《4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4及Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对CCl4及Dgal致小鼠急性肝损伤的保护作用（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、14苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 及 Dgal 致小鼠急性肝损伤的保护作用作者：程培锋，潘雪刁，李南，金桂芳，赵锦欢，胡枫，潘琴，臧林泉【摘要 】 目的 观察合成的 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对四氯化碳(CCl4)和 D半乳糖 (Dgal)致小鼠急性肝损伤的影响。方法 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物预防给药后观察其对 CCl4 和 Dgal 致急性肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶（ALT） 、总胆红素（TBIL） 、谷草转氨酶(AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 及还原型谷胱甘肽(GSH) 水平的影响。结果 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物可降低急性肝损伤小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP，还原型谷胱甘肽(
2、GSH) 含量升高。结论 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 和 DGal 所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。 【关键词】 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物；CCl4 ；D 半乳糖；肝损伤Abstract:Objective To investigate the effects of clausenamide derivative on carbon tetrachloride (CCl4) and Dgalactosamine (Dgal) induced acute liver injury in mice. 2Methods The mice were pretreatment with cla
3、usenamide derivative prior to the administration of CCl4 and Dgal, and the changes of serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), total bilirubin (TBIL) , alkaline phosphatase（ALP）and glutathione (GSH) in these mice were examined respectively. Results Clausenamide derivat
4、ive significantly reduced CCl4 and Dgal inducing acute hepatic injury by decreasing ALT, AST, TBIL and ALP in serum; and GSH levels in test group were higher. Conclusion Clausenamide derivative had good protective effects on acute hepatic injury in mice.Key words:clausenamide; carbon tetrachloride;
5、Dgalactosamine；liver injury急性肝炎是临床上常见疾病,主要临床特征为肝脏损害,血清中常出现明显的谷丙转氨酶（ALT） 、总胆红素（TBIL） 、谷草转氨酶(AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 升高，除了化学试剂、药物、毒物、病毒的直接作用外,机体内免疫功能紊乱也起关键作用，对人类健康危害极大。有研究表明1-3, 黄皮酰胺类化合物具有抗自由基，对D半乳糖 (Dgal) 和四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝损伤有保护作用。本文采用 CCl4 和 Dgal 诱导小鼠发生实验性急性肝损伤，3观察合成的 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 和 Dgal 致小鼠急性肝损伤的影响。
6、1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物 昆明种小鼠，普通级，雌雄各半，体质量1822 g，由广东省实验动物中心提供，合格证号：2007A022 ，分笼饲养，室温(222) ，相对湿度 45%60%，自动控制昼夜各 12 h，颗粒饲料喂养，自由饮水。1.1.2 药品与试剂 受试物黄皮酰胺系列衍生物为本校药化教研室林汉森课题组提供。四氯化碳(CCl4) 西安化学试剂厂(批号：990806)； D半乳糖(DGalacto samine, Dgal) 北京化工厂产品( 批号:870522)；联苯双酯滴丸，广州星群(药业)股份有限公司生产（批号：DF40100） ；其他试剂均为国产分析纯。1.2
7、 方法1.2.1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的保护作用 取昆明小鼠 70 只，随机分为 7 组，即空白对照组、4CCl4 模型对照组、溶媒对照组（60%丙二醇） 、阳性对照药组（0.75%的联苯双酯滴丸混悬液 150 mg/kg） 、4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组（25 、50 、100 mg/kg） ，每组 10只。4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组药物均用60%()丙二醇配制。各给药组每天按设定剂量灌胃给药 1 次，给药容积 0.15 mL/10 g，空白对照组与 CCl4 模型对照组给予等量的生理盐水，溶媒对照组给予等量的溶媒（60%丙二醇
8、） ，连续 7 d。末次给药 1 h 后，腹腔注射给予 10% CCl4 花生油溶液（VV） ，给药容积为 10 mL/kg，空白对照组腹腔注射给予等量的溶媒（花生油） 。24 h 后眼球取血 ,常规分离血清,用 Vital 2200 型自动生化测定仪测定血清 ALT、TBIL、AST 、ALP、GSH 含量。1.2.2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 Dgal 致小鼠急性肝损伤的保护作用 取昆明小鼠 70 只，随机分为 7 组，即空白对照组、Dgal 模型对照组、溶媒对照组（60%丙二醇） 、阳性对照药组（0.75%的联苯双酯滴丸混悬液 150 mg/kg） 、4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、
9、高剂量组（25 、50 、100 mg/kg） ，每组 10只。4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物低、中、高剂量组药物均用60%()丙二醇配制。各给药组每天按设定剂量灌胃给药 1 次，给药容积 0.15 mL/10 g，空白对照组与 Dgal 模型对照组给予等量的生理盐水，溶媒对照组给予等量的溶媒（60%丙二醇） ，连续 7 d。末次给药 1 h 后，,除空白对照组外余各组小鼠按 800 mg/kg 腹腔5注射给予 Dgal,24 h 后眼球取血, 常规分离血清,用 Vital2200 型自动生化测定仪测定血清 ALT、TBIL、AST 、ALP 、GSH 含量。1.3 统计学处理实验数据以s 表示，
10、采用 SPSS 10.0 软件进行 t 检验，P0.05 为差异有显著性。2 结果2.1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 致小鼠急性肝损伤的保护作用CCl4 可致小鼠血清 ALT、TBIL、AST、ALP 明显升高, GSH含量下降。而阳性对照药联苯双酯则可以明显降低ALT、TBIL、AST、ALP，升高 GSH 水平，提示其对 CCl4 致小鼠急性肝损伤有较好的保护作用，与模型组比有统计学意义（P0.05） 。4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 致小鼠急性肝损伤具有保护作用，呈明显的量 效关系，即随着 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物用药剂量的增加，小鼠血清 ALT、TBIL、AST、AL
11、P 水平逐渐降低，GSH 水平逐渐升高，中剂量组（50 mg/kg）与模型组相比，ALT 、AST 降低（P0.05 ） ，对 TBIL、ALP 和 GSH 则影响不大；而高剂量组（100 mg/kg）与模型组比，6ALT、AST、TBIL、ALP 降低，GSH 水平升高（ P0.05） 。见表1。表 1 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用（略）Tab.1 Protective effects of clausenamide derivative on CCl4 induced acute liver injury in mice.与模型组相比：*P0.05，*P0.
12、012.2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 Dgal 致小鼠急性肝损伤的保护作用Dgal 可致小鼠 ALT、TBIL 、AST、 ALP 明显升高， GSH含量下降。而阳性对照药联苯双酯则可以明显降低ALT、TBIL、AST、ALP，升高 GSH 水平，提示其对 Dgal 致小鼠急性肝损伤有较好的保护作用，与模型组相比有统计学意义（P0.05） 。4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 Dgal 致小鼠急性肝损伤具有保护作用，呈明显的量 效关系，即随着 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物用药剂量的增加，小鼠血清 ALT、TBIL、AST、ALP 水平逐渐降低，GSH 水平逐渐升高。与模型组相比，明显降低7ALT、AS
13、T、TBIL 水平，有统计学意义（P0.05） ；对 ALP 水平虽然有一定程度的降低，并升高 GSH 水平，但是与模型组相比无统计学意义（P0.05） 。见表 2。表 2 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 Dgal 致小鼠急性肝损伤的保护作用（略）Tab.2 Protective Effects of clausenamide derivative on Dgal induced acute liver injury in mice与模型组比较: *P0.05，*P0.013 讨论Liu GT 等4-6 研究结果表明, 黄皮酰胺类化合物有抗肝细胞损伤作用，对正常小鼠肝药酶有调节作用，它们可诱导或抑
14、制肝微粒体 P450 含量及其酶活性，并可增加肝谷胱甘肽含量，增强肝胞浆液中谷胱甘肽硫 转移酶的活性，其作用具有立体构型上的偏向性，已知 GSH 和 GST 两者在解毒过程中包括对化学致癌物的解毒起重要作用。近年来研究表明7,8 , 肝损伤是多因素参与的复杂过程,自8由基和脂质过氧化在肝损伤中起着十分重要的作用。CCl4 对肝脏的作用主要是经肝微粒体细胞色素酶 P450 活化后产生三氯甲基( CCl3) 自由基而引起膜脂质过氧化, 引起肝细胞变性坏死, 使血清ALT 和 AST 水平明显升高及肝药酶活性显著降低。D 半乳糖所致肝损伤是由于消耗提供尿苷合成的尿苷二磷酸及核糖核酸材料尿苷,导致糖原
15、及 RNA、蛋白质合成障碍 ,引起肝细胞坏死。D 半乳糖引起肝细胞内钙离子增多,镁离子减少, 钙离子增多时抑制线粒体的呼吸功能, 激活磷脂酶, 分解膜磷脂 ,破坏溶酶体膜, 使蛋白水解酶释放,并使黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶,加速氧自由基的产生,从而使损伤进一步加剧。自由基是人体正常生化过程的中间产物,在机体正常及病理过程中都存在,同时机体在进化过程中获得了灭活氧自由基的一些酶, 如 GSHPX 等。GSHPX 是重要的催化过氧化氢分解的酶,它特异地催化还原性 GSH 对过氧化氢的还原反应,从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作用。本实验结果显示，4 苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4、Dga
16、l 所致急性肝损伤小鼠血清ALT、TBIL、AST、ALP 的升高有明显降低作用，且能提高 GSH 水平，说明 4苯基卤代黄皮酰胺衍生物对 CCl4 和 Dgal 所致肝细胞损伤均有一定防治作用，其保肝机制可能与其对抗自由基脂质过氧化密切相关，与文献报道结果一致并且优于其他黄皮酰胺衍生物1,2 。【参考文献】91 吴宇群，刘耕陶. 光学活性黄皮酰胺类化合物体外对黄曲霉毒素 B1 损伤大鼠肝细胞非程序性 DNA 合成的保护作用J. 中国药理学与毒理学杂志， 2006， 20(5):393-398. 2 魏怀玲，李伟勋，陈延镛，等. 黄皮叶对小鼠化学性肝损伤的保护作用及其毒性J. 中药药理与临床，1996，12(4):18-20.3 林童俊，李小洁. 黄皮酰胺抗脂质过氧化及对氧自由基清除作用J.中
