《硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究秦雯娜》由会员分享，可在线阅读，更多相关《硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究秦雯娜（18页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、题目 硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究作者姓名 秦雯娜指导教师 陈有亮二级学院 西安培华学院专 业 药学学 号 9B093122硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究硒化乳酸菌胞外多糖理化性质及其抗氧化活性研究摘 要目的目的：本文对制备的硒化乳酸菌胞外多糖进行了理化性质及其抗氧化活性的研究。方法方法：通过理化性质实验得出，它是一种溶于水，不溶于乙醇，丙酮，氯仿等有机溶剂的不含淀粉多糖的多糖；通过硒化与未经硒化乳酸菌胞外多糖清除超氧自由基，羟自由基的能力以及他们的总抗氧化能力实验。结果结果：经硒化的乳酸菌胞外多糖在多糖浓度为8mg/m
2、L 时对超氧阴离子自由基清除率为61.25%，相比硒化前的多糖在同样浓度下对超氧阴离子自由基的清除率41.74%提高了19.51%；而在多糖浓度为8mg/mL 时对羟自由基的清除率从54.94%提高到74.18%，提高了19.24%；在多糖浓度为10mg/mL 时，硒多糖的总抗氧化能力为9.7（U/L） ，未经硒化的总抗氧化能力7.4（U/L） ，提高了2.3（U/L） 。结论结论：说明硒化乳酸菌胞外多糖比未硒化乳酸菌胞外多糖的抗氧化活性更强。关键词：乳酸菌；硒多糖；抗氧化活性The research on Antioxidant activity to Selenium Exopolysac
3、charides of lactic acid bacteriaAbstractPurpose:A research of physical and chemical properties and antioxidant activity to selenium exopolysaccharides of lactic acid bacteria in this paper.Methods：The physical and chemical properties experiments showed that selenium exopolysaccharides of lactic acid
4、 bacteria is a polysaccharide that soluble in water but insoluble in organic solvents like ethanol, acetone, chloroform,etc, and is non-starch polysaccharides; The scavenging of superoxide radical and hydroxyl radical and total antioxidant capacity to selenium andnon-seleniumexopo-lysaccharides of l
5、actic acid bacteria was researched.Results:The results showed that the superoxide anion radical scavenging rate was 61.25% in the selenium exopolysaccharides of lactic acid bacteria concentration 8mg/mL, compared to the scavenging rate of non-selenium exopolysaccharides of lactic acid bacteria 41.74
6、% increase 19.24% from 54.94% to 74.18%, when the concentration of 10mg/mL in polysaccharide, the total antioxidant capacity of polysaccharide increased 2.3（U/L） from 7.4（U/L） to 9.7（U/L）.Conclusion: Description Selenium exopolysaccharides of lactic acid bacteria than lactic acid bacteria without EP
7、S selenium antioxidant activity stronger.Keywords：Lactic acid bacteria; Selenium Polysaccharide; Antioxidant activity目 录引 言 .11材料 .21.1 材料 .21.2 仪器与设备 .21.3 试剂 .32方法与结果 .32.1 方法与结果 .32.1.1 多糖的溶解性 .32.1.2 多糖的鉴别与分析 .3 2.1.3 乳酸菌胞外多糖多糖成分分析 .4 2.2 体外抗氧化活性的测定 .52.2.1 对超氧阴离子自由基（O2-）清除能力的测定 .52.2.2 羟自由基（ OH
8、）清除能力测定 .72.2.3 总抗氧化能力测定 .83讨论 .9结论 .11主要参考文献 .12致谢 .14引引 言言胞外多糖(ExopolysaccharidesEPS)是由细菌和微型藻类在生长过程中分泌到细胞外的长链多糖。EPS 常常以荚膜多糖和黏多糖两种形式存在，但对于微生物来说,主要是指不与细胞表面永久粘附的黏多糖3。多糖的提取工艺在国内外的研究已经有很多4。微生物 EPS 具有增稠和凝胶的特性，已被用作工业中的增稠剂、凝胶剂和稳定剂。但是，乳酸菌具有公认的安全性,其产生的 EPS 可以替代工业微生物多糖广泛用于食品药品配方中。而且，大量的研究证实乳酸菌产生的 EPS 具有抗肿瘤活性
9、、免疫激活作用、降低血清胆固醇和益生元作用等，对人类的健康有着重要的意义5,6。因此，乳酸菌 EPS 应用于医药和工业中的潜力很大，认识、改造和利用乳酸菌 EPS 对于提升药品的质量和增加药品的功能具有重要意义。近几十年来, 由于微生物胞外多糖在产品结构、性能及生产方面所具有的特殊优势而得到大力研究和开发, 微生物胞外多糖的开发已成为工业微生物研究的热点之一。由于乳酸菌是工业生产菌, 与其他菌相比安全性高, 所以近年来对乳酸菌胞外多糖的研究逐渐增多。硒多糖是硒的一种有机存在形式，相对无机硒7而言有机硒8毒性低、副作用小，能够更好地发挥硒的生理活性9。有机硒主要包括硒多糖、硒氨基酸、硒蛋白和硒核
10、酸等，其中硒多糖不但具有无机硒的多种活性，还具有多糖的各种生理功能，并且硒多糖的活性普遍高于硒和多糖，也更利于被机体吸收利用10。天然硒多糖一般存在于植物或微生物中，但含量较低，即使在高硒地区的富硒植物或微生物中，硒多糖中的硒含量也相对较低。因此，研究者们试图通过一些富硒手段如人工协迫富硒栽培、富硒酵母培养等，使生物体中硒多糖的硒含量增加。此外，通过多糖硒化修饰或化学合成等化学方法也可以获得大量的硒多糖11。已经有不少关于硒多糖的研究，如孙兰萍，张胜义，许晖对硒化壳聚糖的研究12，张 威,王 敏,朱劲华等对硒化紫球藻胞外多糖的研究13，温磊，尚德静，王伟对灵芝硒多糖的研究14。但是对微生物的硒
11、化多糖的研究还不多见。硒化乳酸菌胞外多糖是实验室人工合成的微生物硒多糖，本次实验对制备得到的硒多糖进行初步的理化性质分析及抗氧化活性研究，通过比较硒化前后乳酸菌胞外多糖的抗氧化活性，初步明确其抗氧化活性是否优于未经硒化的乳酸菌胞外多糖，为硒化乳酸菌胞外多糖药物的开发提供了理论依据。1 1 材料材料1.11.1 材料材料a 乳酸菌胞外多糖：由实验室制备所得。b 硒化乳酸菌胞外多糖：将一定量的乳酸菌胞外多糖粉末放入三角瓶中，加入体积分数为 0.5%的硝酸水溶液 10ml，加热搅拌使多糖全部溶解，再经水浴加热到相应的温度，加入相应量的 Na2SeO3和 BaCl2，反应相应的时间后。冷却到室温，用
12、Na2CO3调 pH5-6,加入适量无水 Na2SO3沉淀反应液中的氯化钡，用高速冷冻离心机下在 5000r/min 的条件下离心 20min 后取上清液，再用无水乙醇沉淀(4冰箱过夜)，收集沉淀，透析24h,冷冻干燥后，即为硒多糖。1.21.2 仪器与设备仪器与设备湘仪-H2500R 离心机 长沙湘仪离心机仪器有限公司KDT23 可见光分光光度计 上海科登精密仪器有限公司湘仪-H2050R 离心机 长沙湘仪离心机仪器有限公司 LDZX50KBS 型立式压力蒸汽灭菌器 上海申安医疗器械厂DHG-9108A 型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司PHS-3C 型酸度计 上海盛磁仪器有限公司电子天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司硅胶板 上海信谊仪器厂WFZ UV-4802H 型 紫外可见分光光度计 尤尼柯（上海）仪器有限公司DK-8D 型 电热恒温水槽 上海一恒科技有限公司其他：通风柜，电冰箱，移液枪，移液管，锥形瓶，试管，烧杯，电热恒温水浴锅等。1.31.3 试剂试剂总抗氧
