《高效液相色谱法同时测定化妆品中的11种紫外吸收剂》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高效液相色谱法同时测定化妆品中的11种紫外吸收剂（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、高效液相色谱法同时测定化妆品中的 11 种紫外吸收剂Application Notes_C_LC-57黄雄风 刘绿叶 金燕 许群赛默飞世尔科技（中国）有限公司引言 太阳中紫外线可分为紫外线 -A（ 400-320nm）和紫外线 -B（ 320-290nm），以及紫外线 -C（ 280nm 以下）。通常，295nm 以下的光线不能到达地表，所以会到达人体皮肤的是前两个波长1。紫外线会导致皮肤晒黑、晒伤，甚至会诱发皮肤癌，特别是臭氧层空洞，使得到达地球的紫外线增多。为体现防晒功能，化妆品生产厂家会添加一定量具有防晒功能的紫外吸收剂于防晒霜、隔离霜等化妆品中。但是过量的紫外吸收剂，会使人体皮肤致敏机
2、率增加，影响人体健康。我国 2007 版化妆品卫生规范对防晒化妆品中的紫外吸收剂进行了限制；世界主要化妆品生产和消费国都对化妆品中的紫外吸收剂的种类和使用量进行了规定2-3。由于不同国家的地域差别，对化妆品中紫外吸收剂的限用量差别较大，比如甲氧基肉桂酸异戊酯已经得到欧盟批准使用，但日本禁止把甲氧基肉桂酸异戊酯与一些特定成分一起使用4。测定化妆品中紫外吸收剂的方法主要有：薄层色谱法、气相质谱法和高效液相色谱法4-8。其中，高效液相色谱法使用最为广泛。在 2002 年出版的进口化妆品中紫外吸收剂的测定 液相色谱法这一标准中，采用甲醇、四氢呋喃和水的混合溶液作为流动相，其中四氢呋喃除了具有较大的毒性
3、外，还容易引起色谱系统的不稳定，导致峰脱尾和新峰的产生等问题9。本文拟采用常用的高效液相色谱法，以乙腈和 0.1% 甲酸水溶液作为流动相，对化妆品中的 2- 羟基 -4 甲氧基二苯甲酮 -5- 磺酸，对 - 氨基苯甲酸，2，2，4，4- 四羟基二苯甲酮，4- 二甲氨基苯甲酸 -2- 乙基己酯，2- 羟基 -4- 甲氧基二苯甲酮，水杨酸苯酯，对甲氧基肉桂酸 -2- 乙基己酯，水杨酸 -2- 乙基己酯，丁基甲氧基二苯酰基甲烷，4- 甲基苄亚基樟脑，3，3，关键词紫外吸收剂 化妆品 高效液相色谱法5- 三甲基环已烷水杨酸酯等 11 种紫外吸收剂进行同时测定，为规范化妆品中紫外吸收剂的使用提供技术支持
4、。仪器Thermo ScientificTM DionexTM UltiMateTM 3000RS 四 元 系 统 ,包括： LPG-3400RS 四元分析泵（具备溶剂脱气功能） WPS-3000RS 自动进样器（配置 100 L 定量环） TCC-3000RS 柱温箱（具备控温功能） DAD-3000RS（检测池体积 SST 2.5 L）Thermo Scientific Chromeleon 色谱系统控制软件 , 版本 6.80 或以上试剂与标准品试剂去离子水，18.2 Mcm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，P/N 50131948)乙腈 (C
5、H3CN)，HPLC 级 (Fisher Chemical，P/N AC610010040)甲酸，优级纯（上海安谱科学仪器有限公司）2标准品2-羟基-4甲氧基二苯甲酮-5-磺酸， 对-氨基苯甲酸， 2， 2，4， 4-四羟基二苯甲酮， 4-二甲氨基苯甲酸-2-乙基己酯， 2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮， 水杨酸苯酯， 对甲氧基肉桂酸-2-乙基己酯，水杨酸 -2- 乙基己酯，丁基甲氧基二苯酰基甲烷，4- 甲基苄亚基樟脑，3，3，5- 三甲基环已烷水杨酸酯等 11 种紫外吸收剂标准品购买于上海安谱科学仪器有限公司。标准溶液的制备标准储备液 1分别称取 0.1 g 上述 11 种紫外吸收剂标准品，用甲
6、醇定容至 10mL，得到浓度均为 10000mg/L 的单标。各取 1mL 浓度为 10000mg/L 的单标，用甲醇定容至 20mL, 得到浓度为500mg/L 的混合标准储备液 1。标准工作溶液将标准储备液 1 按照标线要求逐级稀释成所需的浓度。结果与讨论实验条件的优化本文比较了甲醇 /0.1% 甲酸水溶液、乙腈 /0.1% 甲酸水溶液，结果表明乙腈 /0.1% 甲酸水溶液的分离效果较好。在优化的实验条件下，11 种紫外吸收剂可在 11.5 min 内完成分离， 目标化合物色谱峰的分离度均大于1.5， 见图1。重现性、线性和检出线为考察方法的重现性，本文采用八次连续进样浓度为50 mg/L
7、 的标准溶液，得到的保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）都分别小于 0.06% 和 1.20%，说明该方法具有良好的重现性；另外，11 种紫外吸收剂在 5-500 mg/L 内都具有良好的线性。重现性、线性及检出限结果见图 2和表 2。样品前处理样品分别称取两种不同的化妆试样 0.05 g , 用甲醇定容至 20 mL,充分混匀，超声萃取 30 min, 以 10000 r/min 速率离心 10 min,取上清液，用 0.45 m 滤膜过滤后直接进样。样品加标称取其中的一份化妆品试样 0.05 g , 加入 4 mL 浓度为 500 mg/L 的混标于样品中，用甲醇定容至 20 mL，充
8、分混匀，按样品前处理步骤与样品同步处理，样品加标的理论浓度为100 mg/L。色谱条件色谱柱：Acclaim 120, C18, 3 m (3.0150 mm) (P/N 063691)流动相：乙腈 / 0.1% 甲酸水溶液（梯度条件见表 1）进样体积：1L流速： 0.425 mL/min柱温：40 检测：紫外吸收， 311nm表 1. 流动相的梯度条件时间 (min)流动相 A- 乙腈 （%）流动相 C-0.1% 甲酸（%）Curve0158552158553752556841656.1100059100059.51585511.515855样品的测定为考察紫外吸收剂在不同化妆品的添加情况，
9、本文选择了两种不同的化妆品用于测试。结果表明，2- 羟基 -4- 甲氧基二苯甲酮、丁基甲氧基二苯酰基甲烷、水杨酸 -2- 乙基己酯、3，3，5- 三甲基环已烷水杨酸酯 等四种紫外吸收剂在两种化妆品中都有检出，见图 3 和表 3，其中 3，3，5- 三甲基环已烷水杨酸酯在两个化妆品中的检出浓度都最高。另外，为考察方法的回收率，根据目标化合物在样品中的检出浓度，加标的理论浓度为 100 mg/L, 结果表明 11 种紫外吸收剂的回收率为 77-116%，说明该方法具有良好的可靠性，见图 4 和表 3。3图 1. 11 种紫外吸收剂在 C18 色谱柱上的分离色谱图图 2. 连续八次进样的标样（浓度：
10、50mg/L）色谱图( 出峰顺序依次为：1- 对 - 氨基苯甲酸，2- 羟基 -4 甲氧基二苯甲酮 -5- 磺酸， 2， 2， 4， 4- 四羟基二苯甲酮， 2- 羟基 -4-甲氧基二苯甲酮，水杨酸苯酯，对甲氧基肉桂酸 -2- 乙基为考察紫外吸收剂在不同化妆品的添加情况， 本文选择了两种不同的化妆品用于测试。结果表明，2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、丁基甲氧基二苯酰基甲烷、水杨酸-2-乙基己酯、3，3，5-三甲基环已烷水杨酸酯 等四种紫外吸收剂在两种化妆品中都有检出，见图 3 和表 3，其中 3，3，5-三甲基环已烷水杨酸酯在两个化妆品中的检出浓度都最高。另外，为考察方法的回收率，根据目标化合物
11、在样品中的检出浓度，加标的理论浓度为100mg/L, 结果表明 11 种紫外吸收剂的回收率为 77-116%，说明该方法具有良好的可靠性，见图 4 和表 3。图 1.11 种紫外吸收剂在 C18 色谱柱上的分离色谱图(出峰顺序依次为：1-对-氨基苯甲酸，2-羟基-4 甲氧基二苯甲酮-5-磺酸，2，2，4，4-四羟基二苯甲酮，2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮，水杨酸苯酯，对甲氧基肉桂酸-2-乙基己酯，4-甲基苄亚基樟脑，丁基甲氧基二苯酰基甲烷，4-二甲氨基苯甲酸-2-乙基己酯，水杨酸-2-乙基己酯，3，3，5-三甲基环已烷水杨酸酯)0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0
12、11.5-20020406080100120140160180200 mAUmin12VWL:311nm45678910113己酯，4- 甲基苄亚基樟脑，丁基甲氧基二苯酰基甲烷，4-二甲氨基苯甲酸 -2- 乙基己酯，水杨酸 -2- 乙基己酯，3，3，5- 三甲基环已烷水杨酸酯 )0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.5-200255075100125150175200mAUmin8 7 6 5 4 3 2 1WVL:311 nm4表 2. 重现性、标线、检出线名称RSD（RT,%）RSD（峰面积 ,%）检出限（mg/L）标准方程对 - 氨基苯甲酸0.040.
13、430.80A=0.0832c+0.2247（R2=0.9995）2- 羟基 -4 甲氧基二苯甲酮 -5- 磺酸0.050.620.86A = 0.0604c + 0.0689（R2=0.9998）2，2，4，4- 四羟基二苯甲酮0.020.420.53A = 0.0959c + 0.2148（R2=0.9995）2- 羟基 -4- 甲氧基二苯甲酮0.010.870.61A = 0.0987c + 0.1608（R2=0.9997）水杨酸苯酯0.010.881.52A = 0.0409c + 0.0387（R2=0.9998）对甲氧基肉桂酸 -2- 乙基己酯0.030.560.22A = 0.
14、1928c + 0.6309（R2=0.9990）4- 甲基苄亚基樟脑0.020.540.23A = 0.1858c + 0.7391（R2=0.9990）丁基甲氧基二苯酰基甲烷0.020.351.32A = 0.0433c - 0.034（R2=1）4- 二甲氨基苯甲酸 -2- 乙基己酯0.030.330.33A = 0.1654c + 0.4911（R2=0.9994）水杨酸 -2- 乙基己酯0.031.201.60A=0.0414c+0.0745（R2=0.9996）3，3，5- 三甲基环已烷水杨酸酯0.031.202.24A = 0.028c + 0.0299（R2=0.9999）备注
15、：c 代表目标化合物的浓度 (mg/L)，A 代表目标化合物的峰面积。乙基己酯（R2=0.9990）4-甲基苄亚基樟脑0.020.540.23A = 0.1858c + 0.7391（R2=0.9990）丁基甲氧基二苯酰基甲烷0.020.351.32A = 0.0433c - 0.034（R2=1）4-二甲氨基苯甲酸-2-乙基己酯0.030.330.33A = 0.1654c + 0.4911（R2=0.9994）水杨酸-2-乙基己酯0.031.201.60A=0.0414c+0.0745（R2=0.9996）3，3，5-三甲基环已烷水杨酸酯0.031.202.24A = 0.028c + 0
16、.0299（R2=0.9999）备注：c 代表目标化合物的浓度(mg/L)，A 代表目标化合物的峰面积。图 3.空白、标样（浓度为 100mg/L）和样品的色谱图0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.5-1000100200300400500600700 mAUmin空白样品 2样品 1混标（100ppm）WVL:311 nm图 3. 空白、标样（浓度为 100 mg/L）和样品的色谱图图 4. 空白、标样、样品和样品加标的色谱图0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.5-1000100200300400500600700800 mAUmin样品加标（100ppm）标样（100ppm）样品空白WVL:311 nmmg/Lmg/L免费服务热线： 800 810 5118400 650 5118 ( 支持手机用户 )赛默飞世尔科技（中国）有限公司Application Notes_C_LC-57AN_C_LC-57表 3. 样品的测定结果及其回收率名称样品 1（mg/g
