《吡格列酮衍生物对小鼠3t3-l1细胞细胞功能影响论文》由会员分享，可在线阅读，更多相关《吡格列酮衍生物对小鼠3t3-l1细胞细胞功能影响论文（56页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：则枢1日期：力侈牛乃学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使
2、用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，并编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。保密论文在解密后适用本授权书。论文作者签名：交1 3 萃 指导教师签名：协耍蛹日期：2 口I 弓酽，药目录炭藏嘲稠蒴鼎耵司对照：- r中文摘要。2英文摘要。5论文正文：吡格列酮衍生物对小鼠3 T 3 L 1 细胞细胞功能的影响。7前言7月昌”7第一部分吡格列酮衍生物对3 T 3 L 1 细胞增殖的影响91 仪器与材料92 方法。1 03 结果。1 24 讨
3、论。1 5第二部分吡格列酮衍生物对3 T 3 - L 1 细胞分化的影响。1 71 仪器与材料1 72 方法。1 83 结果。2 04 讨论。2 7第三部分吡格列酮衍生物对3 T 3 - L 1 细胞分化过程中P P A R v 基因表达的影响2 91 仪器与材料2 92 方法。3 03 结果。3 24 讨论3 3第四部分吡格列酮衍生物对3 T 3 - L 1 脂肪细胞P P A R v 蛋白表达的影响。3 51 仪器与材料3 52 方法3 63 结果。4 04 讨论4 l全文小结。4 2参考文献4 3文献综述4 6致谢5 5攻读硕士学位期间发表的论文5 6重庆医科大学硕士研究生学位论文英汉缩
4、略语名词对照英文缩写英文名称C Q M U H S - 0 3 T Z D sT h i a z o l i d i n e d i o n e sD M E MD u l b e c c o 。Sm o d i f i e dE a g l e 。Sm e d i u mP B SN B C SF B STD M S OD E Xm P P A R Yc D N AD E P CE D T AP M S FA c r - B i sT r i sS D ST E 正D心T B S TN CP h o s p h a t eb u f f e rs a l i n eN e w b o r n
5、C a l fS e r u mF e t a lb o v i n es e r u m3 - ( 4 ，5 ) - d i m e t h y l t h i a z o l ( - 2 - y 1 ) -2 ，5 一d i p e n y lt e t r a z o l i u mb r o m i d eD i m e t h y ls u l f o x i d eD e x a m e t h a s o n e3 - I s o b u t y l 1 - m e t h y l x a n t h i n eP e r o x i s o m ep r o l i f e r
6、 a t o r sa c t i v a t e dr e c e p t o rC o m p l e m e n t a r yd e s o x r i y n u c l e i ca c i dD i e t h y p y r o c a r b o n a t eE t h y l e n eD i a m i n eT e t r a a c e t i cA c i dP h e n y l m e t h a n e s u l f o n y lf l u o r i d eA c r y l a m i d e - b i s a c r y l a m i d eT
7、 r i h y d r o x y m e t h y la m i n o m e t h a n eS o d i u md o d e c y ls u l f a t e中文名称吡格列酮衍生物噻唑烷二酮类D u l b e c c o 改良E a g l e培养基磷酸盐缓冲液新生牛血清胎牛血清二苯基四氮唑溴盐二甲基亚砜地塞米松3 异丁基1 甲基黄嘌呤过氧化物酶增值体激活受体互补脱氧核糖核酸焦磷酸二乙酯乙二胺四乙酸苯甲基磺酰氟化物丙烯酰胺一甲叉双丙烯酰胺三羟甲基氨基甲烷十二烷基磺酸钠N ，N ，N 。，N T e t r a m e t h y l e t h y l e n e d
8、i a m i n eN ，N ，N ，N 四甲基乙二胺A m m o n i u mp e r s u l f a t e过硫酸铵T r i sb u f f e r e ds a l i n e w i t hT w e e n2 0含吐温2 0 的T r i s 缓冲液n i t r o c e l l u l o s em e m b r a n e硝酸纤维素膜重庆医科大学硕士研究生学位论文吡格列酮衍生物对小鼠3 T 3 L 1 细胞细胞功能的影响摘要目的：为了进一步增强胰岛素增敏剂的疗效，同时降低其药物副作用，以吡格列酮( p i o g l i t a z o n e ) 化学结构
9、为基础开发T , t L 格列酮衍生物( C Q M U H S 0 3 ) 。本课题以小鼠3 T 3 L 1 细胞为依托，观察C Q M U H S 。0 3 对3 T 3 L 1 细胞增殖的抑制作用及对诱导分化的影响，并初步讨论其可能的机制，为C Q M U H S 0 3 在I I 型糖尿病中的治疗应用提供理论基础。方法：( 1 ) 分别用含不同浓度( 1 1 0 。8 m o l L 1 1 0 。4 m o l L ) 药物的细胞培养液进行3 T 3 L 1 前脂肪细胞培养，于2 4 、4 8 、7 2 h 采用M T T法检测药物对3 T 3 L 1 前脂肪细胞增殖的影响。( 2
10、) 建立3 T 3 L 1 细胞诱导分化模型，并在诱导0 天时即加入不同浓度的药物，分别于诱导分化的2 、4 、6 、8 天收集细胞，进行油红O 染色，拍摄照片并测定5 7 0 r i m 处光密度( O D ) 值，寻找有效的药物干预浓度。( 3 ) 诱导3 T 3 L 1细胞分化，并在诱导0 天时即加入药物，待分化成熟，提取细胞总R N A ，R e a l t i m eP C R 分析P P A RY 基因表达。( 4 ) 诱导3 T 3 L 1 细胞分化，同时加入药物分别作用2 、4 、6 、8 天收集细胞，采用W e s t e r nB l o t 方法测定药物对P P A RY
11、 蛋白表达的影响。结果：( 1 ) 通过2 4 、4 8 、7 2 h 的M T T 检测，结果显示C Q M U H S 0 3对3 T 3 L 1 细胞生长抑制作用呈剂量和时间依赖性。通过中效方程计算重庆医科大学硕士研究生学位论文7 2 h 时C Q M U H S 0 3 的I C 5 0 值为3 3 3 x1 0 m o l L ，吡格列酮I C 5 0 值为2 9 1 1 0 m o l L 。与阴性对照组相比l x l 0 ，1 x 1 0 。5 m o l L 浓度的C Q M U H S 0 3 对细胞抑制作用较强，存活率低，组间有显著性差异( P O 0 5 ) 。与阴性对照
12、组相比1x 1 0 ，1x 1 0 ，1 1 0 。6 m o l L 浓度的吡格列酮，对细胞有抑制作用，组间有显著性差异( P O 0 5 ) 。C Q M U H S 0 3 与吡格列酮组比较，l x l 0 ，1X1 0 ，1X1 0 7 m o l L 浓度时存活率高于吡格列酮组，组间有显著性差异( P O 0 5 ) 。( 2 ) 油红O 染色测定结果显示吡格列酮各浓度均促进3 T 3 L 1 前脂肪细胞的分化，在诱导分化的2 、4 、6 、8 天油红染色提取法所测得O D 值均比阴性对照组高，其中1x 1 0 ，1 1 0 6 m o l L 浓度的促分化作用有显著性( P O 0
13、 5 ) 。相对的，C Q M U H S 0 3 对3 T 3 L 1 前脂肪细胞的分化促进作用不明显，相对于阴性对照组，诱导第2 、4 、8 天两者无显著性差异。第6 天时，仅1 1 0 6 m o l L 浓度的促进作用相对于阴性对照有显著性差异( P O 0 5 ) 。C Q M U H S 0 3 与吡格列酮相比促分化作用弱，在l 1 0 一、1 1 0 。7 m o l L 浓度时2 、4 、6 、8 天所测得的O D 值均显示有显著性差异( P 0 0 5 ) 。( 3 ) R e a lT i m e P C R 检测显示诱导分化8 天，吡格列酮组P P A RYm R N A 表达上调5 1 2 倍，C Q M U H S 0 3 组P P A Rym R N A 表达上调2 2 9 倍，与阴性对照组相比组间有明显差异( P O 0 5 ) ，且C Q M U H S 一0 3 的上调作用显著低于吡格列酮( P O 0 5
