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1、上 海 交 通 大 学硕 士 学 位 论 文中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究姓 名 : 尹 龙 萍申 请 学 位 级 别 : 硕 士专 业 : 药 剂 学指 导 教 师 : 贾 伟 ;赵 爱 华20070101上 海 交 通 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究中药山豆根降酶护肝活性部位研究摘 要由 山 豆 根 制 备 的 肝 炎 灵 注 射 液 , 对 慢 性 活 动 性 肝 炎 的 降 酶 、 转 阴 疗效 显 著 , 毒 性 小 、 安 全 性 好 , 与 同 类 药 物 相 比 具 有 一 定 的 优 越
2、性 , 被 临床 上 推 荐 为 治 疗 慢 性 肝 炎 的 首 选 药 物 。 肝 炎 灵 注 射 液 由 山 豆 根 水 提 液 制备 而 来 , 以 总 生 物 碱 含 量 作 为 质 量 控 制 指 标 ( 含 总 生 物 碱 以 苦 参 碱 计 ,应 为 标 示 量 的 90.0 110.0 ) , 临 床 使 用 规 格 35mg / 2mL。本 课 题 研 究 目 的 为 基 于 肝 炎 灵 注 射 液 , 进 一 步 优 化 筛 选 山 豆 根 降 酶护 肝 的 活 性 部 位 。参 照 肝 炎 灵 注 射 液 的 生 产 工 艺 , 得 到 与 注 射 液 基 本 一 致 的
3、 粗 提 物 。进 一 步 采 用 硅 胶 柱 色 谱 分 离 技 术 , 将 粗 提 物 分 离 为 含 生 物 碱 和 不 含 生 物碱 两 个 部 位 。 结 合 大 鼠 CCl4 实 验 性 急 性 肝 损 伤 模 型 , 以 反 映 肝 损 伤 程度 最 敏 感 的 血 清 生 化 酶 ALT、 AST 为 考 察 指 标 , 对 两 个 分 离 部 位 进 行 初步 的 药 效 筛 选 。 发 现 不 含 生 物 碱 部 位 能 显 著 降 低 实 验 性 急 性 肝 损 伤 大 鼠血 清 中 异 常 升 高 的 ALT、 AST 水 平 。 实 验 结 果 提 示 现 行 的 以
4、 生 物 碱 作 为肝 炎 灵 注 射 液 的 质 量 标 准 值 得 商 榷 。基 于 初 步 药 效 筛 选 的 结 果 , 验 证 和 探 索 山 豆 根 降 酶 护 肝 的 活 性部位 。 采 用 水 提 取 醇 沉 淀 法 得 到 山 豆 根 粗 多 糖 部 位 ( 沉 淀 ), 然 后 在 母 液I上 海 交 通 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究中 尽 量 除 去 生 物 碱 , 得 到 不 含 生 物 碱 部 位 。 再 次 结 合 大 鼠 CCl4 实 验 性急 性 肝 损 伤 模 型 对 两 个 分 离 部 位 进 行
5、 药 效 筛 选 , 发 现 不 含 生 物 碱 部位和 水 提 醇 沉 成 分 在 一 定 剂 量 范 围 内 , 均 能 显 著 降 低 实 验 性 急 性 肝 损伤大 鼠 异 常 升 高 的 血 清 ALT、 AST 水 平 , 发 挥 降 酶 护 肝 效 果 。 实 验 结 果证 实 了 山 豆 根 不 含 生 物 碱 部 位 具 有 显 著 的 降 酶 护 肝 作 用 , 因 而 提 示有效 成 分 很 可 能 不 仅 仅 是 生 物 碱 。本 实 验 结 果 将 为 进 一 步 分 离 有 效 成 分 , 开 发 高 效 低 毒 的 降 酶 护肝药 奠 定 物 质 基 础 , 同
6、时 也 为 临 床 合 理 用 药 提 供 科 学 依 据 。关键词:山 豆 根 , 降 酶 护 肝 , 活 性 部 位II上 海 交 通 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究Preliminary Screening active fractions ofRadix Sophorae tonkinensis for liver protectionABSTRACTRadix Sophorae tonkinensis has been widely used in clinic for treatmentof liver diseases
7、in China for long history. However, the active fraction hasntbeen intensively studied. In this dissertation, active fractions were isolatedand investigated on acute hepatic injury rats induced by CCl4 to evaluate theirlive protection effects. Rats firstly received different isolated fractions of the
8、plant for several consecutive days before injection of CCl4. Then their serumsALT and AST levels were quantified after 24h of taking in CCl4. The levelsof ALT 、 AST significantly decreased in groups treated non-alkaloidsfractions of Sophorae tonkinensis, compared with those of model group.Theresults
9、 suggest that fractions of non-alkaloids from Radix Sophoraetonkinensis are effective in protecting against hepatotoxicity induced by CCl4,which obviously differs from the conventional concept and encourages toIII上 海 交 通 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究further research on the active pri
10、ncipals.Keywords: Radix Sophorae tonkinensis,hepatoprotective,active fractionsIV上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独 立 进 行 研 究 工 作 所 取 得 的 成 果 。 除 文 中 已 经 注 明 引 用 的 内 容 外 , 本论 文 不 包 含 任 何 其 他 个 人 或 集 体 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 作 品 成 果 。 对 本文 的 研 究 做 出 重 要 贡 献 的 个 人 和 集 体 , 均 已 在 文 中 以 明 确 方 式 标 明 。本
11、 人 完 全 意 识 到 本 声 明 的 法 律 结 果 由 本 人 承 担 。学 位 论 文 作 者 签 名 : 尹 龙 萍日 期 : 2007 年 1 月 29 日上海交通大学学位论文版权使用授权书本 学 位 论 文 作 者 完 全 了 解 学 校 有 关 保 留 、 使 用 学 位 论 文 的 规 定 ,同 意 学 校 保 留 并 向 国 家 有 关 部 门 或 机 构 送 交 论 文 的 复 印 件 和 电 子 版 ,允 许 论 文 被 查 阅 和 借 阅 。 本 人 授 权 上 海 交 通 大 学 可 以 将 本 学 位 论 文 的全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据
12、库 进 行 检 索 , 可 以 采 用 影 印 、 缩 印 或 扫描 等 复 制 手 段 保 存 和 汇 编 本 学 位 论 文 。保密 , 在 年 解 密 后 适 用 本 授 权 书 。本 学 位 论 文 属 于不保密。( 请 在 以 上 方 框 内 打 “ ”)学 位 论 文 作 者 签 名 : 尹 龙 萍 指 导 教 师 签 名 : 贾 伟日 期 : 2007 年 1 月 29 日 日期: 2007 年 1 月 29 日上 海 交 通 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 药 山 豆 根 降 酶 护 肝 活 性 部 位 研 究第一章 文献综述1.1 引言中 药 ( traditional
13、Chinese medicines,TCMs) 是 中 华 民 族 经 历 漫 长 历 史 发 展 保 存 下来 的 优 秀 瑰 宝 , 从 最 早 的 商 朝 甲 骨 文 关 于 中 药 的 记 载 至 今 已 有 将 近 五 千 年 的 临 床 实践 , 并 形 成 了 系 统 的 传 统 中 医 理 论 体 系 , 在 我 国 有 着 极 其 广 泛 的 应 用 。 数 千 年 来 我国 一 直 在 进 行 中 药 的 研 究 , 但 中 药 的 近 代 基 础 性 研 究 始 于 50 年 代 1。 20 世 纪 中 叶 以 来 ,自 然 科 学 中 诞 生 的 许 多 新 概 念 、
14、 新 方 法 , 如 色 谱 技 术 、 波 谱 技 术 、 立 体 化 学 及 电 子计 算 机 等 , 不 断 向 中 药 研 究 领 域 渗 透 , 加 上 生 理 学 、 生 物 化 学 , 特 别 是 分 子 生 物 学的 进 展 , 为 中 药 基 础 性 研 究 提 供 了 现 代 的 理 论 、 概 念 、 技 术 和 方 法 。中 药 的 特 点 是 多 组 分 综 合 对 人 体 本 质 的 医 疗 , 其 基 础 是 所 含 的 各 种 化 学 成 分 。中 药 是 整 体 协 同 作 用 , 因 而 在 研 究 方 法 上 不 能 局 限 于 个 别 有 效 成 分 ,
15、 而 应 进 行 中 药全 组 成 的 研 究 。 我 国 中 药 己 经 积 累 了 丰 富 的 实 践 经 验 并 有 深 厚 的 中 医 理 论 指 导 , 在全 面 地 了 解 中 药 各 组 分 信 息 的 基 础 上 , 就 可 以 阐 明 其 化 学 物 质 基 础 的 内 涵 , 并 且 能对 中 医 的 理 论 、 治 疗 和 药 材 及 制 品 的 质 量 控 制 有 很 大 的 发 展 和 提 升 。由 于 中 药 是 天 然 产 物 的 混 合 物 , 不 仅 组 成 极 为 复 杂 , 而 且 受 产 地 、 气 候 、 采 集 、制 备 等 方 面 的 影 响 也
16、很 严 重 , 因 而 中 药 的 化 学 组 成 研 究 也 是 目 前 研 究 的 难 点 。 但 随着 分 析 技 术 的 日 益 发 展 , 采 用 以 液 相 色 谱 为 主 体 的 各 种 色 谱 手 段 , 配 合 质 谱 和 各 种光 谱 的 综 合 分 析 , 得 到 各 组 分 的 信 息 后 系 统 地 分 析 中 药 的 化 学 成 分 并 阐 明 活 性 部 位或 有 效 成 分 种 类 已 越 来 越 成 为 可 能 。 建 立 全 面 反 映 中 药 所 含 成 分 的 指 纹 图 谱 , 将 更加 有 效 地 体 现 中 药 成 分 的 整 体 性 和 综 合 作 用 , 从 而 能 更 好 地 评 价 中 药 的 质 量 。1.2 中药研究现状国 外 对 中 药 的 研 究 可 简 单 归 纳 为 四 种 方 法 : 一 是 传 统 的 科 学 制 法 。 对 传 统 复 方或 经 验 方 制 成 颗 粒 或 胶 囊 , 如 日 本 和 韩