逐级稀释，然后在培养皿琼脂固体培养基上划线培养，长出菌落，选择形态优良的菌落接入三角瓶进行液体摇瓶培 养，检测出生产率高的菌种备用 杂菌检查 显微镜观察，或平板培养试验，即将种子液涂在平板培养皿上划线培养，观察有无异常菌落，定时检 查，防止漏检
