《猪il15与prrsv orf5基因真核表达质粒的构建及其免疫原性分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《猪il15与prrsv orf5基因真核表达质粒的构建及其免疫原性分析（92页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、C l a s s i f i e dI n d e x ： U D C ： D i s s e r t a t i o nf o rt h eM a s t e r SD e g r e ei nA g r i c u l t u r e C O N S T R U C T I O NO FE U C A R Y O N P L A S M I D SA N DS T U D YO N I M M U N O G E N I C I T YO FT H EP O R C I N E T E R L E U K I N 一15A N DP O R C 烈E R E P R O D U C T
2、I V EA N DR E S P I R A T O R Y S Y N D R O M EV I R U SO R F 5G E N E C a n d i d a t e ： S u p e r v i s o r ： S h iN a P r o f R e nX i a o f e n g A c a d e m i cD e g r e eA p p l i e df o r ：M a s t e ro f A g r i c u l t u r e S p e c i a l i t y ： P r e v e n t a t i v eV e t e r i n a r yS
3、c i e n c e D a t eo fO r a lE x a m i n a t i o n ： M a y , 2 0 10 U n i v e r s i t y ： N o r t h e a s t A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y 。lJ二 ，l-1i 1 5 3P R R S V 的免疫调节和免疫逃避1 0 1 6P R R S 的疫苗研究进展l l 1 6 。lP R R S 的常规疫苗1l 1 6 2P R R S 的新型疫苗13 1 6 3 免疫佐剂1 5 1 7 研究的目的与意义1 9 2 材料与方法2 0 2 1
4、 试验材料2 0 2 1 1 质粒、工程菌、细胞株2 0 2 1 2 实验动物2 0 2 1 3 主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒2 0 2 1 4 主要生化试剂2 0 2 1 5 主要实验仪器设备21 2 2 试验方法一2 1 2 2 1P R R S VO R F 5 基因、p l L 。1 5 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建2 l 2 2 2p l L 15 原核表达质粒的构建2 6 2 2 3 重组质粒p G E X - 6 p - p l L 1 5 4 8 和p G E X - 6 p - p l L 1 5 2 9 的诱导表达及纯化2 7 2 2 4 抗p l L 1 5
5、多克隆抗体的制备及鉴定2 8 2 2 5p V A X l 一p l L 一1 5 和p V A X I - P R R S V O R F 5 重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 ：1 9 2 2 6p V A X l - p l L 一1 5 和p V A X l - P R R S VO R F 5 重组质粒在小鼠体内的应用及其免疫效果的 、 -， 东北农业人学农学硕1 j 学位论文 检钡9 31 2 3 数据处理3 6 3 结果3 7 3 1P R R S V O R F 5 基因及p l L - 1 5 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建及鉴定3 7 3 1 1P R R S V
6、O R F 5 重组质粒的构建与鉴定3 7 3 1 2p l L 1 5 重组质粒的构建与鉴定3 8 3 2p G E X - 6 p - p l L 一1 5 - 4 8 和p G E X - 6 p p l L 一1 5 2 9 重组蛋白的诱导表达及纯化3 9 3 2 1p G E X 一6 p - p l L 1 5 - 4 8 和p C ；E X 6 p p l L 1 5 2 9 重组蛋白的诱导表达3 9 3 2 2p G E X 6 p p l L 1 5 4 8 重组蛋白的纯化4 0 3 3 抗p I L 1 5 多克隆抗体的制备及鉴定4 l 3 3 1 酶联免疫吸附实验( E
7、L I S A ) 检测多抗效价4 l 3 4 真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测4 1 3 4 1P R R S VO R F 5 基囚真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测4 1 3 4 2p l L 1 5 基因真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测4 2 3 5 小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化4 3 3 5 1 小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化4 3 3 5 2 小鼠外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化4 3 3 6 小鼠脾脏及外周血不同型T 淋巴细胞动态变化4 5 3 6 1 小鼠脾脏及外周血C D 4 + T 淋巴细胞动态变化4 5 3 6 2 小鼠脾脏及外周血
8、C D 8 + T 淋巴细胞动态变化4 6 3 7 小鼠外周血抗P R R S VO R F 5l g G 抗体含量动态变化4 7 3 8 小鼠外周血I F N - y 的检测4 8 3 9P R R S V - O R F 5 在小鼠体内动态分布的检测5 0 4 讨 仑5 2 4 1P R R S VO R F 5 和P I L 15 的重组质粒联合免疫设计5 2 4 2 真核表达载体的选择5 3 4 3p l L 1 5 原核表达载体的构建及其在原核细菌中的表达5 3 4 4 细胞冈子对D N A 疫苗的佐剂效应及其接种剂量对免疫效果的影响5 4 4 4 1 细胞因子对D N A 疫苗的佐
9、剂效应5 4 4 4 2 细胞因子接种剂量对免疫效果的影响5 5 4 5 真核载体表达质粒体外瞬时转染结果分析5 5 4 6 小鼠免疫p V A X l P R R S VO R F 5 与p V A X l p I L 1 5 基因疫苗后脾脏和外周血T 淋巴细胞 转化效果5 6 4 7 小鼠免疫p V A X l P R R S VO R F 5 与p V A X I p l L 一1 5 基囚疫苗后脾脏和外周C D 4 + 和C D 8 + 淋巴细胞数量的动态变化5 7 4 8 小鼠免疫p V A X l P R R S VO R F 5 与p V A X l p l L 一15 基因疫苗
10、后抗P R R S VO R F 5I g G 抗体 含量动态变化5 8 4 9 小鼠免疫p V A X l P R R S VO R F 5 与p V A X I p l L 1 5 基因疫苗后I F N 吖的动态变化分析 目录 ! ；8 4 1 0 小鼠免疫p V A X I - P R R S VO R F 5 与p V A X l p l L 1 5 基因疫苗后P R R S V O R F 5 基因在小 鼠体内动态分布的分析5 9 5 结j 仑6 l j g 【谢6 2 参考文献6 3 攻读硕士学位期间发表的学术论文7 6 r1f、 东北农业人学农学硕上学位论文 C O N T E N T ：h i n e s eA b s t a c t I E n g l i s hA b s t r a c t I I I lI n t r o d u c t i o n l 1 1P o r c i n er e p r o d u c t i v ea n dr e s p i r a t o r ys y n d r o m e 1 1 2E p i d e m i o l o g yo fP R R S 1 1 3P a t h o g e n e s i so fP R R S
