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1、广 西科 学 Gu a n g x i S c i e n c e s 2 0 0 1 ，8 g 3 ) ：2 0 4 2 0 9 细胞松 弛素 B诱导马 氏珠 母贝 四倍体形成 机制研 究 M e c ha n i s m o f t he Fo r ma t i o n o f Te t r a p l o i d s o f Pi n c t a d a ma r t e n s i i I nd u c e d wi t h Gy t o c h a l a s i m B 兰 国 宝 谢 若痴 阎 冰 叶力 陈 文 广 王 爱 民 L a n Ou o h a o Xi e Ru o
2、 z h i Ya n B i n g Ye I i Ch e n W e n g u a n g W a n g Ai mi n g ( 广西 海洋 研究 所北 海市 长青东路 g 2 号5 3 6 0 0 0 ) ( Gu a n g x i I n s t i t u t e o f( e a n o g r a p h y，9 2 Ea s t Ch a n g q i n g l u， Be i h a i ，Gu a n g x i ，5 3 6 0 0 0 Ch i n a ) 摘 要 为 了解 在珍 珠 m 多倍 体 诱 导 巾 四倍体 形 成 的机 制 ，用 醋 酸地 衣 红
3、 染 色技 术 研 究抑 制 马氏珠 j 廿 ! ( P i n c t a d a m a r t e ml i j 受精 卵第 一极体排放后 的染色体行为 。 试验用 儿为人工养殖 叭， 田龄 为2 -3 龄 试验用水 为 沙滤海水 海水比重1 0 l 8 1 0 2 仉 p H 缸s 1 0 4 8 3 0 = 8( 、 ( 、 工授精，授精 前用6 】 氨水处理卵子 1 0 rai n l 5 mi n 。 处理组I L J 0 5 mg 细胞 松弛素 B ( c B 处理受精卵】 5 mm：对照组为小做任何处理 的受精卵。 受精后每隔3 rai n取样 观察 直至受精后6 0 mi
4、n观 察结 袁叫 在第2 趺减数分裂期问 染色体分离有4 种 丰要 类型 即 “ 随机三扳分离 ”( 2 8 1 ) 、 不混 合三槛分离 ( 7 6 ) 、 联台 l嘏报分离” ( 】 9 3 )和 离散 碾槛 分离”r 1 3 6 ) ，余下的3 1 5 因染色体混乱或难 以确 定而无法分类 ，但埘 于是 1 种分 离的变体 。 在受精后 3 3 mi n 4 2 mi n ，在联合双嵌 、三极 和离散 烈极分离的细胞 中分别形成2 s 和4 4 “ 朦棱 。 将各种分 离类型所出现 的频率 与产生 的 三倍体 ( 3 3 )和四倍体 ( 2 0 )比较 表明导致 四倍 体形成 的是 “
5、离散l嘏极分离” 混 台 三 极分离 也可能导致 网倍体 的形成 ；导致三倍体形成的足 鞋合积极分离” ； 导致非整倍体形成 的 随机 - 极 分离”和其他不规则的分离 。 关键词 马氏珠母贝 受精卵 染色体分离 四倍 体 中图法分 类号S 9 6 8 3 1 6 ：Q 3 4 3 2 4 Ab s t r a c t To p r o b e i n t o t h e m e c h a n i s m b e h i n d t h e f o r ma t i o n o f t e t r a p l o i d s I n mu t i p l o i d i n du c t i
6、 o n o f p e a r 1 o y s t e r， c hr o m o s o me b e h a v i o u r i n f e r t i l i z e d e g g s o f Pi n c t a da ma r t e n s l l f o l l o wi ng i n hi b i t i o n o f t h e f i r s t p o l a r b o d y , ( P B1 )wa s s t u d i e d wi t h a c e t i c o r c e i n s t a i n i n g t e c h n i q u
7、e s Th e p a r e n t p e a r 1 o y s t e r s us e d we r e c ofl e c t e d f r o m t he c u l t ur e d p o pu l a r i O i l a g e d t wo ( 0 t h r e e y e a r s Ga n l e t e s we r e o b r a i n e d b y s t r i p s p a wn i n g A1 l f e r t i l i z a t i o n a n d i n c u h a t i o n x ,- e r e c o
8、n d u c t e d a t 2 6( t o 2 8 u a i n g f i l t e r e d s e a wa t e r wi t h s p e c i f i c gr a v i t y o f】 0l 8 t o】 0 2 0 a n d pH v a l u e 8 1 0 t o 8 3 0，Eg g s we r e a c t i v a t e d b v a n a i ； q o l i a wh h a c o n c e n t r a t i o n o f 6 0 】 0 f o r】 0 rain t o l 5 mj n b e f o
9、r e i n s e mi n a t i o n TwD e x p e r i me n t a l gr o u ps we r e p r od u c e d a f t e r i ns e r n i n a t i o nI n t h e t r e a t e d gr o up， t h e f e r t i l i z e d e g g s we r e t r e a t e d wi t h 0 5 r n g I c y t o c h a l a s i n B ( CB)f o r l 5 n fi n b e g i n n i n g a t 5 m
10、i n a f t e r i n s e n fi n a t i o n I n t he u n t r e a t e d gr o u p， t he f e r t i l i z e d e g gs we r e a l l o we d t o d e v e l o p a s c o n t r o l s S a mp l e s f o r a n a l y s i s we r e c o l l e e r e d e v e r y t h r e e mi n u t e s f r o n t t h e b e g i n n i n o f f e r
11、 t i l i z a t i o n t o 6 0 mi n p o s t f e r t i l i z a t i o n Th e r e s ul t s s ho we d t h a t i n t he t r e a t e d g r o u pf o u r t y p e s o f c hr o mo s o me s e gr e g a t i o n we r e f o un d l n t hee o n d me i o s i s ( M I I )n a me l y “ r a n do mi z e d t r i p o l a r s e
12、 g r e g a t i o n” ( 2 8 1 )“ u n m i xe d t r i p o l a r s e g r e g a t i o n” ( 7 6 ) ，“ u n i t e d b i p o l a r s e g r e g a t i o n ” ( 】 9 3 )a n d“ s e p a r a t e d b i p o l a r s e g r e g a t i o n” ( 】 3 6 ) Th e r e ma i n i n g 3 1 5 c o u l d n o t h e c l a s s i f i e d b e c a
13、 u s e o f c h r o tT t O S o l n e d i s o r g a n i z a t i o n h u t a p p e a r e d t o b e v a r 1a n t s o f t h e a b o v e At 3 3 mi n t o 4 2 n a i n p o s t f e r t i h z a t i o n t WO t h r e e a n d f o u r f e ma l e p r o n u c l e i c o u l d h e s e e n r e s p e c t i v e l y i n t
14、 h e e g g s wi t h u n i t e d b i p o l a r ， t r i p o l a r a n d s e p a r a t e d b i p o l a r s e gr e g a t i o nI n c o m p a r i s o n wi t h t he f r e qu e nc i e s o f s e g r e g a do n p a t t e r n s a n d t he t u r n o u t o ft r i p l o id ( 3 3 ) a n dt e t r a p l o i d 【 2 2 )
15、 ，I t s e e me d c l e a rt h a t r e s u l t t n gi nt e t r a p l o i d s wa s s e p a r a t e d b i po l a r s e g r e g a t i o n，a n d u n mi x e d t r i p o l a r s e g r e g a t i o n n fi g ht a s o d e v e o p t o t e t r a p l o i d s；r e s ul t i n g i n t r i p l o i d s wa s u n i t e d b i p o l a r s e g r e g a t i o n a n d r e s u l t ing
