《Agilent1100色谱工作站操作培训ppt课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Agilent1100色谱工作站操作培训ppt课件（41页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Agilent 1100/化学工作站操作培训化学工作站操作培训Agilent 1100 日常开机步骤日常开机步骤打开计算机，进入Windows系统，CAG Bootp Server 程序将自动运行；打开HPLC 1100各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功约12min后，进入Online 工作站系统初始化：（主要目的：排除系统中的气泡）； 打开Purge 阀；加大泵流量并开启泵，快速冲洗实验所用的各个通道，至无气泡从废液管排出，（eg. 设A通道100%，5mL/min，冲洗A通道至无气泡排出；再分别依次冲洗所需其余通道B、C、D等）；降低流量及溶剂比例成实验初始条件，并单击OK确
2、认执行；（eg. 实验二的条件Flow: 1.0mL/min，A：20% (H2O), B: 80% (MeOH)；关闭Purge阀，完成系统初始化。系统平衡：（主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量）调出本次实验所需方法，保持泵继续工作，以实验初始的流动相冲洗、平衡柱子一段时间。（一般约30min ，可自己根据本人的仪器配置情况计算，要求至少以色谱柱几何体积510倍体积的流动相冲洗、平衡系统。）；在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。（一般灯需要20min 左右的稳定时间。）点击System On图标，可以同时打开柱温箱和检测器；打开View 菜单下的Onl
3、ine Signal 窗口，单击Change 键，选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、Y轴范围，观测色谱基线；基线稳定后可以进样分析经验上，基线波动12m AU常规分析或0.5mAU痕量分析就可算是基线稳定。）填写Sample InformationRun Method (或手动打针进样并切换进样阀)编辑一个完整的方法编辑一个完整的方法Edit Entire MethodTCCALSAll最窄峰的半峰宽PeakWidthSaveBWrefBWsamBWref尽量靠近样品的最大吸收样品没有吸收/吸收比较弱处WLrefSlit吸收光谱的半峰宽BWsam大于溶剂的截止波长20nm以上样品的最大吸收
4、WLsamDADWLsamVWD压力限PressureLimits时间表Timetable后运行Posttime停止时间Stoptime溶剂Solvent流量Flow泵Pump二、仪器控制/数据采集参数 Instrument/Acquisition 描述性的文字一、方法信息 Method information：PeakWidth手动积分（Manual events）积分事件（Integration events）自动积分（Auto Integrate）3、积分优化：FullRange2、谱图优化：1、调用数据文件三、数据分析Data Analysis）平均/取代选级别LevelRecalib
5、rate第三针平均/取代选级别LevelRecalibrate第二针输入含量Add Level第一针Level 3平均/取代选级别LevelRecalibrate第三针平均/取代选级别LevelRecalibrate第二针输入含量Add Level第一针Level 2平均/取代选级别LevelRecalibrate第三针平均/取代选级别LevelRecalibrate第二针指定参考峰、内标峰输入组分名称、含量New Calibration Table第一针Level 1 4、建立校正表 Calibration 保管/另存方法Save/Save AsGLP Data、Save Method Wi
6、th Data规定执行数据采集、分析或同时进行四、运行时间对照表Run Time Checklist）色谱图选项输出目的地报告格式Short、Detail、Performance、Performance +Noise）定量方式ESTD、ISTD.）6、设定报告格式权重Weight原点Origin类型Type校正曲线 Calibration Curve样品单位 Amount units5、校正设置Calibration Setting）A1A2A3假定：C1C2C3123假定：知：面积百分比一、标样A标1A标2A标3C标1C标2C标3123RF1RF3RF2二、样品A1A2A3123归一化法一、
7、标样A标C标1RF二、样品A样1外标法一、标样A标A标内C标C标内1ISTDRF标RF标内二、样品A样A样内1ISTD假定：C样C样内RF样RF样内可求：RF样那么：？那么：内标法PumpColumn手动阀流路图PUMPALSColumnTCCDet甲醇水40%60%40%60%甲醇水40%60%90%10%泵进样器色谱柱检测器40%60%甲醇水40%60%90%10%5倍以上的总延迟体积，平衡柱子，置换流动相延迟体积死体积1100 结构框图甲醇水40%60%90%10%40%60%10Stoptime35Postime=25=10PosttimeABCDAIV缓冲盐+有机相，盐析出会沉淀缓冲
8、盐+有机相，析出的盐被A路的水相稀释，避免沉淀的发生四元比例阀洗柱子的方法流动相：甲醇80%） +水20%）样品：有机物直接用100%的甲醇洗柱子流动相：缓冲盐+甲醇样品：有机物洗盐： 水100%）水90%）+甲醇10%）洗有机物：甲醇100%）流路连接样品回路废液排空管样品回路到色谱柱来自泵出口手动进样器前视图后视图样品定量管样品定量管自动进样器步骤步骤1步骤步骤2步骤步骤3进样口检测器色谱图色谱柱溶剂泵混合器HPLC 结构框图HPLC 结构框图初始带宽最终带宽AA = 涡流扩散多径扩散仔细填充柱子使用均一的载体线 速 度HETP涡流扩散相分散分散滞流的流动相流动相固定相C.uC = 传质阻
9、力在低流速下可以降低传质阻力使用小颗粒载体可以降低传质阻力HETP线速度传质阻力往复活塞泵(单向阀)Gold SealSapphireInsertRuby BallSpringInsert单向阀及往复活塞泵减小流量脉冲并联柱塞泵单向阀PABABSinglePistonDelivery柱塞A前进柱塞B后退CombinedDelivery相消干扰通常也需要阻尼器增加了单向阀的使用数量P串联柱塞泵单向阀P需要阻尼器压缩因子补偿脉冲阻尼器并联柱塞泵紫外可见检测器根据Beer定律，通过检测池透射光的强度与溶质浓度成正比。I0 = 入射光强度I = 透射光强度A = 吸光度 a = 摩尔吸光系数b = 检
10、测池长度c = 溶质浓度IICboDetector CellLog = A = abcI0IBeer定律Instrumentation - AbsorbanceVariable Wavelength (UV/Visible)LightMonochromatorflowSourceCellDetectorElementSlitsMechanicalGratingDetectorsVWD 光路图Instrumentation - AbsorbancePhotodiode Array (UV/Visible)LightFlowSourceCellPhotodiodeLensesSlitsArrayH
11、olographicGratingDetectorsDAD 光路图单元泵工作原理单元泵工作原理Authoring Division Name File NameSecurity Notice (if required) DamperSealPistonBall Screw DriveMotor with EncoderGearOutlet Ball ValveActive Inlet ValvePurge valve单元泵工作原理四元泵工作原理Authoring Division Name File NameSecurity Notice (if required) Vacuum Chambe
12、rMCGVAIVOBVDamperPurge ValveWasteto injection devicefrom solventbottlesMCGV 比例阀AIV 主动阀OBV 单向阀四元泵工作原理二元泵工作原理二元泵工作原理DamperPurge valveMixerABInlet valveOutlet valveWasteInlet valveOutlet valve二元泵工作原理Ceramic statorVespel rotor seal (6-port)pureimpure7.67.88.08.28.4Time(min)200400Wavelength(nm)Purity Mat
13、ch 764200400Wavelength(nm)Purity Match 999AbsorbanceAbsorbance纯度因子六通阀之扎针123456泵色谱柱定量环废液排空六通阀之装样123456泵色谱柱定量环废液排空123456泵色谱柱定量环废液排空六通阀之进样六通阀之进样123456泵色谱柱定量环废液排空六通阀之小刻度进样一六通阀之小刻度进样一123456泵色谱柱定量环废液排空六通阀之小刻度进样二六通阀之小刻度进样二 积分事件表：面积加和积分事件表：面积加和 开启开启/封锁封锁 积分事件表：积分事件表： 基线划至所有峰谷开启基线划至所有峰谷开启/封封锁锁 积分事件表：基线后置，维持开启积分事件表：基线后置，维持开启/封锁封锁Baseline Back基线后置基线后置基线维持基线维持 积分事件表：积分器与负峰检测开启积分事件表：积分器与负峰检测开启/封封锁锁积分器积分器 封锁封锁/开启开启负峰检测开启负峰检测开启/封锁封锁 积分事件表：积分事件表： 切线撇去开启切线撇去开启/封锁封锁
