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1、1第十四章 基因工程疫苗传统疫苗通常是将致病病毒的毒性减到很小或是死病毒，以病毒让人体免疫系统产生抵抗病毒的抗体，从而在体内产生抗体防御，进而预防病毒入侵。2传统疫苗又可分为减毒活疫苗、灭活疫苗，具有免疫力全面以及制造成本低的优势，目前仍然占据着较大的市场分额。灭活疫苗 如乙型脑炎疫苗狂犬病疫苗减毒疫苗 如脊髓灰质炎疫苗麻疹疫苗3基因工程疫苗将编码有效抗原组分的目的基因插 入适当载体,形成重组DNA, 再导入宿主 细胞, 使目的基因表达大量有效抗原成 分, 由此制备的疫苗称为基因工程疫苗例如把HBsAg基因插入酵母细胞中， 成功表达并制备HBsAg疫苗4第一节 基因工程活疫苗一.基因缺失活疫苗
2、利用基因重组的方法，删除病原体的毒力相关基因，使病原体丧失致病性，但仍保留 增殖能力和免疫原性。激发长期和有效的免 疫应答。5二.基因工程活载体疫苗利用改造过的无毒的病毒或细菌做为载体，重组病原体的抗原基因，组成活载体疫苗。进入体内后抗原基因表达，从而激发受体的细胞和体液免疫。常用的载体有痘苗病毒、腺病毒、脊髓灰质炎病毒、重组细菌如减毒沙门菌、卡介苗、大肠杆菌。6第二节 基因工程亚单位疫苗用适当的表达系统生产病原体抗原，经过分离、纯化，应用于人体。如基因工程的乙型肝炎疫苗已使用多年，效果确实。此类疫苗的缺点是难以诱导细胞免疫。疫苗免疫原性弱，一般需加佐剂或与类毒素结合成偶联疫苗，以加强免疫原性
3、7基因工程乙肝疫苗（酵母重组）是一种乙肝表面抗原（HbsAg）亚单位疫苗，它系采用基因工程技术将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，克隆进入啤酒酵母菌中，通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位。 8自1985年以来，我国一直采用接种血源乙肝疫苗预防乙肝，血源乙肝疫苗对控制我国乙肝大面积流行起了很大作用，但是，由于血源乙肝疫苗需用乙肝病毒表面抗原携带者的血浆为原料，它具有一些自身无法克服的缺点：一.乙肝表面抗原携带者由于已感染乙肝病毒，在此情况下，再抽取其血浆作为乙肝疫苗原料，对携带者的身体健康有损害；9二.疫苗的生产受到乙肝病毒表面抗原携带者血浆来源和质量限制，无法大规模稳定生产；
4、三.在表面抗原阳性血浆的采集、运输和加工过程中，存在着引发血源性传染病流行的可能性；10四.在血源乙肝疫苗的生产过程中，采用三步灭活工艺，但三步灭活不足以将血源中所有已知和未知的潜在致病因子全部灭活，难以最大限度地保证血源乙肝疫苗受种者绝对安全；五.如上所述，为了灭活乙肝病毒，需采用三步灭活工艺，但三步灭活对疫苗的免疫原性有影响。 11基因工程乙肝疫苗（酵母重组）的生产：高效稳定的大规模工业化生产是基因工程乙肝疫苗的一大优势。我国目前基因工程乙肝疫苗（酵母重组）的产品质量稳定，产量及销量不断增加，已能满足市场需求。 12基因工程乙肝疫苗（酵母重组）的生产：基因工程乙肝疫苗（酵母重组）的生产包括
5、发酵、提取、纯化、吸附、配制、分装等工序。生产中采用世界一流的发酵罐，通过全自动控制，提供酵母菌最优生长条件，发酵后经过细胞破碎和一系列微滤、超滤、吸附、洗脱等工序，再经过层析分离，可使产品抗原蛋白纯度达99%以上。13Pilot Biostat UD5014基因工程乙肝疫苗免疫效果基因工程乙肝疫苗能有效阻止乙肝的传播。它通过主动免疫的方式使人获得对乙肝的抵抗力。大量临床资料表明：它是一种安全有效的制品，其抗体阳转率在95%以上，母婴阻断率在85%以上，基因工程乙肝疫苗有着远高于血源乙肝疫苗的母婴阻断效果。15第三节 核酸疫苗概念：将编码保护性抗原的基因克隆到真核表达载体上，经一定的途径导入人
6、体，被人体细胞摄取并表达抗原蛋白，激活机体免疫系统，产生免疫保护。1619901990年沃尔夫（年沃尔夫（WOffWOff）等发现，将带有甲）等发现，将带有甲型流感病毒核蛋白编码基因的质粒注射到小鼠型流感病毒核蛋白编码基因的质粒注射到小鼠肌肉内，可使小鼠能经受致死剂量的甲型流感肌肉内，可使小鼠能经受致死剂量的甲型流感病毒的攻击。这种裸露的病毒的攻击。这种裸露的DNADNA通过滴鼻和肠道也通过滴鼻和肠道也可以进人细胞，并获得成功的保护性免疫。这可以进人细胞，并获得成功的保护性免疫。这种具有疫苗作用的裸露种具有疫苗作用的裸露DNADNA称之为核酸称之为核酸疫苗疫苗。 17已投入使用（含临床试验）的基因工程疫苗18
