《肿瘤患者外周血t淋巴细胞活化前后foxp3、fasfasl的表达及意义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肿瘤患者外周血t淋巴细胞活化前后foxp3、fasfasl的表达及意义（39页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、肿瘤学专业毕业论文肿瘤学专业毕业论文 精品论文精品论文 肿瘤患者外周血肿瘤患者外周血 T T 淋巴细胞活淋巴细胞活化前后化前后 FOXP3FOXP3、Fas/FasLFas/FasL 的表达及意义的表达及意义关键词：关键词：FOXP3FOXP3 T T 淋巴细胞淋巴细胞 CD28CD28 单抗单抗 肿瘤患者肿瘤患者摘要：目的： 通过激活患者自身免疫系统，诱导特异性细胞免疫，可以增强 机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目 的。近几年研究发现被肿瘤特异性抗原调节 T 细胞(Treg)激活的反调节效应 T 细胞在肿瘤治疗的作用上有重要的抑制作用。本文旨在检测肿瘤患者外
2、周血 T 淋巴细胞的体外增殖活化情况，同时分析其活化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表 达。为临床肿瘤患者的免疫治疗提供理论基础。 方法： 本研究在苏大免 疫所自行研制的鼠抗人 CD28 激发型单克隆抗体(2F5)的基础上，采用腹水诱生 法及免疫亲和层析法进行单抗的获取和纯化，Ficoll 密度梯度离心法获取肿瘤 患者外周血 T 淋巴细胞。利用 CD3 单抗联合 CD28 单抗体外活化 T 淋巴细胞。 MTT 法检测 T 细胞的增值效应，ELISA 法检测活化 T 淋巴细胞培养上清中 IL- 2、及 IL-10 的分泌，免疫荧光及流式细胞术分析其经激发性 CD28 单抗联合 CD3
3、 单抗活化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。 结果： 膜水诱生法获得 了 CD28 单克隆抗体 3.8 mg/ml。MTT 实验结果表明，72h 时，激发性 CD28 单抗 联合抗 CD3 单抗，可较好促进 T 淋巴细胞(患者及对照组)的显著增殖。ELISA 检测结果显示，CD3 单抗联合激发型 CD28 单抗作用组中 IL-2 的分泌含量增高， IL-10 的分泌含量降低。经免疫荧光及流式细胞术对肿瘤患者外周血 T 淋巴细 胞中 Treg 细胞的特异性标志 FOXP3 蛋白进行检测，结果显示，肿瘤患者外周血 中 FOXP3 蛋白表达比例为(6.2082.754)，对照组为(2
4、.530.638)，而活 化后比例为(5.4883.675)。对照组为(2.1731.137)。同时 T 淋巴细胞 表面的 Fas/FasL 的检测结果显示 Fas 的表达为(1.4670.590)，对照组为 (1.1220.598)，活化后分别为(3.6921.822)、(3.60.657)，而 FasL 表达二者分别为(2.891.027)、(2.5320.967)，活化后 FasL 分别 为(7.2522.23)、(7.962.938)。 结论： 肿瘤患者外周血 T 淋巴 细胞在 CD3 单抗联合 CD28 单抗作用下可有效活化增殖。且经体外活化后免疫力 得到一定程度的恢复。Treg 细
5、胞的特异性标志 FOXP3 蛋白与疫缺陷呈明显的正 相关。Fas/FasL 的表达，一方面与肿瘤细胞免疫逃逸机制相关，另可能为 FOXP3 下调的原因。尚需进一步研究中和 Treg 的抑制作用在促进诱导效应 T 细 胞反应方面的疗效。正文内容正文内容目的： 通过激活患者自身免疫系统，诱导特异性细胞免疫，可以增强机 体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的。 近几年研究发现被肿瘤特异性抗原调节 T 细胞(Treg)激活的反调节效应 T 细胞 在肿瘤治疗的作用上有重要的抑制作用。本文旨在检测肿瘤患者外周血 T 淋巴 细胞的体外增殖活化情况，同时分析其活化前后 FOXP3
6、 以及 Fas/FasL 的表达。 为临床肿瘤患者的免疫治疗提供理论基础。 方法： 本研究在苏大免疫所 自行研制的鼠抗人 CD28 激发型单克隆抗体(2F5)的基础上，采用腹水诱生法及 免疫亲和层析法进行单抗的获取和纯化，Ficoll 密度梯度离心法获取肿瘤患者 外周血 T 淋巴细胞。利用 CD3 单抗联合 CD28 单抗体外活化 T 淋巴细胞。MTT 法 检测 T 细胞的增值效应，ELISA 法检测活化 T 淋巴细胞培养上清中 IL-2、及 IL-10 的分泌，免疫荧光及流式细胞术分析其经激发性 CD28 单抗联合 CD3 单抗 活化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。 结果：
7、 膜水诱生法获得了 CD28 单克隆抗体 3.8 mg/ml。MTT 实验结果表明，72h 时，激发性 CD28 单抗联合抗 CD3 单抗，可较好促进 T 淋巴细胞(患者及对照组)的显著增殖。ELISA 检测结果 显示，CD3 单抗联合激发型 CD28 单抗作用组中 IL-2 的分泌含量增高，IL-10 的 分泌含量降低。经免疫荧光及流式细胞术对肿瘤患者外周血 T 淋巴细胞中 Treg 细胞的特异性标志 FOXP3 蛋白进行检测，结果显示，肿瘤患者外周血中 FOXP3 蛋白表达比例为(6.2082.754)，对照组为(2.530.638)，而活化后比例 为(5.4883.675)。对照组为(2
8、.1731.137)。同时 T 淋巴细胞表面的 Fas/FasL 的检测结果显示 Fas 的表达为(1.4670.590)，对照组为 (1.1220.598)，活化后分别为(3.6921.822)、(3.60.657)，而 FasL 表达二者分别为(2.891.027)、(2.5320.967)，活化后 FasL 分别 为(7.2522.23)、(7.962.938)。 结论： 肿瘤患者外周血 T 淋巴 细胞在 CD3 单抗联合 CD28 单抗作用下可有效活化增殖。且经体外活化后免疫力 得到一定程度的恢复。Treg 细胞的特异性标志 FOXP3 蛋白与疫缺陷呈明显的正 相关。Fas/FasL
9、的表达，一方面与肿瘤细胞免疫逃逸机制相关，另可能为 FOXP3 下调的原因。尚需进一步研究中和 Treg 的抑制作用在促进诱导效应 T 细 胞反应方面的疗效。 目的： 通过激活患者自身免疫系统，诱导特异性细胞免疫，可以增强机体的 抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的。近 几年研究发现被肿瘤特异性抗原调节 T 细胞(Treg)激活的反调节效应 T 细胞在 肿瘤治疗的作用上有重要的抑制作用。本文旨在检测肿瘤患者外周血 T 淋巴细 胞的体外增殖活化情况，同时分析其活化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。为 临床肿瘤患者的免疫治疗提供理论基础。 方法： 本研究
10、在苏大免疫所自 行研制的鼠抗人 CD28 激发型单克隆抗体(2F5)的基础上，采用腹水诱生法及免 疫亲和层析法进行单抗的获取和纯化，Ficoll 密度梯度离心法获取肿瘤患者外 周血 T 淋巴细胞。利用 CD3 单抗联合 CD28 单抗体外活化 T 淋巴细胞。MTT 法检 测 T 细胞的增值效应，ELISA 法检测活化 T 淋巴细胞培养上清中 IL-2、及 IL- 10 的分泌，免疫荧光及流式细胞术分析其经激发性 CD28 单抗联合 CD3 单抗活 化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。 结果： 膜水诱生法获得了 CD28 单 克隆抗体 3.8 mg/ml。MTT 实验结果表明，7
11、2h 时，激发性 CD28 单抗联合抗 CD3 单抗，可较好促进 T 淋巴细胞(患者及对照组)的显著增殖。ELISA 检测结果显示，CD3 单抗联合激发型 CD28 单抗作用组中 IL-2 的分泌含量增高，IL-10 的分 泌含量降低。经免疫荧光及流式细胞术对肿瘤患者外周血 T 淋巴细胞中 Treg 细 胞的特异性标志 FOXP3 蛋白进行检测，结果显示，肿瘤患者外周血中 FOXP3 蛋 白表达比例为(6.2082.754)，对照组为(2.530.638)，而活化后比例为 (5.4883.675)。对照组为(2.1731.137)。同时 T 淋巴细胞表面的 Fas/FasL 的检测结果显示 F
12、as 的表达为(1.4670.590)，对照组为 (1.1220.598)，活化后分别为(3.6921.822)、(3.60.657)，而 FasL 表达二者分别为(2.891.027)、(2.5320.967)，活化后 FasL 分别 为(7.2522.23)、(7.962.938)。 结论： 肿瘤患者外周血 T 淋巴 细胞在 CD3 单抗联合 CD28 单抗作用下可有效活化增殖。且经体外活化后免疫力 得到一定程度的恢复。Treg 细胞的特异性标志 FOXP3 蛋白与疫缺陷呈明显的正 相关。Fas/FasL 的表达，一方面与肿瘤细胞免疫逃逸机制相关，另可能为 FOXP3 下调的原因。尚需进一
13、步研究中和 Treg 的抑制作用在促进诱导效应 T 细 胞反应方面的疗效。 目的： 通过激活患者自身免疫系统，诱导特异性细胞免疫，可以增强机体的 抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的。近 几年研究发现被肿瘤特异性抗原调节 T 细胞(Treg)激活的反调节效应 T 细胞在 肿瘤治疗的作用上有重要的抑制作用。本文旨在检测肿瘤患者外周血 T 淋巴细 胞的体外增殖活化情况，同时分析其活化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。为 临床肿瘤患者的免疫治疗提供理论基础。 方法： 本研究在苏大免疫所自 行研制的鼠抗人 CD28 激发型单克隆抗体(2F5)的基础上，采用腹
14、水诱生法及免 疫亲和层析法进行单抗的获取和纯化，Ficoll 密度梯度离心法获取肿瘤患者外 周血 T 淋巴细胞。利用 CD3 单抗联合 CD28 单抗体外活化 T 淋巴细胞。MTT 法检 测 T 细胞的增值效应，ELISA 法检测活化 T 淋巴细胞培养上清中 IL-2、及 IL- 10 的分泌，免疫荧光及流式细胞术分析其经激发性 CD28 单抗联合 CD3 单抗活 化前后 FOXP3 以及 Fas/FasL 的表达。 结果： 膜水诱生法获得了 CD28 单 克隆抗体 3.8 mg/ml。MTT 实验结果表明，72h 时，激发性 CD28 单抗联合抗 CD3 单抗，可较好促进 T 淋巴细胞(患者
15、及对照组)的显著增殖。ELISA 检测结果显 示，CD3 单抗联合激发型 CD28 单抗作用组中 IL-2 的分泌含量增高，IL-10 的分 泌含量降低。经免疫荧光及流式细胞术对肿瘤患者外周血 T 淋巴细胞中 Treg 细 胞的特异性标志 FOXP3 蛋白进行检测，结果显示，肿瘤患者外周血中 FOXP3 蛋 白表达比例为(6.2082.754)，对照组为(2.530.638)，而活化后比例为 (5.4883.675)。对照组为(2.1731.137)。同时 T 淋巴细胞表面的 Fas/FasL 的检测结果显示 Fas 的表达为(1.4670.590)，对照组为 (1.1220.598)，活化后
16、分别为(3.6921.822)、(3.60.657)，而 FasL 表达二者分别为(2.891.027)、(2.5320.967)，活化后 FasL 分别 为(7.2522.23)、(7.962.938)。 结论： 肿瘤患者外周血 T 淋巴 细胞在 CD3 单抗联合 CD28 单抗作用下可有效活化增殖。且经体外活化后免疫力 得到一定程度的恢复。Treg 细胞的特异性标志 FOXP3 蛋白与疫缺陷呈明显的正 相关。Fas/FasL 的表达，一方面与肿瘤细胞免疫逃逸机制相关，另可能为 FOXP3 下调的原因。尚需进一步研究中和 Treg 的抑制作用在促进诱导效应 T 细 胞反应方面的疗效。 目的： 通过激活患者自身免疫系统，诱导特异性细胞免疫，可以增强机体
