一.名词解释(100个)

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1、1.基因工程：指将一种或多种生物体（供体）的基因或基因组提取出来，或人工合成基 因，按照人们的的愿望，进行严密的设计，经体外加工重组，转移到另一种生物体 （受体）的细胞内，使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。 2.遗传工程：凡是人工改造生物遗传性的技术如物理化学诱变、细胞融合、花粉培育、 常规育种、有性杂交等，还包括基因工程在内，统称遗传工程。 3.重组 DNA 技术：它是基因工程的核心内容，指用人工手段对 DNA 进行改造和重新组合的技术。 4.生物工程：改造生物并生产生物产品的工程技术，是现代生物学中一切工程技术的总 称，它包括遗传工程、基因工程外，酶学工程，细胞工程、发酵工程、

2、农业工程等。 5.克隆：是指从一个祖先通过无性繁殖方式产生的后代，或具有相同遗传性状的 DNA 分 子、细胞或个体所组成的特殊的生命群体。或是指从同一祖先生产这类同一的 DNA 分 子群或细胞群的过程。 6.基因：是遗传的物质基础，是 DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷 酸序列的总称，是具有遗传效应的 DNA 分子片段。 7.基因组：指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部 DNA 分子。 8.限制性核酸内切酶 ：是一类能识别双链 DNA 分子中特异性核苷酸序列并由此特异切 割 DNA 双链结构的水解酶。 9限制作用：是指一定类型的细菌可以通过限制性酶的作用，破坏入侵的

3、外源 DNA(如噬 菌体 DNA 等)，使得外源 DNA 对生物细胞的入侵受到限制. 10. 修饰作用：生物细胞(如宿主)自身的 DNA 分子合成后，通过修饰酶的作用：在碱基中 特定的位置上发生了甲基化而得到了修饰，可免遭自身限制性酶的破坏，这就是限制修饰 系统中的含义。 11.粘性末端：是指 DNA 分子在限制酶的作用之下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结 构，它们能够通过互补碱基间的配对而重新环化起来。 12同裂酶(isoschizomers)：有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷酸靶序列，这类 酶特称为。 13.同尾酶：与同裂酶对应的一类限制性内切酶,它们虽然来源不同，识别的靶序列也

4、各不相 同,但都能产生相同的粘性末端, 14.星号活性：在“非最适的”反应条件下有些核酸内切限制酶识别序列的特异性便会发生 “松动”，从其“正确”识别序列以外的其它位点切割 DNA 分子。限制酶的这种特殊的识别能 力，通常叫做星号活性. 15.载体(Vector)：携带外源基因进入受体细胞的这种工具叫做载体(Vector)。 16.质粒（plasmid)是染色体以外能自主复制的双链闭合环状 DNA 分子，它广泛存在于细菌 细胞中。 17. 接合型质粒；接合型质粒亦称自我转移的质粒，这类质粒除含有自我复制基因外，还 带有一套控制细菌配对和质粒接合转移的基因，如 F 质粒，部分 R 质粒和部分 C

5、ol 质粒 18.非接合型质粒亦称不能自我转移的质粒，此类质粒能够自我复制，但不含转移基因组， 因此这类质粒不能从一个细胞自我转移到另一个细胞。 19.严紧型质粒：一种是低拷贝数的质粒，称“严紧型”复制控制的质粒(stringent plasmid)， 此类质粒每个宿主细胞仅含 13 份的拷贝。 20.松弛型质粒：一类是高拷贝数的“松弛型”复制控制的质粒(relaxed plasmid)，这类质粒每 个宿主细胞可达到 1060 份拷贝。 21.RT-PCR(reverse transcription PCR)，是指以 mRNA 在反转录酶作用下合成的 cDNA 第一 链为模板的 PCR。22.

6、cDNA 末端的快速克隆(RACE 技术) 是一种通过 PCR 进行 cDNA 末端快速克隆的技术， 是以 mRNA 为模板反转录成 cDNA 第一链后用 PCR 技术扩增出某个特异位点到 3，或 5， 端之间未知序列的方法。 23.基因文库(gene library)则是指某一生物类型全部基因的集合。 24.基因组文库是指将某生物的全部基因组 DNA 切割成一定长度的 DNA 片段克隆到某种 载体上而形成的集合。 25.cDNA 文库是指某生物某一发育时期所转录的 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某 种载体连接而形成的克隆的集合。 26.克隆文库由克隆载体构建。载体中具复制子、多克

7、隆位点及选择标记，可通过细菌培养 使克隆片断大量增殖。 27.表达文库是用表达载体构建。载体中除上述元件外，还具有控制基因表达的序列(如启 动子、SD 序列、ATG、终止子等)，可在宿主细胞中表达出克隆片段的编码产物。 28.差别杂交(differentia hybridization)又叫差别筛选(differential screening)，适用于分离经特 殊处理而被诱发表达的 mRNA 之 cDNA 克隆。 29.转化(transformation)，严格地说是指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体 DNA 分 子的生命过程， 30.转染(transfection)，则是专指感受态的

8、大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体 DNA 分子的生命 过程。 31 核酸印迹(nucleic acid blotting)：将核酸样品转移到固体支持物滤膜上，这个过程特称为 核酸印迹转移. 32.基因的表达(gene expression)：从 DNA 到蛋白质的过程叫做基因的表达 33.质粒的不亲和性(plasmid incompatibility)在没有选择压力的情况下，两种亲缘关系密切的 不同质粒，不能在同一宿主细胞中稳定地共存，这一现象称为质粒的不亲和性，也称不相 容性。 34.插入失活：因 DNA 插入而导致基因失活的现象，称之为插入失活效应。 35.多克隆位点：指载体上人工合成的含有紧

9、密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的 DNA 片段。 36.互补：质粒和宿主编码的片段各自均无活性，但它们共处一个细胞中时可融为一体， 形成具有酶学活性的蛋白质。 37.cos 位点： 噬菌体为线形双链 DNA 分子，长度约为 49kb，在 DNA 分子两端各有 12 个碱基的单链互补粘性末端，当 噬菌体进入细菌细胞后，其 DNA 可迅速通过粘性末端 配对而成双链环状 DNA 分子，这种由粘性末端结合形成的双链区域称为 cos 位点。 38.插入型载体：只具有一个限制酶位点可便于外源 DNA 插入的称为插入型载体 39.取代型载体：含有二个限制酶切点，在两个位点之间的 DNA 区段可以被外源

10、 DNA 片 段所取代的载体称为取代型载体。 40.柯斯质粒：是一类由人工构建的含有且 DNA 的 COS 序列和质粒复制子的特殊类型的质 粒载体。它们兼具有 噬菌体的高效感染能力和质粒易于克隆选择的优点，既能像质粒一 样在寄主细胞内复制，也能像 DNA 一样被包装到噬菌体颗粒中去。 41.聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)：是利用单链寡核苷酸引物对特异 DNA 片段进行体外快速扩增的一种方法。 42.S-D 序列: 在大肠杆菌 mRNA 的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同 16S 核糖体 RNA 3，末端碱基互补的序列，该序列最初由 Sh

11、ine 、Dalgarno 发现，故后来命名 为 ShineDalgarno 序列，简称 S-D 序列。 43.Ti 质粒：存在于能够引起植物形成冠瘿瘤的土壤农癌杆菌中。这种肿瘤的形成是由 Ti质粒决定的，故称为诱导肿瘤的质粒(tumor inducing plasmid)，简称 Ti 质粒。或 Ti 是在根 瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环形双链DNA 分子。它控制根瘤 的形成，可作为基因工程的载体 44. 探针：指一段与目的基因互补的标记好的 DNA 片段，它可用于在杂交实验中检测目的 基因的存在或筛选基因。 45.报告基因：通常是指用于检测与其组装在一起的嵌合基因 在导入细

12、胞 后是否表达 的 一种指示基因。 46.融合蛋白 ： 融合表达一般是将克隆化的基因引入某表达载体编码的高表达蛋白一起融 合表达。 47.表达载体 ：含有基因表达调控序列能将目的基因在人工控制下置于生物宿主中大量生 产的载体。 48.克隆载体：将需要克隆的基因与载体相连接 ，在导入原核细菌，在原核细菌内大量复 制 ，形成大量的基因克隆，这样的载体称为克隆载体。 49. 双酶切法：用两种不同的限制性核酸内切酶切割同一种 DNA 分子的方法。 50转化子：将导入外源 DNA 分子后能稳定存在的受体细胞称为转化子。 51.受体细胞：能够摄取外源 DNA 并使其稳定维持的细胞，有一定的应用价值和理论研

13、究价 值，又称宿主细胞或寄主细胞。 52 Vir 区：在 Ti 质粒 T-DNA 区的上游有一组基因，其表达产物可激活 T-DNA 向植物细 胞转移，使植物引发肿瘤，显示农杆菌的致病性，因此称为 Vir 区。 53感受态细胞：是指处于能够吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态的细胞。 54. 受体细胞：能够摄取外源 DNA 并使其稳定维持的细胞，有一定的应用价值和理论研究 价值，又称宿主细胞或寄主细胞。 55在大肠杆菌 mRNA 的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同 16S 核糖体 RNA 3，末端碱基互补的序列，该序列最初由 Shine 、Dalgarno 发现，故后来命名为 Sh

14、ine Dalgarno 序列，简称 S-D 序列。 56插入失活，基因工程载体上的某些选择标记基因常常含某种或某几种限制性内切酶的 单一酶切位点，在该位点用相应的限制性内切酶处理，并将外源 DNA 片段插入该位点，则 插入的外源 DNA 片段将破坏原有基因的读码框，往往导致原有的选择标记基因无法翻译表 达，或即使翻译表达，形成的也是丧失了原有生物活性的蛋白质，这一现象称为插入失活。57融合基因：是指应用 DNA 体外重组技术构建的一类具有来自两个或两个以上的不同 基因核苷酸序列的新型基因。 58. 目的基因；指那些已被或者准备要被分离、改造、扩增或表达的特定基因或 DNA 片 段。 59.

15、开放阅读框架（ORF） ：起始于 AUG、止于 UAA、UGA、UAG 的连续的密码子区域，是 潜在的编码区。 60核酸分子杂交：核酸分子杂交是指核酸分子(DNA 或 RNA)在变性以后，在复性的过 程 中两个不同来源的且同源的核酸分子形成杂合双链的过程。 61.电穿孔法; 是指在一个较大的电脉冲短暂破坏细胞膜的脂质双层，允许 DNA 等分子通 过细胞膜进入细胞，而后细胞膜快速复原，保持细胞的完整。这种方法称为电穿孔法。 62. 降落降落 PCR: 主要用于 PCR 的条件的优化 ，首先在较高的温度下扩增，此时虽然扩 增效率低，但非特异扩增基本没有。随着退火温度的降低，非特异扩增会逐步增多。但

16、 由于此时特异的扩增产物已经达到一定的数量优势，因此会对非特异扩增产生强烈的竞争抑制，从而大幅提高 PCR 的特异性和效率。 63. 丰度:指每个细胞中含有某一分子（通常为 RNA 分子）的平均数目 64.组织特异性启动子：也称为器官特异性启动子。在这些启动子调控下，基因的表达往往 只发生在某些特定的器官或组织部位，往往表现出发育调节的特性。 65. 诱导型启动子:是指在某些特定的物理或化学信号刺激下，可以大幅度提高基因的转录 水平的启动子。 66. 包涵体:外源蛋白高效表达时，由于肽链折叠过程中部分部分折叠的中间态发生了错误 聚合，而不是形成成熟的天然态或完全解链的蛋白。 67.Southern 杂交:使在电泳凝胶中分离的 DNA 片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过 同标记的单链 DNA 或 RNA 探针的杂交作用检测这些被转移的 DNA 片段。 68. 1 单位酶的定义：通常定义为，在建议使用的缓冲液及温度下，在 201 反应液中反应 1 小时，使 lg DNA 完全消化所需的酶量。 69DNA 连接酶:能在体外把 DN