《mrR-145促进天然免疫应答中巨噬细胞产生白细胞介素10及其表现遗传机制研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《mrR-145促进天然免疫应答中巨噬细胞产生白细胞介素10及其表现遗传机制研究（93页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、磐i ：曼垒堡堂丞签鱼痉座签主匡堕缉胞亡生鱼麴胞企盍兰Q 区甚塞理垫佳狃剑巫窒论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人l ：评阅人2 ：评阅人3 ：评阅人4 评阅人5 ：答辩委员会主席：猩褪塞熬援差国越剧太堂盗杉丑金撞邀生堑：鱼疫生金王董笾堂丞委员1 ：篮丛邀熬援复旦太堂医堂暄鱼疫堂丕一委员2 ：王蕉兰熬援笈三至医太堂医堂免疫堂国塞重。基塞验窒委员3 ：粱廷选熬援逝逛太堂医堂瞳附属笈二医暄委员4 ：壬壹壹熬援逝洹太堂医堂瞳鱼疫堂盈窒压一委员5 ：答辩日期：2 0 1 1 一0 5 2 9T h e s i sr e v i e w e r1 ：T h e s i sr e v i e w e r
2、2 ：T h e s i sr e v i e w e r3 ：T h e s i sr e v i e w e r4 T h e s i sr e v i e w e r5 ：A u t h o r ss i g n a t u r e ：S u p e n ，i s o r ss i g n a t u l l e ：( C o m m i t t e eo fo r a ld e f e n s e )c 。m m i t t e e m a n1 ：堑塑亟h 坠，煦鱼墨墨Q LS 曼h 鲤! Q 丛鲤迤堡，堕亟垫堕垡Y 曼! 堑垃c 。m m i t t e e m a n2 ：逝些凰
3、麴鱼曼墨Q L 挝堑i Q 旦鱼! K 曼YL 坐Q ! 堑Q 理Q 丛曼查坌垒! ! 坠堕丛坠Q ! Q g 弘c 。r n m i n e e m a I l3 ：丑塾吐QL i 塑殴鱼曼墨Q LS h Q Q ! Q 丛鲤i 曼i 堕刍Z h 自i 垫g 堕迈鲨煎鲤C o m m i t t e e m a J l4 C o m m i t t e e m a n5 ：D a t eo fo r a ld e f e n s e ：2 011 0 5 2 9州剃嬲翌Y 19 3 4 3 0 9浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的
4、研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙婆太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：乖p q签字日期：训1 年轴i 7 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝望太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙塑太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。( 保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作
5、者签名：淋翻导师签名：签字日期I列年岁月刁日签字日期f年厂日 移7浙江大学博士学位论文致谢致谢时光飞逝，转眼间近四年的博士生生涯即将画上句点。回首求学路上的那些点点滴滴，一路走来，磕磕碰碰，跌跌撞撞。但我从未懊悔当初选择攻读免疫学博士学位，因为真正的快乐是挑战后的结果，没有经历彻骨的痛苦，也就体会不到酣畅淋漓的快乐。风雨兼程中，弥足珍贵的是那些曾经引导我、鼓励我、帮助我的人们，在此临近毕业之际，谨对他们表示最诚挚的感谢!首先要感谢的是我的导师曹雪涛教授。在人生的交叉路口，我非常庆幸自己作出了正确的抉择，能够成为教授的学生是我的毕生荣耀。教授那炙烫的科学热情、敏锐的科学洞悉力、慎独的科学思维、细
6、致严谨的工作态度和永不懈怠的精神永远是我追逐的方向，令人倾倒! 教授那虚怀若谷、厚德载物的人格魅力深深感染着我，令人臣服! 衷心感谢教授一直以来对学生的支持、宽容和照顾，学生唯有更加努力，以成绩回报教授的恩情。特别感谢李楠教授和陈涛涌副教授给我们提供的宽松、充足和便利的实验室环境，您们那勇于创新的工作作风和豪爽的处世风格是我们学习的榜样。特别感谢侯晋师兄、韩超峰师兄和刘星光师兄四年来对我科研上的悉心指导和生活上的关怀，感谢马烽博士、王品博士、张迁博士和李冬博士对我课题进展中的帮助。特别感谢分子免疫实验小组的兄弟姐妹，与你们一起度过了令人难忘的四年时光。特别感谢免疫所的其他老师和同学们的关心和帮
7、助，让我在这个团结进取的优秀团队里倍感集体的温暖和关怀。特别感谢浙大免疫所的王建莉教授、王青青教授，谢谢您们为我们这些在异地开展科学研究的浙大学子提供诸多便利、关爱和照顾，给予我们母校般的温暖。特别要感谢的是我的父母和亲人，你们永远坚定地站在我的身后，默默奉献爱与宽容，你们是我最最坚强的后盾，让我始终充满了自信和力量。最后，感谢在百忙之中评审我博士学位论文的各位专家和所有参与答辩的各位教授!序言天然免疫应答( I n n a t ei m m m l i t ) ，) 是机体在抵御病原微生物入侵时的第一道有效屏障。机体免疫系统具有多种能够行使天然免疫功能的细胞，例如巨噬细胞等等。目前对于天然免
8、疫细胞如何有效识别病原体以及随之而活化和行使天然免疫效应以清除入侵的病原体的机制尚不十分清楚，有关天然免疫细识别的细胞与分子机制的研究是免疫学前沿热点。天然免疫应答是由能够识别病原相关分子模式( P a t h o g e n a S s o c i a t e dm o l e c u l a rp 舭m s ，雕心伊s ) 的受体所介导的，这些受体统称为模式识别受体( P a t t e mr e c o 班i t i o nr e c e p t o r ，P b ) 。P 对b 能在细菌或者病毒入侵机体的第一时间识别这些细菌和病毒的组分。病原体被识别后P I 淝迅速向下游传递活化信号，
9、激活天 然免疫细胞内下游脚K 、N F 1 c B 以及I R F 等多条信号通路和多种转录因子，促使促炎性因子和I 型干扰素的表达，进而启动天然免疫应答。除此之外，P 剐R s活化亦能同时诱导抑炎性细胞因子如I L 1 0 的产生，拮抗炎性因子的促炎效应，防止免疫反应的过度活化。多种细胞与分子机制共同参与并维持免疫反应的性质、强度和持续时间，进而适度地启动并调节随后由T 、B 细胞介导的获得性免疫反应( A d 叩t i v ei m m u I l i 够) 。T o U 样受体( T o l l 1 i k er e c e p t o r s ，T L 飚) 是一类重要的模式识别受体，
10、主要表达于巨噬细胞和树突状细胞( D e n d r i t i cc e l l s ，D C s ) 表面，特异性识别病原体中特定的分子结构，激活其下游M y D 8 8 或T 刚F 依赖的信号通路，激活M A P K 、N F K B 或者I R F 3 信号，最终激活天然免疫细胞产生炎性细胞因子和I 型干扰素，构成机体免疫系统抵御病原体入侵的第一道屏障5 。另一类受到广泛关注的模式识别受体是维甲酸诱导的基因I 样受体( r e t i n o i da c i d i n d u c i b l eg e n eI ( 对G - I ) - l i k er e c e p t o r
11、 s ，R L R s ) ，包括G - I 和M D A 5 ( m e l a l l o md i 妇陪r e n t i a t i o n a S s o c i a t e dg e n e5 ) ，它们都可以识别胞浆中的病毒R N A 6 。常用于活化R I G I 信号的砌呵A 病毒有水泡口炎病毒( V - e s i c u l a rs t o m a t i t i sv i m s ，V S V )和仙台病毒( S e n d a iv i m s ，S e V ) 等。G I M D A 5 识别相应病毒R N A 后，通过I I浙江大学博士学位论文序言招募接头分子D
12、 S 1 ( I I l t e r f e r o n - b e t a p r o m o t e rs t i I I l u l a t o r l ) 等激活下游信号，引起I R F 3 以及N F KB 的核转位，最终促进I 型干扰素和炎性细胞因子产生，激发机体抗病毒反应7 。M i c r 0 I A ( m i I 矾A ) 是一类高度保守的非编码小片段I 矾A ，长度约为2 2个核苷酸。其功能主要是通过与m R N A ( m e s s e n g e rR N A ) 的3 非翻译区( 3 1 m t r a n s l a t i o n a lr e g i o 玛
13、3 U T R ) 特异靶位点相互作用从而负向调控m I A 的翻译，进而广泛影响细胞分化发育、免疫以及炎症等各种生理病理过程。m i R N A 参与免疫应答的调控及其机制研究是目前免疫学研究的热点。自2 0 0 6 年B a l t i m o r e 等首次报道m i R 1 4 6 a 在T L R 信号转导通路中的作用之后1 ，陆续已有多篇关于m i I A参与调控天然免疫应答及抗病毒免疫应答的相关报道川。基于V s V 病毒感染后巨噬细胞的高通量m i I 矾A 芯片，我们实验小组在其中发现m i R - 1 4 6 a 3 和m i R 1 5 5 4在抗病毒免疫I 型I F N
14、 的产生和I 型I F N 下游信号通路的调节过程中发挥重要功能。本实验在此高通量芯片分析结果中进一步筛选出了能被病毒感染及甜G I 信号显著调控的m i R 1 4 5 和m i R - 1 4 3 ，但目前对于m i R - 1 4 5 和m i R - 1 4 3 在天然免疫中作用及其意义上未见报道，因此，本课题进一步研究了m i R 1 4 5 和m i R 1 4 3在T L R 及G I 触发的天然免疫应答中的作用及其相关机制。本论文包括三部分研究内容，第一部分研究发现T L 飚及G I 触发巨噬细胞m i R - 1 4 5 m i R 1 4 3 的表达下调依赖于I 型干扰素的
15、产生；第二部分研究发现了m i R 1 4 5 可增强L P S 诱导的巨噬细胞刀J D 转录活化，上调I L 1 0 的表达，而间接抑制I L 1 2p 7 0 的产生；第三部分研究发现m i R - 1 4 5 的靶标为可促刀D 基因沉默的表观调控蛋白H D A C l l ，从而提出了m i R - 1 4 5 通过“解除抑制”的表观遗传机制而促进天然免疫中I L 1 0 产生的新观点。此外，揭示了天然免疫应答中所产生的I 型干扰素，可以通过反馈性调控m i R 1 4 5 进而对于天然免疫应答实现调控的重要作用，该研究结果为免疫应答的调控方式提出了新的作用机制，为细胞因子表达调控机制增
16、添了新的认识。I H浙江大学博士学位论文摘要m i R 1 4 5 促进天然免疫应答中巨噬细胞产生白细胞介素1 0 及其表观遗传机制研究浙江大学医学院博士研究生导师免疫学林莉曹雪涛中文摘要抑炎性细胞因子白血病介素1 0 ( I L 1 0 ) 的表达在免疫调节中发挥重要作用，其表达调控方式和相关机制目前受广泛关注。尽管在信号转导、转录调控和表观修饰等调控I L 1 0 表达方面已有较多报道，但目前有关I I l i c r o R N A 调控I L 1 0 表达的研究报道却知之甚少。m i c r o R N A 为近年来发现的一类小分子非编码I 斟A ，它在包括免疫应答在内的许多生物学过程中均发挥重要的调控功能。本研究中，我们通过V S V 病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞前后的高通量m i I 矾A 芯片筛选，发现V S V 感染后胞内m i R - 1 4 5 m i R 1 4 3 的表达水平发生显著下调。进一步研究揭示T L 黜及R J G
