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1、244730082存在特点和测定意义一 、叶绿素种类： 种类颜色丙酮溶液中长波吸收 峰比例叶绿素 a 蓝绿色663nm3 叶绿素 b黄绿色645nm1二、类胡萝卜素种类：类胡萝卜素包括：胡萝卜素和叶黄素，二者之比是 2：1。 （-胡萝卜素的乙醚溶液在 451 处有吸收峰）三、测定意义：1、高水分，叶绿素含量高，愈近成熟，叶绿素降低。2、低生物碱品系，叶绿素含量高，不易烤高生物碱品系，叶绿素含量低，易烤3、叶绿素含量影响烟叶成熟落黄河烘烤特性叶绿素和类胡萝卜素测定叶绿素和类胡萝卜素测定一、叶绿素测定1、原理：用有机溶剂将叶绿素提取出来，制成待测液，根据提取液对某一波长的光有 选择吸收，吸光度符合
2、朗莫-比尔定律，计算出待测液中叶绿素含量：ElgI0/IKCL 如果比色皿厚度一定，则上式简化为：EKCK：吸光系数C：浓度如果待测液中含有 2 种以上有色物质，其吸光度也符合朗莫-比尔定律溶液中含有 2 种有色物质时，有下式成立：E1=Ka1 Ca+Kb1 Cb （1） E2=Ka2 Ca+Kb2 Cb （2）在叶绿素的待测液中含叶绿素 a 和 b ，则有：E66382.04Ca9.27Cb （1） E64516.75Ca45.6Cb （2）244730082E66382.04Ca9.27Cb （1） E64516.75Ca45.6Cb （2）解联立方程式（1）和（2）得到：Ca=0.012
3、7 E663-0.00259 E645Cb=0.0229 E645-0.00467 E663Ca+b=0.00805E663+0.0203E6452、测定步骤待测液制备：0.5-2g 样品于乳钵（研钵）内，加 4 倍体积的丙酮和约 10mL 80%的丙 酮，乳棒研磨。用吸管仔细吸取抽出液转移到 50mL 容量瓶内，重向乳钵内加入 10mL 80%的 丙酮，继续研磨，合并抽出液，如此反复，直至研磨看不出有色素浸出为止，最后用 80%丙 酮定容到 50mL，充分混匀，放冷暗处，使瓶内溶液澄清。测定：吸取 2mL 待测液，用 80% 丙酮稀释到 20mL，测定其在 645nm，663nm 处的吸光值
4、 E645，E663。3、计算：把测定值代入下式计算得到叶绿素 a 和 b 的浓度，单位：g/LCa=0.0127 E663-0.00259 E645Cb=0.0229 E645-0.00467 E663Ca+b=0.00805E663+0.0203E645根据叶绿素浓度和待测液体积，分取倍数，计算出叶绿素含量待测液体积：50mL，取 2mL 稀释成 20mL 后测定吸光值。则有：二、类胡萝卜素测定：1、原理：将叶绿素 a 和 b 分离出去，剩下的类胡萝卜素溶于乙醚中，测定这个有 色溶液在 451nm 处的吸光值，计算出类胡萝卜素的近似含量2、测定：提取：5g 样用丙酮提取叶绿素 a 和 b 以及类胡萝卜素，蒸净提取液中的丙酮，加入乙 醚，和等量 20% （W/V）KOH 的甲醇溶液，提取液中的叶绿素被皂化，皂化液移入分液漏斗， 以免层加食盐水防止乳化，同时用水充分洗涤，加无水硫酸钠脱水，定容乙醚层，测定其在 451nm 处的吸光值。3、计算C=E/KLE:吸光值，K：吸光度，K451=250L：比色皿厚度/cmC：胡萝卜素浓度: g/L
