角蛋白人工腱膜预防全椎板切除术后硬脊膜黏连

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1、1角蛋白人工腱膜预防全椎板切除术后硬脊膜黏连作者:尹海磊邹云雯褚言琛 尹胜廷 【摘要 】 目的探讨角蛋白(keratin substance,KS) 人工腱膜材料用于预防全椎板切除术后硬脊膜黏连的效果。 方法Wistar 大白鼠 60 只,随机分 3 组,每组 20 只,咬除 T12 全椎板,造成 2 mm8 mm 大小的椎板缺损,加入不同处理因素,A 组:空白对照组;B 组:人工腱膜组;C 组:自体腱膜组。术后2、4 、8 , 12 周处死动物,各时间点大体观察采用 Rydell 瘢痕黏连程度评级标准评分。完整取出 T12 节段,包括椎旁肌。经 HE 染色后,镜下组织学观察采用改良 Nuss

2、baum 标准行评分。同时切取2,4 、8 、 12 周人工腱膜组硬膜外瘢痕组织进行透射电镜观察。所测数据行 Kruskal-Wallis 秩和检验,取 0.05作为统计显著差异的标准。 结果KS 人工腱膜材料无毒性和排异反应: A 组的Rydell 评分,改良 Nussbaum 评分高于 B、C 组(P0.05)。B、C 组与对照组比较,均能够明显减少椎板切除术后的硬膜外瘢痕形成。 结论硬膜外瘢痕黏连主要来自硬膜后方的血肿和成纤维细胞(fibroblast,FB)的增殖。KS人工腱膜具有良好的组织相容性,无局部及全身的不良反应,具有良好物理屏障作用。将 KS 人工腱膜放置在椎板缺损处,能够有

3、效2的防止纤维组织侵入椎管,预防硬膜外瘢痕黏连。在动物实验中,KS 人工腱膜能够安全有效的预防椎板切除术后硬膜外瘢痕黏连。 【关键词】 人工腱膜 硬膜外瘢痕 椎板切除术 预防An experimental study on prevention of dura mater spinalis adhssion after laminectomy by using keratin substance (KS) artificial fasciae Abstract:ObjectiveTo study the effect on prevention of dura mater spinalis a

4、dhesion after laminectomy through an experiment by using keratin substance (KS) artificial fasciae.MethodSixty rats were randomly divided into three groups, each had 20. In all rats, total laminectomy were performed at T12 levels led to the defects of 2 mm8 mm. The group A were sutured directly, whi

5、ch was regarded as control group; covered with artificial fasciae in group B; with self-faciae in group C. The animals were killed at the 2nd, 4th, 8th, 12th week after operation respectively, and macroscopy assessment was done with the help of the Rydell Criterion. The spine segment of T12 was remo

6、ved en bloc including the paraspinal tissue, and all specimens were stained with hematoxylin and eosin. Improved Nussbaum 3Criterion was used for the following optical microscopy assessment. Transmission electron microscopy was performed on posterior epidural scar obtained from group-B at the 2nd, 4

7、th, 8th, 12th week after operation respectively. The nonparametric Kruskal-Wallis test was used to determine the differences between the three groups, and a P value of 0.05 was considered statistically significant.ResultThe use of the KS artificial fasciae caused no adverse effects. According to the

8、 Rydell and improved Nussbaum Criterion A-group was statistically significant difference from B and C-group (P0.05).So compared to the control group, KS artificial fasciae and self-fasciae significantly reduced the formation of epidural fibrosis after laminectomy.ConclusionKS artificial fasciae have

9、 the best biological compatibility with the tissues with no adverse effects. The posterior hematoma and fibroblast (FB) are the main source of the epidural fibrosis.As placement of KS artificial fasciae over the laminectomy defect in rats could provide a physical barrier against invasion of fibrous

10、tissue into the vertebral canal,and peridural fibrosis after laminectomy would be effectively prevented. KS artificial 4fasciae is safe and effective in limiting the direct contact by the postlaminectomy epidural fibrosis in rats.Key words:artificial fasciae; spinal epidural fibrosis; laminectomy; p

11、revention全椎板切除术是治疗椎管狭窄症的常用方法之一。手术后常形成硬脊膜黏连。过量的硬膜外瘢痕的形成引起硬膜和神经根的圈合,进而引起腰腿痛等1下腰椎手术失败综合征 (failed back surgery syndrome,FBSS)。手术效果差,手术风险大。因此,预防椎板切除术后硬膜外瘢痕黏连对手术的成功意义重大。预防的方法很多,多数研究者应用不同的材料置入椎板缺损处,如明胶泡沫、微原纤维胶原硅胶膜、项韧带、羧甲基纤维素、透明质酸、可吸收乳酸膜、游离脂肪2 、聚乳酸、膨体聚四氟乙烯 (ePTFE)、聚合纤维素(PCMC) 3 、几丁糖膜 4 、ADCON-L 等。这些材料能广泛应用于

12、临床的并不多。本文作者采用青岛大学医学院附属医院邹云雯教授与广州南方医科大学王铁丹教授共同研制开发的一种新型可吸收性天然生物膜人工材料,即角蛋白(keratin substance,KS)人工腱膜材料,以探讨其预防瘢痕形成的效果及价值。1 材料和方法51.1 实验材料KS 腱膜,是用动物的小肠经过刮制,角蛋白物质强化和生化处理,去掉了抗原性,而形成一种抗原性很低的胶原蛋白纤维膜。1.2 实验动物与分组成年雄性 Wistar 大鼠,体重 300350 g,随机分 3 组,每组 20 只, A 组:空白对照组;B 组:人工腱膜组;C 组:自体腱膜组。1.3 动物模型的制备过程10水合氯醛(0.35

13、 ml100 g)腹腔麻醉,动物取俯卧位,取腰背部切口,咬除 T12 全椎板,造成 2 mm8 mm 大小的椎板缺损,切除部分黄韧带,保留完整硬膜,应用生理盐水冲洗创面 3次,纱布轻拭干净,冲除碎骨屑,彻底止血。实验组置入 KS 人工腱膜,自体健膜组置入自体筋膜,空白对照组不置入材料。1.4 观察指标分别于术后 2、4、8、12 周处死动物,取手术节段的整段脊6柱,包括椎旁肌,行大体观察以及组织学观察;同时切取2、4 、8 、 12 周人工腱膜硬膜外瘢痕组织块约 1mm1mm1mm大小,JEM-1200EX 透射电子显微镜观察。大体观察:各时间点在手术显微镜进行解剖观察,按照 Rydell 瘢

14、痕黏连程度评级标准评分,标准为:将硬膜外黏连程度分为 4 级:(1)0 级:硬膜囊与瘢痕组织无明显黏连; (2)级:硬膜外有稀疏而散在的膜性黏连,但黏连易与硬膜分离; (3)级:硬膜与瘢痕黏连较广泛而紧密,但仍可钝性分离,分离后硬膜仍完整; (4)级:黏连紧密,硬膜与瘢痕需锐性分离,分离后硬膜难以保持完整。组织学观察经 HE 染色后,按改良 Nussbaum 标准行组织学评分。改良 Nussbaum 标准为:(1)0.5 分:硬膜黏连面积50 ,或硬膜外胶原致密,或瘢痕包绕一侧或双侧神经根,硬膜囊受压变形。每项 1.5 分,合计 4.5 分,以评分分级:级:0.5评分1.5 ; 级: 2.0评

15、分3.0; 级:3.5评分4.5。1.5 统计学处理肉眼及光镜检查结果行 Kruskal-Wallis 秩和检验,取双侧0.05作为统计显著差异的标准。72 结果2.1 大体观察2 周:KS 人工腱膜组肌层组织稍水肿,质地较脆,深层可见人工腱膜覆盖于硬膜上,易从硬膜上取下;对照组分离后见已部分机化,与硬膜黏连,但较易分开; 自体腱膜组较易分开。4 周:人工腱膜组切开肌肉层可见有瘢痕组织形成,但质脆易切开,其内有一潜在间隙,硬脊膜光滑;对照组有较多瘢痕组织形成,质较脆,与硬脊膜广泛黏连;自体腱膜组腱膜组织萎缩,较易分开。8 周:人工腱膜组缺损处瘢痕与硬脊膜间有潜在间隙,人工腱膜与周围组织无法区分;对照组缺损处有大量瘢痕组织增生,质坚韧难以分离,对硬膜有明显压迫;自体腱膜组缺损处瘢痕与硬脊膜间有潜在间隙,但腱膜组织萎缩明显。12 周:可见覆盖于缺损上质脆的拱形骨痂,瘢痕与硬膜间有潜在间隙存在,硬膜表面光滑;对照组瘢痕组织体积与 8 周时相比较无明显变化。 Rydell 瘢痕黏连程度评分(表 1)。表 1 Rydell 瘢痕黏连程度评分(略)3 组结果经 Kruskal-Wallis 秩和检验,H=17.7055,

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