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1、高效液相色谱仪操作须知目录v1 仪器安装条件及本卷须知仪器安装条件及本卷须知v2 操作运用本卷须知操作运用本卷须知v2.1 流动相运用的本卷须知流动相运用的本卷须知v2.2 流动相的改换流动相的改换v2.3 储液器的本卷须知储液器的本卷须知v2.4 管路衔接的本卷须知管路衔接的本卷须知v2.5 根本操作本卷须知根本操作本卷须知v3 各单元日常维护各单元日常维护v3.1 色谱柱的保养事项色谱柱的保养事项v3.2 手动进样阀的维护本卷须知手动进样阀的维护本卷须知v3.3 高压恒流泵的维护本卷须知高压恒流泵的维护本卷须知v3.4 紫外检测器的维护本卷须知紫外检测器的维护本卷须知 1、仪器安装条件及本
2、卷须知、仪器安装条件及本卷须知v1)安装本仪器的实验台应程度，稳定，并具有足够的放置空间；v2)防止在具有腐蚀性气体、大量灰尘或能产生强磁场的地方安装本仪器，否那么将会影响仪器的正常运转并且缩短仪器运用寿命；v3)由于仪器所用溶剂是易燃并有毒，故安装设备的房间应彻底通风，且具有向外排风的安装，否那么会引起中毒或身体不适，也会引起火灾；v4)应安装四个以上三芯电源插座220V,510A,必需具有专门的接地线留意，绝不能将电源线的中线作为接地线，并确保仪器电源的电压稳定，否那么会导致仪器的不正常运作；v5)假照实验室无公用的接地线，普通可用1520mm的铜棒打入地下11.5米，用1.2mm左右的塑
3、胶单股导线衔接到电源插座的接地端。v6)照实验室电压不稳，应运用稳压器等必要设备，使电源电压稳定。v7)实验室的室温尽能够控制在15-30范围内，并且动摇要小；湿度在45%-85%范围内；v8)空调或其他设备产生的气流不要直吹仪器，防止光线直射及振动；v9)仪器启动顺序：先开高压恒流泵和紫外检测器，待紫外检测器自检终了，回到默许波长254nm后，翻开任务站软件；v10)仪器封锁顺序：先按泵停顿，封锁氘灯，退出任务站软件，然后再关仪器。v11)仪器应由专人担任，假设运用人员不固定，请预备，以明确运用情况，及时处置和保养。2 、操作运用本卷须知、操作运用本卷须知2.1 流动相运用的本卷须知流动相运
4、用的本卷须知几中脱气方法比较：1氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，延续吹氦脱气，效果较好，但本钱高。2加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。3抽真空脱气法：易抽走有机相。4超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波震荡10-15分钟，此法效果较差，但操作简单。假设管路中运用peek树脂部件，请不要运用以下流动相：浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜。特别留意：含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法：先用5：90的甲醇/水溶液冲洗1小时以上，以洗去缓冲盐；再逐渐加大甲醇/水溶液中甲醇的比例，冲洗系统，最后将系统保管在纯甲醇流动相中。清洗的时间至
5、少为1小时。必需运用HPLC级或相当于该级的流动相，并要先经0.45m薄膜过滤。过滤后的流动相必需充分脱气，以除去其中溶解的气体如O2，如不脱气易产生气泡，添加基线噪声，呵斥灵敏度下降，甚至无法分析。2.2 流动相的改换流动相的改换v在分析过程中，有时需求改换流动相进展分析。一定要留意前一种运用的流动相和所改换的流动相是不是可以相溶。假设前一种运用的流动相和所改换的流动相不可以相溶，那您就要特别留意了。要采用一种与这二种需改换的流动相都可以相溶的流动相进展过渡、清洗。较为常用的过渡流动相为异丙醇，但实践操作中要看详细情况而定，原那么就是采用与这二种需改换的流动相都可以相溶的流动相。普通清洗的时
6、间为30-40分钟，直至系统完全稳定。v如不进展上述“特别留意步骤的操作，将会导致系统管路堵塞。严重时将引起流通池污染堵塞，不得不改换流通池。用户就要承当不用要的损失了。2.3 储液器的本卷须知储液器的本卷须知坚持流动相储液器的清洁是保证仪器正常运用的关键。所以储液器必需清洗干净才干运用。必需运用HPLC级的溶剂。如运用的试剂中含有缓冲盐或者运用非HPLC级的流动相，一定要用0.45m滤膜过滤，去除其中的微粒物质。2.4 管路衔接的本卷须知管路衔接的本卷须知v1将管子完全插入开口端，直至其与开口端的末端相碰为止。否那么将产生死体积，引起峰展宽。v2为了使柱外效应减到最小，获得理想的分析结果，尽
7、量运用管径细的管路作为衔接。v3管路接头不要拧的过紧，以防损坏螺纹。v4运用PEEK管件需留意：PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未察看到上述溶剂溶解PEEK资料的明显迹象，但PEEK遇到上述溶剂会变脆。v5不锈钢管耐受压力限为6000psi；PEEK管耐受压力限近4000psi。2.5 根本操作本卷须知根本操作本卷须知v泵运转前先翻开排空阀，用注射器抽出流动相，察看10秒，流动相应延续流出。v不用排空阀时应将其封锁，否那么大气压力会使流动相从排空阀出口流出。v在运用仪器过程中，留意贮液瓶里的流动相能否够用，如快用尽，应及时改换。v改换流动相时务必停泵，防止吸入大量空气，影响仪器正
8、常运作。v在启动分析进样时，请快速板动7725i进样阀，否那么会引起系统压力突跳，影响仪器的运用寿命。v如对样品分析的定性定量要求较高，应配置柱温箱，坚持温度恒定。v假设流动相不是纯甲醇，样品分析终了后，必需用HPLC级甲醇对泵及进样阀进展清洗，大约半小时后，待压力重新回落并稳定，方可关泵。v假设流动相中含有缓冲盐，那么须根据其特殊的清洗方法进展清洗上述已提到过。3、各单元日常维护、各单元日常维护3.1 色谱柱的保养事项色谱柱的保养事项v为了维护色谱柱，延伸其运用寿命，在运用时应采取以下几方面措施：v应在柱头加烧结片不锈钢滤片，需求时加维护柱，防止柱头堵塞，影响分析效果；流动相PH7时用大粒度
9、同种填料作预柱；溶剂的化学腐蚀不能太强；要防止微粒在柱头沉降；v为防止高压冲击，泵上的压力限制不宜太高，普通在1520MPa为宜，在旧柱或梯度洗脱时应稍高些，以防止因上限设置过低而呵斥正常运用中的中途停机；色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充溢溶剂甲醇或乙腈，两端封死。3.2 手动进样阀的维护本卷须知手动进样阀的维护本卷须知v在每次运用后，必需冲洗进样阀。进浓度差别比较大的样品时要用公用工具不是带针头的注射器。必需反复冲洗进样阀的取样位和进样位各数次，每次数毫升，以防止无机盐堆积、样品微粒呵斥阀内部磨损或阻塞及样品的交叉污染。v安装进样阀时，阀的5，6出口要与注射器在同一程度线上，以防止发生虹吸
10、景象，导致进样量的反复性变异。v进样量的多少要根据定量环的体积决议：v当样品量较少时：进样体积由注射器的进样体积决议，但最大体积要小于环体积的3/4。v当样品量较多时：进样体积由定量环的体积决议，为保证样品完全把定量环内的流动相置换干净，进样量应为环体积的35倍。v进样时必需运用公用的液相注射器。绝对制止用气相注射器尖针头进样。注射器前应安装公用的样品过滤器。3.3 高压恒流泵的维护本卷须知高压恒流泵的维护本卷须知v泵的密封圈是最易磨损的部件，密封圈的损坏可引起系统的许多缺点。密封圈的寿命与资料质量、运用压力大小、缓冲液的运用情况以及合理的保养有关。采取以下措施可以延伸密封圈的寿命：vA、在没
11、有流动相或流动相还没进入泵头的情况下，绝对不能启动泵，防止呵斥柱塞杆与密封圈的干磨；vB、每次运用终了后应将整个系统液路中的缓冲液冲洗干净，防止盐堆积，整个液路应浸泡在无缓冲液的溶液或有机溶剂中；长期不运用也应定期开泵冲洗整个液路；vC、用HPLC级的试剂；vD、运用不锈钢滤芯，要留意防止因泵阻塞呵斥压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机；vE、压力下限应设置在0.51MPa,以防止储液器中的流动相被抽干或严重渗漏而引起柱塞杆与密封圈干磨；vF、有柱后清洗功能的高压恒流泵还要留意保管清洗液，否那么将失去柱后清洗效果。3.4 泵的压力不稳定泵的压力不稳定v处于良好操作形状的泵，应该能使色谱图上的基线平稳
12、；保管时间的反复性好。在等度洗脱时压力动摇小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。v在日常运用过程中，假设出现压力不稳的景象。缘由有几点：v1)管路里有气泡，建议由流动相多走些时间。或翻开排空阀，用配件里的针筒多抽几下。还有就是关紧排空阀，堵住检测器上的背压管，使流通池的压力添加，赶出气泡。v2)输入单向阀失效所致，这也是经常遇见的。v3)密封圈磨损导致走漏所呵斥。v判别输入单向阀失效的步骤为：v1在不开UV检测器与任务站的前提下，将其中一台泵接上蒸馏水作为流动相。v2翻开排空阀，用针筒抽出些流动相，确认泵中已有该流动相，然后将针筒内的液体排出，并重新接在排空阀上。v3按“设置键选择：流
13、量5ml/min，时间5min留意：此时排空阀仍要翻开，否那么将冲坏色谱柱v4冲洗终了后，查看针筒内流动相体积能否为25ml55=25，假设正确，那么阐明该泵在低压情况下无缺点；假设不正确，那么阐明该泵中某一单向阀失效普通为输入单向阀。v5用同样方法测试另外一泵v6假设是双泵梯度分析系统，泵压力不稳普通是其中一台泵压力不稳所致，须逐个分析。等度只需测试一台就可以了。呵斥单向阀失效缘由：呵斥单向阀失效缘由：1液相色谱从废品到客户手中有一段时间，出厂前液相色谱从废品到客户手中有一段时间，出厂前每台仪器都要经过调试，一段时间内不用会呵斥内每台仪器都要经过调试，一段时间内不用会呵斥内部残留流动相与宝石
14、球粘连的情况。客户长期不用部残留流动相与宝石球粘连的情况。客户长期不用也会呵斥类似情况，建议客户在长期不运用情况下，也会呵斥类似情况，建议客户在长期不运用情况下，每周用甲醇作为流动相，开机每周用甲醇作为流动相，开机1小时使液路充溢液小时使液路充溢液体。体。2流动相内杂质或其它缘由污染了单向阀。虽然有流动相内杂质或其它缘由污染了单向阀。虽然有的客户以为流动相已过滤过了，但长期运用后，由的客户以为流动相已过滤过了，但长期运用后，由于液相色谱是微量分析仪器，难免会产生类似情况。于液相色谱是微量分析仪器，难免会产生类似情况。这是液相色谱的普遍景象，国内外的泵只需是被动这是液相色谱的普遍景象，国内外的泵
15、只需是被动单向阀，都会有类似景象发生，这并不是仪器的质单向阀，都会有类似景象发生，这并不是仪器的质量问题，而是日常维护的一部分。如今引见一个简量问题，而是日常维护的一部分。如今引见一个简单而有效的单向阀失效的处置方法。单而有效的单向阀失效的处置方法。单向阀失效处置方法：1拧下输入单向阀一共两个2将2个单向阀放入有蒸馏水的超声波清洗器，清洗10分钟。3用本公司提供的公用针头冲一下将针头拧紧在单向阀输入端即可，见配件清单。冲的时候留意要用手按住单向阀前头的垫圈，防止冲时垫圈被冲落。4终了后，将输入单向阀装回原位即可。留意单向阀须拧紧假设两个泵在低压形状下流量都正确，那么建议分别将两泵衔接上色谱柱进
16、展高压测试。高压测试详细操作方法：1在双泵分析系统衔接的前提下，只须先翻开其中一泵确认接好流动相2设置流量1ml/min3启动泵4察看运转期间，泵的压力能否稳定。假设稳定，阐明泵无问题；假设泵压力不稳，那么应检查各管路接头有无泄露，并将有走漏的接头拧紧；假设无走漏，那么问题能够还是出在单向阀上，须再次冲单向阀，反复实验。注：不用翻开UV检测器5反复上述步骤，对另一台泵进展高压测试。如还出现压力不稳的情况，有能够是密封圈受损，建议改换。v预防泵缺点的几项措施:v1、用高质量试剂和HPLC级溶剂；2、过滤流动相和溶剂；3、脱气；4、每天开场运用时放空排气；v5、任务终了后从泵中洗去缓冲液；6、不让
17、水或腐蚀性溶剂滞留泵中；7、定期改换垫圈；8、需求时加光滑油；9、查阅有关泵操作手册中的其它建议。10、为了能尽快排除缺点，平常应常备密封圈、单向阀输入与输出、泵头安装、各式接头、保险丝等零部件及改换工具。3.4 紫外检测器的维护本卷须知紫外检测器的维护本卷须知v要坚持检测器中流通池清洁，每天用后留意冲洗整个液路。要定期用强溶剂反向冲洗检测池断开柱，以清洗流通池；v流动相要用脱过气的，防止因气泡滞留在流通池内而影响分析结果；v留意氘灯的保养，为了节省灯的运用寿命，可在不关机的情况下，只把灯关掉建议：最好在需求关灯时间4小时以上才关灯，由于频繁的开关灯，同样会缩短灯的运用寿命。谢谢观看！看！第八版第七版第六版第五版第四版第三版第二版第一版WSY18562006.08.20版 本改 编 者日 期备 注
