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1、1肾结石患者尿 2作者：盛斌武，陈兴发，李翔，罗晓辉，贺大林【关键词】 肾结石Changes of urinary 2MG, NAG and GT levels in patients with renal calculus and the clinical significanceABSTRACT: Objective To study the changes of urinary 2microglodulin (2MG), NacetylDglucosaminidase(NAG)and glutamyltransferase(GT) levels in patients with rena
2、l calculus and the clinical significance. Methods Urinary 2MG and NAG, GT levels in 30 cases of renal calculus and 30 healthy volunteers were determined by radioimmunoassay and biochemical spectrophotometric analysis, respectively. Results Urinary 2MG、 NAG and GT levels in the controls were lower th
3、an in the renal calculus patients(P0.05). Conclusion These results are the initial demonstration that urinary 2MG and NAG, GT levels of these patients increase with renal calculogenesis, which suggests that the pathway is related to renal dysfunction. KEY WORDS: renal calculus; 2microglodulin; Nacet
4、ylbetaDglucosaminidase; glutamyltransferase摘要：目的 探讨肾结石患者尿 2 微球蛋白(2MG)、N 乙酰 D 葡萄糖苷酶(NAG)和 谷氨酰胺转移酶(GT)含量变化及临床意义。方法 选择 30 例肾结石患者和健康无结石志愿者 30 例，分别留尿。生化分光光度法测 NAG、GT，放免法测 2MG。结果 肾结石组尿中 NAG、GT 和 2MG 显著升高，两组之间存在统计学差异(P0.05)。结论 尿路结石患者尿中 2MG、GT 和 NAG 水平显著升高，表明肾结石形成与肾小管功能损伤有关。关键词：肾脏结石；2 微球蛋白； N 乙酰 D 葡萄糖苷酶； 谷氨
5、酰胺转移酶尿路结石约占泌尿系疾病的 32.25%，而且复发率相当高，如果不治疗，10 年复发率大约为 50%，15 年为 75%。在美国人群中尿路结石发病率大约为 12%，其2中 85%以上为草酸钙结石12。本文通过观察肾结石患者尿 NAG、GT 和 2MG改变，探讨尿路结石对肾功能的影响。1 材料与方法1.1 临床观察对象 肾结石组：为 2002 年 12 月-2004 年 12 月来我院泌尿科就诊，经 X 线或CT 结合腹部 B 超确诊为肾结石的无明显自觉症状患者 30 例，其中男 20 人，女10 人，年龄 23-65 岁，体质量 49-72kg； 对照组：为 30 例经体检正常，腹部
6、B超正常且无泌尿系病史的健康志愿者，其中男 21 人，女 9 人，年龄 23-60 岁。1.2 方法1.2.1 标本采集与处理 两组患者留晨起空腹尿，按说明书要求制备标本，放于-20冰箱保存，检测相应指标。1.2.2 检测方法 主要试剂：2MG 试剂盒购自中国原子能科学研究院同位素研究所(北京)；NAG、GT 试剂盒购自南京建成生物技术研究所；肌苷(Cr)试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司。标本检测：放射免疫法测定 2MG；生化分光光度比色法测定 NAG、GT 和 Cr。1.2.3 统计学方法 3所有数据采用 SPSS 11.0 单因素方差分析程序进行处理。2 结 果肾结石组尿中 NAG、
7、GT 活性显著升高，与健康对照组存在显著性差异(P0.05)；肾结石组尿中 2MG 水平显著升高，与健康对照组间亦存在显著性差异(P0.05，表 1)。表 1 两组尿 NAG、GT 和 2MG 的测定结果（略)3 讨 论尿路结石是泌尿系统最常见疾病，而且复发率相当高，但尿路结石的形成机制尚不清楚，文献报道可能与肾小管的氧化损伤、自由基的形成、饮食等有关2。本研究尿路结石患者尿 2MG、GT 和 NAG，结果显示，尿路结石患者尿中2MG、GT 和 NAG 水平显著升高，表明尿路结石形成与肾小管功能损伤有关，与文献报道一致34。 2MG 是一种相对分子质量仅为 11800 的蛋白质，为人类白细胞膜
8、抗原类抗原的轻链，除成熟的 RBC 和胎盘滋养层细胞外，其他细胞均含 2MG。2MG 主要由淋巴细胞产生，当细胞处于最旺盛的生理状态时产生2MG 最快。在人体内 2MG 的浓度相对稳定，容易通过肾小球滤过膜，但 99.9%由近曲小管以胞饮形式摄取，因此尿中很少。当肾小管炎症、中毒引起肾小管病变时，肾小管对 2MG 重吸收障碍，尿液中 2MG 增高；即使肾小球病变为主时，肾小球滤过增加，但肾小管重吸收良好，尿中 2MG 仍正常或轻度增加。本组肾结石患者尿 2MG 水平显著升高，反映肾结石患者肾小管重吸收功能受损5 。NAG 广泛存在于各组织的溶酶体中，是一种高分子质量(140000)的溶酶体酶。
9、近端肾小管上皮细胞中含量特别丰富，是肾小管功能损伤最敏感的指标之一。在4正常情况下，血清中的 NAG 不能通过肾小球滤过膜，当肾近端小管上皮细胞受损或脱落时，尿中 NAG 活性升高。GT 富含于肾近端小管上皮细胞刷状缘中，其生理功能是将细胞外 GSH 转化为半胱氨酸，当刷状缘受损并脱落时，尿中 GT 水平显著升高，并随着肾损伤严重而水平显著升高。本组肾结石患者尿中NAG、GT 显著高于正常对照组，主要反映肾小管损伤56。然而表 1 数据显示，尿中 NAG、GT 的变异范围很大，我们为了减少误差选用 U/g Cr，但筛选肾小管或肾小球是否受损可能仍会引起较大偏差，显然为了消除个体偏差，需对病人进
10、行动态观察，以减少误诊或漏诊。肾结石患者尿 2MG、GT 和 NAG 水平显著升高，提示患者肾小管功能损伤，其损伤与高草酸盐尿导致肾小管上皮细胞长期处于低度恶性低氧刺激状态，产生氧自由基等活性氧介质并导致肾脏损伤关系密切7。目前研究发现尿结石中的重要成分如尿酸、草酸、磷酸等的产生，无不需要多种氧化过程，而且当这些物质产生增加时即同时伴随着氧化作用的增强，产生较正常为多的 ROS(reactive oxygen species)，并使肾小管上皮细胞及间质细胞抗氧化能力下降，甚至发生损伤；而且ROS 在体内大量堆积，必然产生大量草酸盐，与小肠吸收的草酸盐共同作用于肾脏上皮细胞及间质细胞3,8。随着
11、大量结石结晶通过机械作用穿破肾小管到达细胞间质，肾间质中晶状物质被炎症细胞如单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞包裹，结石中的坏死细胞成为结石形成的关键因素，同时结晶的内吞作用和并发肾小管上皮细胞炎症反应，产生大量氧化代谢产物，并与间质细胞交互作用，导致炎症反应并最终引起肾小管上皮细胞持续损伤，尿酶 NAG、GT 和 2MG 显著升高7,9。总之，本组临床资料中，尿路结石患者尿中 2MG、GT 和 NAG 水平显著升5高，反映肾结石形成过程伴随肾小管损伤。虽然其损伤机制目前不甚清楚，但探明这一问题无疑将为草酸钙结石的发病机制的阐明和/或提供干预治疗具有十分重要意义。参考文献：1Yasunori I,
12、Takahiro Y, Atsushi O, et al. Preventive effects of green tea on renal stone formation and the role of oxidative stress in nephrolithiasis J. J Urol, 2005,173(1):271275.2Margaret SP. Prevention of nephrolithiasis J. Curr Opin Hypertens, 2001,10(2):203209.3Huang HS, Ma MC, Chen CF, et al. Lipid perox
13、idation and its correlations with urinary levels of oxalate, citric acid, and osteopontin in patients with renal calcium oxalate stones J. Urology, 2003, 62(6):11231128.4高月亭,陈涛,王露萍,等. 上尿路结石对肾功能影响的研究 J. 现代临床医学生物工程学杂志, 2004, 10(6):500501. 5朱新兴,王永文,郑红英,等. 肾小管损害各种早期诊断指标的评价 J. 检验医学, 2005, 20(3):271273.6彭
14、珊茁,张春生,胡元,等. 职业接触汞工人肾脏早期损伤指标的探讨 J. 中华劳动卫生职业病杂志, 2004, 22(2):122124. 7Gambaro G, DAngelo A, Fabris A, et al. Crystals, Randalls plaques and renal stones: Do bone and atherosclerosis teach us something J? J Nephrol, 2004,17(6):774777.8张保,陈一戎,王志平,等. 维生素 C 对大鼠肾结石模型体内活性氧及成石的影响 J. 中华泌尿外科杂志, 2002, 23(11):683685.9Thomas K, Annette S, Lutz T, et al. The influence of oxalate on renal epithelial 6and interstitial cells J. Urol Res, 2004,32(4):304309.
