《食管鳞癌组织中HIF1α及FHIT蛋白的表达及意义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《食管鳞癌组织中HIF1α及FHIT蛋白的表达及意义（11页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1食管鳞癌组织中 HIF1 及 FHIT 蛋白的表达及意义【摘要】 目的：研究缺氧诱导因子1(HIF1) 及脆性组氨酸三联体基因(FHIT) 蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组织化 SP 法检测 48 例食管鳞癌及癌旁组织中 HIF1 及FHIT 蛋白的表达，分析其与食管鳞癌病理特征的关系。结果：食管鳞癌组织中 HIF1 的总阳性表达率明显高于癌旁组织(P0.05),而 FHIT 蛋白的总阳性表达率明显低于癌旁组织(P0.05);在食管鳞癌组织中 HIF1 的表达与 FHIT 蛋白的表达呈负相关(P=0.006，r=-0.392);HIF1 及 FHIT 蛋白在食管鳞癌组织中
2、的表达与浸润深度(pTNM 分期)及淋巴结转移有明显关系 (P0.05)，而 HIF1 表达还与癌组织分化程度相关(P0.05)。结论：HIF1 及 FHIT 蛋白的异常表达在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用，在一定程度上反映了食管鳞癌侵袭性强弱，且 HIF1 高表达与 FHIT 蛋白低表达存在相关性，FHIT 的检测有利于食管鳞癌患者的早期诊断。 【关键词】 缺氧诱导因子1; 脆性组氨酸三联体基因; 食管鳞癌ABSTRACT Objective: To study the expressions of HIF1 and FHIT protein in esophageal squamous
3、carcinoma 2tissue. Methods: By using SP method of immunohistochemical technique, the expression of HIF1 and FHIT protein in 48 specimens of esophageal squamous carcinoma tissue and its corresponding adjacent tissu were detected, and their relationship with clinicopathological characteristics were an
4、alyzed. Results: The positive expression intensity of HIF1 in esophageal squamous carcinoma tissue was remarkably stronger than that in its corresponding adjacent tissue (P0.05),while the expression intensity of FHIT protein was weaker in esophageal squamous carcinoma tissue (P0.05).There was negati
5、ve correlation between the positive expression rate of HIF1 protein and that of FHIT protein in esophageal squamous carcinoma tissue(P0.01，r=-0.392). The expression of HIF1 and FHIT protein in esophageal squamous carcinoma tissue were correlated with the invasion depth (pTNM tumor stage) and lymph n
6、ode metastasis (P0.05)，and the expression of HIF1 was correlated with the differentiation of tumors (P0.05).Conclusions: The abnormal expressions of HIF1 and FHIT protein in esophageal squamous carcinoma tissue suggest that they probably play some roles in the 3origin and development of esophageal s
7、quamous carcinoma，and it reflects the differentiation and invasive potential of esophageal squamous carcinom tissues to same degrees.There is significant correlation between the expression of HIF1 and FHIT.The determination of FHIT may help in early diagnosis of esophageal squamous cell carcinoma pa
8、tients.KEY WORDS HIF1;FHIT;Esophageal squamous carcinoma缺氧诱导因子1(HIFl) 是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，由 HIF1 和 HIF1 2 个亚基组成，近年来研究发现 HIF1 在多种恶性肿瘤中过度表达，并与肿瘤的发生、发展及转移等有一定相关性1。脆性组氨酸三联体基因(FHIT)是 1996 年发现的一个重要的抑癌基因，存在于大多数正常组织中，有研究发现多种肿瘤组织 FHIT 蛋白表达存在频繁地降低或丢失，并发现与 FHIT 基因转录及缺失有关。本组研究通过免疫组织化学SP 检测食管鳞癌组织中 HIF1 及
9、FHIT 蛋白的表达，并评估其与食管鳞癌临床病理指标之间的相关性，为临床食管鳞癌的早期诊断和治疗提供一定依据。41 资料与方法1.1 一般资料收集 2006 年 6 月2009 年 6 月在我院外科经手术切除且经病理医师证实的食管鳞癌 48 例，术前均未经任何抗肿瘤治疗，其中男性 30 例，女性 18 例，年龄 3673 岁，平均(48.359.64)岁; 高分化鳞癌 14 例，中分化鳞癌 19 例，低分化鳞癌 15 例;TNM分期: 期 8 例, 期 6 例,期 20 例，期 14 例;有淋巴结转移者27 例，无淋巴结转移者 21 例; 癌旁正常组织取自上述标本中距肿瘤边缘 6cm 以上的食
10、管上皮,并经病理检查排除肿瘤累及。取材标本经中性福尔马林固定、脱水、常规石蜡包埋，制备 4mm 连续切片，并经 HE 染色，进行病理诊断。1.2 主要试剂兔抗人 HIFla 多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司(工作浓度为 1100);兔抗人 FHIT 多克隆抗体、SP 免疫组化试剂盒、DAB 显色剂均购自北京中杉金桥生物技术公司。1.3 方法5所有组织标本经 l0%甲醛固定后常规石蜡包埋，根据 HE 染色切片挑选蜡块，4m 厚连续切片，采用免疫组化 SP 法检测HIF1a 及 FHIT 蛋白的表达，检测步骤按试剂盒说明书进行操作。HIFla 及 FHIT 蛋白阳性表达者均为细胞浆出现棕黄
11、色细颗粒,少许表达于细胞核，每张切片在高倍显微镜下选定 10 个视野,计算阳性细胞百分数。阳性细胞百分数10%为染色阴性 (-)，10%50%为阳性(+),50%为强阳性(+)。采用双盲法判断结果。1.4 统计学处理应用 SPSS16.0 统计软件进行统计分析，两样本率的比较采用 2 检验; 多样本率的比较采用行列表 2 检验; 相关性检验应用spearman 相关分析，检验水准 a=0.05。2 结果2.1 HIF1 及 FHIT 蛋白在癌旁组织及食管鳞癌组织中的表达HIF1 在食管鳞癌组织的总阳性表达率(81.3%)明显高于癌旁组织(27.1%)(P0.05) ，而 FHIT 蛋白在食管鳞
12、癌组织中的总阳性表达率(31.3%)明显低于癌旁组织(89.6%)(P0.05),见表 1 及图614 。表 1 FHIT 及 HIF1 在食管鳞癌组织和癌旁组织中的表达2.2 FHIT 及 HIF1 表达与食管鳞癌临床病理特征的关系表2 FHIT 及 HIF1 表达与食管鳞癌临床病理特征的关系在食管鳞癌 pTNM 分期为期组中 FHIT 蛋白总阳性表达率显著高于期组(P0.05)，而 HIF1 的总阳性表达率显著低于期组(P0.05)，说明 FHIT 蛋白及 HIF1 均与食管鳞癌的浸润深度有明显关系;有淋巴结转移组 FHIT 蛋白表达总阳性率显著低于无淋巴结转移组(P0.05)，HIF1
13、表达总阳性率明显高于无淋巴结转移组(P0.05);在分化程度中 高分化组HIF1 表达总阳性率显著低于低分化组(P0.05)。不同性别、年龄间食管癌患者 FHIT 蛋白、HIF1 阳性表达差异无统计学意义(P0.05)，见表 2。2.3 HIF1 及 FHIT 蛋白在食管鳞癌中表达的相关性在食管鳞癌组织中 HIF1 的表达与 FHIT 蛋白的表达呈负相关(P=0.006，r=-0.392),见表 3。表 3 HIF1 及 FHIT 蛋白在食管鳞癌中表达的相关性3 讨论7缺氧是实质性肿瘤物理微环境的基本特征之一2。大量的研究资料显示，缺氧是肿瘤发生恶性转化的始动因素，缺氧调节的一系列基因和蛋白参
14、与了肿瘤的恶性转化3,4。HIF1 因在细胞缺氧诱导所产生的各种特异性应答中具有关键性的作用，近来成为肿瘤研究的热点之一。近年来有研究显示 HIF1 在人类多种恶性肿瘤中过度表达，而在正常组织中无表达5。Chen 等6 研究发现食管鳞癌组织中 HIF1 呈高表达，并与癌组织的分化程度及浸润深度有明显关系(P0.05)。戴泽文等7研究亦显示 HIF1 在食管鳞癌组织中表达明显高于相应正常食管组织，其表达与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有明显关系(P0.05)。本研究也发现在食管鳞癌组织中 HIF1 的表达表达明显高于癌旁正常组织，并与食管鳞癌组织的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有明显的相关性
15、。HIF1 上述作用机制尚未完全清楚，目前认为恶性肿瘤在迅速生长过程中，氧供需失衡导致微环境缺氧，进而诱导 HIF1 大量表达，HIF1 通过上调多种血管生成因子的表达，介导缺氧条件下的血管形成反应，从而在维持肿瘤细胞的能量代谢、新生血管的形成、细胞增殖及侵袭转移等方面起重要作用8。FHIT 基因定位于人类染色体 3p14.2 上，是一个将脆性位点与肿瘤联系起来的抑癌基因。Sozzi 等9研究证明 FHIT 基因的缺失是癌症发生的启动因素，与人类的多种肿瘤发生、发展有关。FHIT8蛋白表达缺失或减少已在多种人类原发肿瘤组织中得到证实，在大部分肿瘤及瘤变的早期阶段，FHIT 基因出现缺失和失活。Kitamura 等 10发现 43.5%(10/23)的不典型增生、 68.4%(13/19)的原位癌和 89.3%(67/75)的浸润性食管鳞癌中 FHIT 蛋白表达缺失或降低。Ishii 等11研究认为, FHIT 基因异常在食管癌发生中是早期、频发事件,FHIT 基因的检测有望成为食管癌早期诊断的方法。Noguchi 等 12采用免疫组化的方法发现，FHIT 蛋
