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1、重 庆 大 学硕 士 学 位 论 文中 药 厚 朴 与 吴 茱 萸 有 效 成 分 的 毛 细 管 电 泳 分 析姓 名 : 辛 龙 涛申 请 学 位 级 别 : 硕 士专 业 : 药 物 化 学指 导 教 师 : 夏 之 宁20050501重 庆 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 文 摘 要摘 要中 药 经 过 长 期 的 临 床 实 践 证 实 , 具 有 确 切 的 疗 效 , 合 理 运 用 可 减 少 或 避 免 毒副 作 用 。 但 由 于 缺 乏 客 观 、 严 格 的 质 量 控制、 检 验 标 准 和 可 靠 、 系 统 的 科 学 实 验证 实 其 有 效 性 和 安 全
2、 性 , 中 药 至 今 未 能 进入国 际 医 药 主 流 市 场 。 将 现 代 化 的 科 学分 析 技 术 用 于 传 统 中 药 的 现 代 化 研 究 , 具有重 要 的 实 际 意 义 。 毛 细 管 电 泳 技 术 是近 年 发 展 起 来 的 一 种 新 的 分 析 手 段 , 具 有高效 、 快 速 、 样 品 用 量 少 等 优 点 。 非 水毛 细 管 电 泳 由 于 使 用 了 有 机 溶 剂 作 为 分 离介质 , 具 有 一 些 常 规 毛 细 管 电 泳 所 不 具备 的 优 势 , 拓 宽 了 毛 细 管 电 泳 的 应 用 范 围,在 分 析 水 不 溶 性
3、 物 质 方 面 具 有 独 到 的优 势 。本 文 首 先 综 述 了 近 年 来 毛 细 管 电 泳 在 中 药 领 域 的 研 究 现 状 以 及 非 水 毛 细 管 电泳 用 于 中 药 分 析 的 现 状 。 然 后 将 毛 细 管 电泳技 术 用 于 中 药 厚 朴 和 吴 茱 萸 的 成 分 分析 中 , 建 立 了 两 种 不 同 的 毛 细 管 电 泳 方 法 。 研 究 的 主 要 内 容 及 结 果 如 下 :1. 以 缓 冲 液 加 入 -CD 为 添 加 剂 的 毛 细 管 区 带 电 泳 方 法 , 用 于 厚 朴 药 材 及 其制 剂 的 分 析 。 优 化 了
4、厚 朴 提 取 物 的 分 离 条 件 , 考 察 了 缓 冲 溶 液 浓 度 、 pH 值 、 -CD的 添 加 浓 度 对 分 离 的 影 响 , 确 定 了 最 佳 的 分 离 缓 冲 溶 液 组 成 为 30 mmol/L 硼 砂 和2.4 mmol/L -CD, pH 值 为 9.48; 推 测 出 和 厚 朴 酚 的 二 级 离 解 常 数 pKa2 的 范 围 为9.94-10.83;在优化的分离条件下,测定了厚朴药材和藿香正气口服液中和厚朴酚的 含 量 分 别 为 3.42-5.98 mg/g、 0.021 mg/mL, 和 厚 朴 酚 的 线 性 范 围 是 0.020-0.
5、405mg/mL, 其 线 性 相 关 系 数 R=0.998(n=5), 加 样 回 收 率 为 98.4-103.5%, RSD 为3.2-5.7%(n=3)。2. 建立了非水毛细管电泳用于吴茱萸中吴茱萸次碱的分离测定的方法。考察了 影 响 电 泳 分 离 的 各 因 素 如 缓 冲 溶 液 的 浓度、 用 于 调 节 酸 碱 度 的 乙 酸 的 添 加 比 例及 用 于 调 节 电 渗 流 的 乙 腈 的 添 加 比 例 , 最 后 优 化 的 分 离 缓 冲 溶 液 的 组 成 是 40mmol/L NH4Ac 的 甲 醇 溶 液 , 其 中 含 有 30%的 乙 腈 和 10%的 乙
6、 酸 。 在 优 化 的 分 离条 件 下 , 对 吴 茱 萸 药 材 中 的 吴 茱 萸 次 碱 含量进 行 了 测 定 , 吴 茱 萸 次 碱 的 线 性 范 围是 0.0230 0.460 mg/mL , 其 线 性 相 关 系 数 R=0.9973(n=7) , 加 样 回 收 率 为106.3%(n=3)。关 键 词 : 厚 朴 , 吴 茱 萸 , 毛 细 管 电 泳 , 非 水 毛 细 管 电 泳 , 和 厚 朴 酚 , 吴 茱 萸 次 碱I重 庆 大 学 硕 士 学 位 论 文 英 文 摘 要ABSTRACTTraditional Chinese Medicine (TCM) h
7、as been proved to have definite therapeuticeffects through clinical application for a long time, and most TCM have slightly or noside effect if administered reasonably. Because of deficiency in objective and strictquality controlling-testing criterion, reliable and systematic scientific experiments
8、toverify its validity and security, TCM is still kept out of the prevailing internationalmedicine market. It is of practical significance to apply this scientific method to modernresearches of TCM. As a new advanced method of separation and analysis, Capillaryelectrophoresis (CE) has been used in th
9、e field of analytical chemistry, with such meritsas high efficiency, speediness and low cost. By use of organic solvents as separationmedia, nonaqueous capillary electrophoresis (NACE), which expands the application ofCE, has some merits that cant be found in conventional CE. It is provided with ori
10、ginaladvantages in analyzing materials with poor aqueous solubility.There are mainly two parts in this thesis. In the first part, the development ofresearches in TCM with CE and NACE was reviewed. In the second part, the content oftwo kinds of TCM was analyzed by CE and NACE, respectively. The main
11、researchcontents and conclusions are mentioned as below:1. A capillary zone electrophoresis method modified with -cyclodextrin (-CD)was developed for the purpose of determining the content of honokiol in CortexMagnoliae Officinalis and Cortex Magnoliae Officinalis-containing preparation. Thefactors
12、relevant to the running buffer and their effects on separation were investigated.The buffer solution composed of 30 mmol/L sodium borate and 2.4 mmol/L -CD wasfound to be the most suitable electrolyte for separation. The second order dissociationconstant range of honokiol was estimated. The content
13、range of honokiol in CortexMagnoliae Officinalis and was 3.42-5.98 mg/g, while the mean content of honokiol inits preparation (Huoxiangzhengqi Oral Liquid) 0.021 mg/mL. A good linear responsetowards honokiol was found in the range from 0.020 mg/mL to 0.405 mg/mL (R= 0.998,n=5). The recovery ranged b
14、etween 98.4% and 103.5%.2. A simple NACE method has been developed for the assay of Rutaecarpine inEvodia rutaecarpa for the first time. Optimum separation of the analytes was obtainedusing a nonaqueous buffer system with 40 mmol/L ammonium acetate containing 30%acetonitrile and 10% acetate acid. Th
15、e factors relevant to the running buffer and theirII重 庆 大 学 硕 士 学 位 论 文 英 文 摘 要effects on separation were discussed. The content of Rutaecarpine in Evodia rutaecarpawas determined. The assay was linear for Rutaecarpine in the concentration range of0.023-0.46 mg/mL, R=0.9966(n=8). The recovery is 106
16、.3%(n=3).Keywords: Cortex Magnoliae Officinalis, Evodia rutaecarpa, Capillary Electrophoresis(CE), Nonaqueous Capillary Electrophoresis (NACE), Honokiol,RutaecarpineIII种 , 即 : 毛 细 管 区 带 电 泳 (Capillary Zone Electrophoresis, CZE)、胶束电动毛细管重 庆 大 学 硕 士 学 位 论 文 1 毛 细 管 电 泳 及 其 在 中 药 成 分 分 析 中 的 应 用1 毛细管电泳及其在中药成分分析中的应用1.1 毛 细 管 电 泳 的 基 本 原 理 及 分 离 模 式毛 细 管 电 泳 (Capillary Electrophoresis, CE)是 指 以 高 压 电 场 为 驱 动 力 , 以 毛 细 管为 分 离 通 道 , 依 据 样 品 中 各