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1、1牛结核病流行病学与诊断技术研究进展摘要牛结核病是一种人畜共患的慢性消耗性传染病,其传播流行影响畜牧业的持续发展和人类的健康。阐述了牛结核病流行病学和诊断技术方面的研究进展,以期为该病的诊治与防控提供依据。 关键词牛结核病;流行病学;诊断技术;研究进展 牛结核病是主要由牛分枝杆菌和结核分枝杆菌引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病,可通过病畜传播给人类或其他动物1-2。牛结核病感染宿主谱广,几乎可以感染所有的温血脊椎动物,其传播流行不但影响到畜牧业的持续稳定发展,更严重影响着人类的身心健康和社会公共安全。 1 牛结核病流行病学研究进展 20 世纪 80 年代中期以来,在许多发达国家结核病不仅没有
2、下降,反而逐渐增加,而在一些贫困国家结核病已失去控制,特别是中非、南亚,因此 1993 年世界卫生组织(WHO)宣布结核病处于全球紧急状态。对检出的阳性牛只不能及时处理,检测手段的有限导致某些染疫牛无法流通限制,未能从根本上消灭传染源,是造成牛结核病不断发生和流行的主要原因3。整体外周环境不良,如牛舍阴暗潮湿、光线不足、通风不良、牛群拥挤、病牛与健康牛同栏饲养以及饲料配比不当、饲料中缺乏维生素和矿物质等,均可促进本病的发生。由于野生动物獾、野牛、猴子、狐狸等动物结核病的出现,增加了牛结核病感染的又一途径。野生动物通过排泄物将结核杆菌排出体外,污染了饲草、饲料和饮水等,家畜采食后感染结核杆菌,进
3、而造成牛结核病的发生4。由于人类艾滋病的流行以及耐药结核菌株的出现,以及牛奶在人们正常饮食中的比例加大,造成结核病人的攀升,导致人畜间结核病的相互传播,国际上2由牛型分枝杆菌引起的人结核病的比例为 10%左右。 现在,多数国家都不提倡使用疫苗的手段来控制牛结核病,而采用定期 PPD 皮试法检测并屠宰 PPD 皮试诊断阳性牛的防控策略,许多发达国家就是利用该策略有效地控制了牛结核病。美国是第 1 个实行根除牛结核病的国家,自 1971 年实施消灭牛结核病的计划以来,已经使牛结核病发病率降至 0.5%,以后一直呈零星散发。美国于 1998 年实现了无结核病目标。但由于野生动物以及人类结核病的发生和
4、流行,后来在密歇根州又有疫情发生。因此,美国的牛群处在不断的检疫和高度警惕之中。欧盟国家于 20 世纪 50 年代签署了控制牛结核病的协定,北欧的丹麦、比利时、挪威、德国和荷兰等国已基本消灭了牛结核病,英国和法国处在控制状态。大洋洲的澳大利亚、新西兰等国家也已经消灭了牛结核病,但近年来由于野生动物獾和狐狸等动物结核病病例的出现,致使牛又感染了结核病。 亚洲和非洲是牛结核病和人类结核病的高发区,其中印度发病最为严重。在所有的非洲国家中,只有 7 个国家考虑到牛结核病是必须申报的疫病而采取检疫和部分扑杀政策,只有 15%的结核病牛群采取检疫和扑杀政策,其余 48 个国家采取的控制措施不当或根本没有
5、采取任何控制措施。亚洲国家中,只有 7 个国家采取检疫和部分扑杀政策,并考虑进行申报,其余 29 个国家只采取部分控制政策和没有采取控制措施,结核病感染宿主的广泛性和清除疫情的高难度,从而造成了结核病的不断发生,给预防工作造成了很大的困难。随着我国人民生活水平的不断提高,随之带动了奶牛业在近几年的迅猛发展,但牛结核病疫情也随之攀升。1979 年、1985年和 1990 年 3 次全国结核病流行病学调查显示,由牛型分枝杆菌导致的结核病所占的比例分别为 3.8%、4.2%和 6.4%。此后虽然未有全国性的调查统计数据见诸报道,然而地方性的疫情调查结果不容乐观,因此牛结核病疫情正受到日益广泛而3密切
6、的关注。 2 牛结核病诊断技术研究进展 结核病是一古老而又复杂的人畜共患病,因为治疗难度大,因此早期可靠诊断是防控本病的重要措施。同时,结核杆菌极难培养,对病原菌的体外培养和鉴定难于有效实施,因此结核病的诊断技术定位于免疫学或血清学检测,目前世界上用于牛结核病的成熟可靠的诊断或检测技术仅有提纯结核菌素皮肤接种试验(包括颈部 PPD 皮试和尾根皱褶部 PPD 皮试)和 干扰素 ELISA 试验。 结核菌素提纯蛋白衍生物(PPD)试验一直应用于动物和人结核病的免疫诊断法,世界动物卫生组织(OIE)和我国农业部均将此方法列为牛结核病检疫的标准试验,此法至今仍是国内外实际检疫中最为实用的诊断方法。而其
7、他检测牛血清抗体的 ELISA 方法或免疫金标方法,因为结核病引发的体液免疫的滞后性,无法用于兽医临床试验。PCR 试验已用于许多动物疫病的快速检测,但因分枝杆菌间的相互交叉干扰,或者待检样品中细菌过低过杂,易于造成假阳性和假阴性,因而检测结核病的 PCR 诊断试验大都停留在实验室制备和应用阶段,在牛结核病的实际诊断中少有报道。澳大利亚已研制出牛结核病的 干扰素 ELISA 试验,应用结果表明,本方法比传统的结核菌素法诊断牛结核病更敏感,并可有效解决假阳性的问题, 干扰素 ELISA 试验将是牛结核病诊断的一个主要发展趋势。 牛 干扰素测定法的广泛性田间试验已在世界上许多国家(包括澳大利亚、爱
8、尔兰、新西兰、阿根廷、西班牙、意大利和美国)完成,并在澳大利亚和新西兰被认可为正式试验,(下转第 348 页) (上接第 345 页) 美国和其他欧美国家也正在进行本方法的区域试验和验证,以探讨彻底替代PPD 皮试法的可能性。目前已有 20 多万头经过测试,本法敏感性为 77.0%93.6%,4而相比较的结核菌素试验敏感性为 65.6%84.4%。西班牙学者选择了 85 个牛群 1 136 头牛进行了牛颈部 PPD 比较皮试(SICCT)和 干扰素 ELISA 试验比对,并且用细菌培养和 PCR 予以确认,结果 干扰素 ELISA 检测法的敏感性为84.9%,SICCT 的敏感性为 80.2%
9、,将 2 种方法结合起来的敏感性为 92.9%。中国动物卫生与流行病学中心也开展了颈部 PPD 皮试和 干扰素 ELISA 比较,证实二者间阳性符合率较高,达 90.6%。 牛颈部 PPD 比较皮试(SICCT)操作要点:一是部位。牛颈部同一侧,中上部 1/3处区域。二是注射器。针尖不能太宽太长,直径 0.45 mm、长度 34 mm 为宜。三是剂量。牛和禽 PPD 剂量不低于 2 000 IU/0.1 mL,一般为 2 0003 250 IU,如采取TB 根除计划则提高为 5 000 IU,接种量基本为 0.1 mL,不高于 0.2 mL。四是间隔距离。牛和禽 PPD 注射部位间距 1520
10、 cm。五是结果判定。72 h 后判定,如皮厚差4 mm 以上,有红肿热痛等炎性反应则判定为阳性;2.13.9 mm 的判为可疑;2 mm以下的为阴性。凡判定为疑似反应的牛只,于第 1 次检疫 60 d 后进行复检,其结果仍为疑似反应时,经 60 d 再复检,如仍为疑似反应,应判为阳性。牛尾根皱褶部 PPD皮试(CFT)操作要点:一是部位。牛尾根皱褶部。二是剂量。因敏感性低于颈部皮试,因此接种剂量应适当提高,可以提高至颈部皮试量的 1 倍左右。三是结果判定。72 h后判定,如皮厚差 4 mm 以上,出现可摸到或可见的肿块时则判定为阳性。如呈现阳性则 10 d 后以颈部 PPD 皮试进行确认。 3 参考文献 1 胡来根.牛结核病的诊断与防制J.畜牧与饲料科学,2009(4):110-111. 2 贾伍有.奶牛结核病及其防治J.畜牧与饲料科学,2009,30(1):161-162. 3 马秀玲.奶牛结核病的发病特点及防控对策J.现代农业科技,2007(24):172. 4 王伟忠,杨莉萍,杨晓芳,等.奶牛布鲁氏菌病与结核病的防制J.畜牧与饲料5科学,2008,29(3):88-90.
