《纳豆激酶粗提液抗血栓和降血脂抗氧化作用的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《纳豆激酶粗提液抗血栓和降血脂抗氧化作用的研究（58页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、分类号 华中农业大学硕士学位论文 密级 纳豆激酶粗提液抗血栓和降血脂抗氧化作用的研究 E 仃e c to fN a t t o k i n a s ee x t r a c t i o no na n t i t h r o m b o s i s - 1一 h y p o h p K l e m i ca n da n t J o x J d a t i v et u n c u o n 研究生：杨敏 学号：2 0 1 0 3 0 4 1 1 0 0 0 9 指导教师：梁运祥教授 指导小组：梁运祥教授 葛向阳副教授 赵述淼副教授 梅余霞讲师 专业：微生物学 获得学位名称：理学硕士 研究方向：
2、微生物产品及应用 获得学位时间：2 0 1 3 年6 月 华中农业大学生命科学与技术学院 二O 一三年六月 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 是否保密否 如需保密，解密时间年月 日 剿嗍愀删 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意 研究生签名：齐易两扣 时间：汐J 弓年6 月
3、日 。 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版， 并提供目录捡索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时 本人保留在其他媒体发表论文的权力 注：保密学位论文( 印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文) 在解密后适用于本授权书 学位论文作者签名：枣妇导师签名：三乓二乡瓷萍 签名日期
4、： 1 3 年占月) 日 签名日期：为眵年专月 日 纳豆激酶粗提液抗血栓降血脂及抗氧化作用的研究 目录 摘要i A b s t r a c t i i 缩略语表i i i 1 前言1 1 日吾1 1 1 纳豆激酶2 1 1 1 纳豆激酶的结构2 1 1 2纳豆激酶的理化性质3 1 1 3 纳豆激酶的溶栓机理5 1 1 4纳豆激酶的药理学研究6 1 2 血栓栓塞性疾病研究概述8 1 2 1影响血栓形成的因素9 1 2 2凝血系统和血栓形成1 0 1 2 3纤溶系统与血栓形成1 0 1 2 4 抗血栓药物简介1 1 1 3 高脂血症形成原因和一般药物治疗1 3 1 4 本课题的研究目的与意义1 4
5、 2材料和方法1 5 2 1实验材料1 5 2 1 1 实验动物1 5 2 1 2 主要仪器设备15 2 1 3 药品与试剂。1 6 2 1 4纳豆激酶。1 6 2 2 实验方法1 7 2 2 1 体外血栓溶解率实验1 7 2 2 2 体外凝血指标测定实验17 2 2 3 纳豆激酶粗提液对凝血时间的影响1 8 2 2 4纳豆激酶粗提液对出血时间的影响1 8 2 2 5 纳豆激酶粗提液对家兔各凝血和溶血指标的影响1 9 华中农业大学2 0 1 3 届硕士研究生学位( 毕业) 论文 2 2 6纳豆激酶粗提液对体内兔颈动脉血栓的影响1 9 2 2 7纳豆激酶粗提液对小鼠尾静脉模型的影响。1 9 2
6、2 8 纳豆激酶粗提液对小鼠肺血栓模型的影响2 0 2 2 9 纳豆激酶粗提液降血脂抗氧化作用的研究2 1 2 2 1 0 纳豆激酶粗提液的安全性实验。2 2 2 2 1 1实验数据分析及处理。2 3 3 结果与分析2 4 3 1体外血栓溶解率实验。2 4 3 2 体外凝血指标测定实验2 4 3 3纳豆激酶粗提液对凝血时间的影响。2 5 3 4 纳豆激酶粗提液对出血时间的影响。2 6 3 5纳豆激酶粗提液对家兔各凝血和纤溶指标的影响2 6 3 5 1 纳豆激酶粗提液对P T 的影响2 6 3 5 2纳豆激酶粗提液对A P T T 的影响2 7 3 5 3 纳豆激酶粗提液对T T 的影响2 7
7、3 5 4纳豆激酶粗提液对E L T 的影响2 8 3 5 5纳豆激酶粗提液对F I B 的影响。2 8 3 5 6纳豆激酶粗提液对F D P 的影响2 9 3 5 7 纳豆激酶粗提液对D 二聚体的影响2 9 3 6 纳豆激酶粗提液对体内兔颈动脉血栓的影响3 0 3 7纳豆激酶粗提液对小鼠尾静脉模型的影响3 0 3 8 纳豆激酶粗提液对小鼠肺血栓模型的影响31 3 9 纳豆激酶粗提液降血脂抗氧化作用的研究3 3 3 9 1 大鼠状态观察3 3 3 9 2 大鼠体重变化3 3 3 9 3 纳豆激酶粗提液对血脂指标的影响3 4 3 9 4纳豆激酶粗提液对大鼠脂肪肝的影响。3 7 3 9 5 纳豆激
8、酶粗提液对各组大鼠抗氧化性能的影响3 9 3 1 0 纳豆激酶粗提液的安全性实验4 1 纳豆激酶粗提液抗血栓降血脂及抗氧化作用的研究 4讨论与小结4 2 参考文献4 6 致谢5 0 I I I 纳豆激酶粗提液抗血栓降血脂及抗氧化作用的研究 摘要 本实验室前期通过优化一株纳豆激酶产生菌的固态发酵工艺，得到活性和稳定 性高的发酵产品，本文通过评价纳豆激酶发酵产品制备的粗提液抗血栓和降血脂抗 氧化的功能以及安全性，为产品的开发和合理应用提供理论依据。 ( 1 ) 纳豆激酶粗提液抗血栓作用的评价是通过测定体外溶栓和抗凝作用，检测 纳豆激酶粗提液引起血液中一系列凝血和纤溶指标的变化和体内构建血栓模型等方
9、 面展开的。研究结果表明，纳豆激酶粗提液在体外具有溶解血栓和抗凝作用。与空 白对照组相比，灌胃纳豆激酶粗提液组小鼠的凝血时间和出血时间均显著延长0 l g L ) ，因此维持血液中纳豆激酶粗提液成分在一定高浓度下具有安全性，没有出 血的危险。 小鼠的血栓模型中灌胃高剂量的纳豆激酶粗提液对血栓有抑制作用，在注射实 验纤溶指标的检测中剂量组表现出的纤溶活性最强。由于静脉给药直接进入体循环， 不经过吸收。而灌胃给药纳豆激酶粗提液部分活性被胃肠道破坏，因此两种不同的 给药途径得到最大药效的剂量不同。血液中浓度2 0 0 0U m L 纳豆激酶粗提液时纤溶 效果最强，而同时表现出较小的抗凝作用，F I
10、B 含量在正常范围内，因此血液中中 剂量的纳豆激酶抗血栓效果最好，同时没有出血的倾向。 ( 8 ) 降血脂抗氧化实验 造模两周后血脂四指标均异常，说明利用高脂饲料建立食源性高血脂模型成 功，喂食高脂饲料大鼠脂类代谢紊乱。由于建模指标水平偏高，可能部分掩盖纳豆 激酶的降血脂的效果，四项指标中纳豆激酶粗提液实验组总胆固醇下降，高密度脂 蛋白升高，低密度脂蛋白下降均与空白对照组存在差异，但与模型组相比均有明显 变化，说明纳豆激酶粗提液具有降血脂的功能。 L D L 。C 是机体内胆固醇的主要载体，将肝脏合成的胆固醇转运到全身各组织 的主要形式。L D L C 被认为是致A s 因子，大量的研究表明L
11、 D L C 具有致A s 的 作用。血清中L D L C 的水平与A s 呈明显的正相关，L D L C 极易被氧化，当机体 的氧化水平升高时，被氧化修饰的L D L C ( O x L D L C ) 会损伤血管内皮细胞，而且此 时极易被单核巨噬细胞的清道夫受体所识别从而携带的胆固醇进入细胞，导致细胞 内的脂质堆积形成的泡沫细胞，泡沫细胞的形成是A s 早期病变的标志。因此血液 中的L D L C 的浓度过高对机体危害极大的。而H D L C 的功能与L D L C 则刚好相 纳豆激酶粗提液抗血栓降血脂及抗氧化作用的研究 反，H D L C 是目前公认的抗A s 因子。它具有抗炎，减少单核
12、细胞趋化蛋白( M C P 1 ) 生成，促进胆固醇从外周组织到肝脏的逆向转运，抑制平滑肌细胞增生和抑制细胞 摄取L D L C 的功能( 张莹等2 0 1 0 ) 。本实验结果表明纳豆激酶粗提液在高脂饮食 诱发的大鼠高脂血症过程中纳豆激酶各组均能升高血清中H D L C ，降低血清中 L D L C 水平，从而对脂质代谢失调有明显的改善和调节作用，延缓或减轻A s 的发 生和发展。 肝脏指数和病理切片实验表明纳豆激酶粗提液能有效减少食源性高血脂导致的 脂肪肝，对肝脏有一定的保护作用。 大量研究资料表明，氧的自由基所介导的脂质过氧化反应在A s 发生和发展过 程中具有重要的致病作用。机体内过氧化物水平的升高是引起内皮细胞受损最主要 的因素，而高脂血症血管内皮细胞功能受到损害是A s 发生的始动环
